Заглавная страница
Избранные статьи
Случайная статья
Познавательные статьи
Новые добавления
Обратная связь

ТОП 10 на сайте

Приготовление дезинфицирующих растворов различной концентрации

Техника нижней прямой подачи мяча.

Франко-прусская война (причины и последствия)

Организация работы процедурного кабинета

Смысловое и механическое запоминание, их место и роль в усвоении знаний

Коммуникативные барьеры и пути их преодоления

Обработка изделий медицинского назначения многократного применения

Образцы текста публицистического стиля

Четыре типа изменения баланса

Задачи с ответами для Всероссийской олимпиады по праву

Мы поможем в написании ваших работ!

ЗНАЕТЕ ЛИ ВЫ?

Влияние общества на человека

Приготовление дезинфицирующих растворов различной концентрации

Практические работы по географии для 6 класса

Организация работы процедурного кабинета

Изменения в неживой природе осенью

Уборка процедурного кабинета

Сольфеджио. Все правила по сольфеджио

Балочные системы. Определение реакций опор и моментов защемления

Главная Избранные Случайная статья Познавательные Новые добавления Обратная связь FAQ

Влияние на микроорганизмы биологических факторов. Антибиотики. Бактериофаги

Стр 1 из 2Следующая ⇒

Влияние на микроорганизмы биологических факторов. Антибиотики. Бактериофаги

Цель занятия:

изучить характер влияния и механизмы действия биологических факторов на микроорганизмы, химиотерапевтические препараты.

Студент должен знать:

1. Биологические факторы, влияющие на микроорганизмы.

2. Химиотерапия. Понятие о химиотерапевтических препаратах и

химиотерапевтическом индексе. Принципы антимикробной терапии.

3. Классификация антибиотиков по химическому строению, происхождению,

механизму и спектру антимикробного действия, способам получения.

4. Методы изучения антибиотикочувствительности бактерий.

5. Механизмы лекарственной устойчивости возбудителей инфекционных болезней.

Пути ее преодоления.

6. Осложнения антибиотикотерапии, их предупреждение.

7. Бактериофаги (умеренные и вирулентные). Лизогения. Применение фагов

в биотехнологии, микробиологии и медицине.

8. Пробиотики (эубиотики).

Студент должен уметь:

• определять чувствительность бактерий к антибиотикам и бактериофагам;

• интерпретировать антибиотикограмму.

Студент должен иметь представление:

о возможности использования бактериофагов для выявления источников инфекции (эпидемическое маркирование - метод фаготипирования).

Работа № 1. Микробный антагонизм

Цель работы: изучить действие метаболитов кишечной палочки на водный вибрион.

Самостоятельная работа:

а) Зарегистрировать результат опыта действия бактериоцинов. Объяснить механизм микробного антагонизма между кишечной палочкой (штамм E. coli М-17) и вибрионом (водный вибрион).

б) Объяснить назначение и механизм действия пробиотиков с учетом изменений качественного и количественного состава микрофлоры, классифицировать предложенные препараты. Результаты внести в таблицу.

водный вибрион

кишечная палочка

Результат:_________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Вывод:_________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Название пробиотика	Классифика-ционное положение	Действующее начало	Получение	Применение	Способ применения

Теоретическая справка

Микробный антагонизм

При посеве исследуемого материала или смеси микробов присутствие микробов-антагонистов обнаруживается по светлым зонам, окружающим их колонии. Эти зоны свидетельствуют о подавлении роста угнетаемого микроба, причем величина зоны угнетения определяет ту или иную степень активности антагониста. Механизмы микробного антагонизма: 1) разная скорость роста микроорганизмов; 2) синтез метаболитов: экзотоксинов и бактериоцинов.

Методика.

На чашку с МПА широкой полосой засевают суточную бульонную культуру E.coli М-17. Перпендикулярно посеву вплотную подсевают суточную бульонную культуру угнетаемого микроба (вибрион). Результат учитывают через сутки пребывания в термостате: рост угнетаемого микроба отступает от полосы, заселенной антагонистом.

Практическое значение антагонизма для медицины: 1) использование микробов-антагонистов для производства антибиотиков; 2) применение пробиотиков (эубиотиков) - бактериальных препаратов, содержащих живых антагонистически действующих микроорганизмы, для угнетения патогенных и условно-патогенных микробов и лечения нарушений нормального микробиоценоза кишечника (дисбактериоза): колибактерин, бифидумбактерин, лактобактерин, бификол и т.д.

Схема описания пробиотиков:

Название препарата ………………….

Классификационное положение: пробиотик

Действующее начало: метаболиты - бактериоцины

Получение: из живых представителей нормальной микрофлоры организма человека,

высушенных лиофильно

Применение: для лечения дисбактериоза, нормализации кишечного микробиоценоза

Способ применения: перорально

Работа № 2. Фитонциды

Цель работы: определить действие фитонцидов чеснока на микроорганизмы.

