Каковы методы диагностик заболеваний, вызываемых энтеровирусами?

Для диагностики заболеваий, вызванных энтроврусами, используют вирусологический метод и различные серологические реакции

При этом следует отметить, что на фоне резкого снижения заболевемости полиомиелитом наблюдается рост полимиелитоподобных заболеваний, принимающих иногда характер групповых вспышек. В связи с этим необходимо иметь в виду возможность обнаружения вирусов Коксаки и ЕСНО, т.е. исследовние необходимо проводить в такизх случаях на всю группу энтеровирусов.

Для их выделения используют кишечное содержимое, смыв и мазки из зева, реже ликвор или кровь, а в случае смерти больного исследуют кусочки ткани из разных органов.

Исследуемым материалом заражают культуры клеток (полиовирусы, ЕСНО, Коксаки В и некотрые серовары Кокски А), а так же новорожденных мышей (Коксаки А).

Типирование выделенных вирусов осуществляется в реакциях нейтрализации, РТГА, РСК, реакции преципитации, используя эталонные смеси сывороток различных сочетаний

Для выделения АТ в сыворотках людей используют серологические реакции (РН, цветные реакции, РТГА, РСК, реакции преципитации), но для этих целей необходимо иметь парные сыворотки от каждого больного (в острый период и через 2-3 нед. от начала болезни). Реакции считаются положительными при увеличении титра АТ не менее чем в 4 раза. При двух этих методах используют также ИФМ (для обнаружения АТ или АГ)

Вопрос № 16

Каким образом онкогенные вирусы вызывают трансформацию нормальных клеток в злокачественные? Что такое протоонкоген и онкоген?

Протоонкоген — это обычный ген, который может стать онкогеном из-за мутаций или повышения экспрессии. Многие протоонкогены кодируют белки, которые регулируют клеточный рост и дифференцировку. Протоонкогены часто вовлечены в пути передачи сигнала и в регуляцию митоза, обычно через свои белковые продукты. После активации (которая происходит из-за мутации самого протоонкогена или других генов) протоонкоген становится онкогеном и может вызвать опухоль.

Онкоген — это ген, продукт которого может стимулировать образование злокачественной опухоли. Мутации, вызывающие активацию онкогенов, повышают шанс того, что клетка превратится в раковую клетку. Считается, что гены-супрессоры опухолей(ГСО) предохраняют клетки от ракового перерождения, и, таким образом, рак возникает либо в случае нарушения работы генов-супрессоров опухолей, либо при появлении онкогенов (в результате мутации или повышения активности протоонкогенов,

Протоонкоген может стать онкогеном путем относительно незначительной модификации его естественной функции. Существует три основных пути активации:

1)Мутация внутри протоонкогена, которая меняет структуру белка и

· повышает активность белка (фермента)

· при этом утрачивается регуляция экспрессии соответствующего гена

2)Повышение концентрации белка путем

· повышения экспрессии гена (нарушение регуляции экспрессии)

· повышение стабильности белка, увеличение периода полужизни и, соответственно, активности в клетке

· дупликация гена (хромосомная перестройка), в результате чего повышается концентрация белка в клетке

3)Транслокация (хромосомная перестройка), которая вызывает

· повышение экспрессии гена в нетипичных клетках или в нетипичное время

· экспрессия постоянно активного гибридного белка. Такой тип перестройки в делящихся стволовых клетках костного мозга приводит к лейкемии у взрослых.

 

Вопрос № 17

Каким способом происходит заражение вирусом гепатита В? какие формы вирусных гепатитов вы знаете?

Гепатит В – инфекционное заболевание человека, характеризующееся избирательным поражением печени вирусом. Эта форма гепатита является наиболее опасной по своим последствиям среди известных форм вирусных гепатитов.

Источником заражения вирусом гепатит В является только человек. Заражение происходит не только парентеральным, но и половым путем, а также и вертикальным (от матери к плоду), т.е. практически заражение вирусом гепатита В возможно разными способами. (а уже гематогенным путем