Самостоятельная работа: оценить результат действия на сарцину, кишечную палочку и стафилококк фитонцидов чеснока. Объяснить, почему препараты из фитонцидов не нашли широкого применения в медицине.

Сарцина

Стафилококк

Кишечная палочка

Результат:______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Теоретическая справка

Фитонциды - антибиотики, образуемые высшими растениями. Подробное изучение антибиотических веществ высших растений было проведено русским ученым

Б. П. Токиным (1951 г). Продуцентами являются эвкалипт, лук, чеснок черемуха, сосна и др. В настоящее время изучено большое число антибиотиков образуемых высшими растениями, некоторые из них получены в химически чистом виде. Это аллицин, рафанин и др. Однако следует знать, что большинство из них является эфирными соединениями и в результате этого при изготовлении и хранении быстро утрачивают антимикробную активность.

Работа № 3. Методы изучения антибиотикочувствительности

Цель работы: изучить методы определения антибиотикочувствительности бактерий. Научиться классифицировать антибиотики.

Самостоятельная работа: определить чувствительность бактериальной культуры к антибиотикам. Зарисовать, сделать вывод. Классифицировать антибиотики

Схема описания антибиотиков

Название препарата ………………….

Классификационное положение: антибиотик

Действующее начало: антибиотик (механизм действия на микробную

клетку)

Получение: путем биосинтеза

полусинтетические

путем химического синтеза

Применение: лечение инфекций

Способ применения: перорально; парентерально; местное применение

Методы изучения антибиотикочувствительности

Метод бумажных дисков (диско-дуффузионный)

Методика. Бактериальную культуру засевают газоном на питательный агар в чашку Петри.

На засеянную поверхность пинцетом помещают на одинаковом расстоянии друг от друга бумажные диски, содержащие определенные дозы разных антибиотиков. Посев инкубируют при 37°С до следующего дня. По диаметру зон задержки роста бактерий определяют ее чувствительность к антибиотикам.

Для получения достоверных результатов необходимо применять стандартные диски и питательные среды, для контроля которых используются эталонные штаммы соответствующих микроорганизмов.

Метод дисков не дает надежных данных при определении чувствительности микроорганизмов к плохо диффундирующим в агар полипептидным антибиотикам (например, полимиксин, ристомицин). Если эти антибиотики предполагается использовать для лечения, рекомендуется определять чувствительность методом серийных разведений.

Оценка результатов определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам методами дисков и серийных разведений

Антибиотик	Метод дисков: диаметры зон задержки роста на среде АГВ (агар Гурьева-Васильева)	Метод серийных разведений: минимальная ингибирующая концентрация мкг/мл
Устойчивые	Умеренно устойчивые	Чувстви- тельные	Устойчивые	Чувстви- тельные
Бензилпенициллин	≤ 20	21-28	≥ 29	-	≤ 0.1
Ампициллин	≤ 20	21-28	≥ 29	-	≤ 0.2
Карбенициллин	≤ 14	15-18	≥ 19	≥ 32	≤ 16
Метициллин	≤ 13	14-18	≥ 19	-	≤ 3
Оксациллин	≤ 15	16-19	≥ 20	-	≤ 3
Цефалексин	-	-	-	≥ 32	≤ 10
Цефалотин	≤ 14	15-18	≥ 19	≥ 32	≤ 10
Стрептомицин	≤ 16	17-19	≥ 20	≥ 15	≤ 6
Неомицин	≤ 12	13-16	≥ 17	-	≤ 10
Канамицин	≤ 14	15-18	≥ 19	≥ 25	≤ 6
Мономицин	≤ 13	14-17	≥ 18	-	≤ 10
Гентамицин	≤15		≥ 16	≥ 6	≤ 4
Тетрациклин	≤ 16	17-20	≥ 22	≥ 12	≤ 2
Эритромицин	≤ 17	18-21	≥ 22	≥ 8	≤ 2
Линкомицин	≤ 19	20-23	≥ 24	≥ 8	≤ 2
Левомицетин	≤ 15	16-18	≥ 19	≥ 16	≤ 8
Рифампицин	≤ 12	13-15	≥ 16	≥ 8	≤ 2
Полимиксин	≤ 11	12-14	≥ 15	≥ 50 Ед/мл	-
Ристомицин	≤ 9	10-11	≥ 12	-	≤ 5

Метод серийных разведений

б) определить минимально-подавляющую концентрацию антибиотиков по отношению к культуре золотистого стафилококка (St. aureus). Выбрать антибиотик для лечения.

Гентамицин к.к. к. а/б к.б.

Разведения антибиотика

25 12,5 6,25 3,125 1,56 0,78 0,39

Результат:_________________________________________________________________

Ампициллин к.к. к. а/б к.б.

Разведения антибиотика

25 12,5 6,25 3,125 1,56 0,78 0,39

Результат:_________________________________________________________________

Вывод: ___________________________________________________________________

__________________________________________________________________________

Теоретическая справка

Метод серийных разведений

Данным методом определяют минимальную ингибирующую концентрацию (МИК) антибиотика рост исследуемой культуры бактерий.

Методика. Готовят основной раствор, содержащий определенную концентрацию антибиотика (мкг/мл или ЕД/мл) в специальном растворителе или буферном растворе. Из него готовят последующие разведения в бульоне (в объеме 1 мл), после чего к каждому разведению добавляют 0,1 мл исследуемой бактериальной суспензии, содержащей 10⁶-10⁷ бактериальных клеток в 1 мл. В последнюю пробирку вносят 1 мл бульона и 0,1 мл суспензии бактерий (контроль культуры). Посевы инкубируют при 37°С до следующего дня, после чего отмечают результаты опыта по помутнению питательной среды, сравнивая с контролем культуры. Последняя пробирка с прозрачной питательной средой указывает на задержку роста исследуемой культуры бактерий, под влиянием содержащейся в ней минимальной ингибирующей концентрации антибиотика.

Номер пробирки	Разведение антибиотика	концентрация антибиотика, мкг/мл	Исследуемая культура, мл	рост бактерий (помутнение среды)
	1:100		0,1	-
	1:200		0,1	-
	1:400		0,1	-
	1:800	12,5	0,1	-
	1:1600	6,25	0,1	+
	1:3200	3,12	0,1	+
	1 мл бульона без антибиотика	0,1	+ (контроль)

Оценку результатов определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам проводят по таблице, которая содержит значения МИК антибиотиков для устойчивых и чувствительных штаммов.

К чувствительным относятся штаммы микроорганизмов, рост которых подавляется при концентрациях препарата, обнаруживаемых в сыворотке крови больного при использовании обычных доз антибиотиков. К умеренно устойчивым относятся штаммы, для подавления роста которых требуются концентрации, создающиеся в сыворотке крови при введении максимальных доз препарата Устойчивыми являются микроорганизмы, рост которых не подавляется препаратом в концентрациях, создаваемых в организме при использовании максимально допустимых доз.

в) классифицировать антибиотики.

Название антибиотика	Классифика-ционное положение	Действующее начало	Получение	Применение	Способ применения

Работа № 4. Методы изучения бактериальных вирусов (фагов)

Цель работы: изучить методы применения в практической медицине диагностических и лечебно-профилактических бактериофагов.

Самостоятельная работа:

а) учесть результат опыта по определению родовой принадлежности исследуемой культуры, выделенной от больного с кишечной инфекцией с помощью диагностических бактериофагов.

Фаготипирование бактерий

П О С Е В Ы

стафилококка от стафилококка от стафилококка от

пациента мед. работника 1 мед. работника 2

Теоретическая справка

Фаготипирование бактерий

По спектру действия различают следующие бактериофаги: поливалентные, лизирующие родственные виды бактерий; моновалентные, лизирующие бактерии определенного вида; типовые, лизирующие отдельные типы (варианты) бактерий.

Например, один штамм патогенного стафилококка может лизироваться несколькими типами фагов, поэтому все типовые фаги (24) и штаммы патогенных стафилококков объединены в 4 группы.

Метод фаготипирования имеет большое значение для эпидемиологического исследования, так как позволяет выявить источник и пути распространения возбудителей заболеваний. С этой целью определяют фаговар выделенной из патологического материала чистой культуры на плотных питательных средах с помощью типовых диагностических фагов.

Фаговар культуры микроорганизмов определяют по тому типовому фагу, который вызвал ее лизис. Выделение бактерий одного фаговара от разных обследуемых указывает на источник заражения.

Схема описания бактериофагов:

Название препарата…………………

Классификационное положение: бактериофаг

Действующее начало: бактериофаг

Получение: фильтрат фаголизата бульонной культуры соответствующего микроорганизма

Применение:

лечебно-профилактические - для лечения и профилактики соответствующих инфекций;

диагностические - для идентификации микроорганизмов; определения источника инфекции

Способ применения: в зависимости от назначения фага

в) классифицировать бактериофаги.

Название бактериофага	Классифика-ционное положение	Действующее начало	Получение	Применение	Способ применения

Подпись преподавателя_________________________________________________________

САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА ВО ВНЕУРОЧНОЕ ВРЕМЯ

Классифицируйте препараты (см. теоретическую справку):

Лактобактерин

Классификационное положение___________________

Действующее начало_____________________________

Получение_____________________________________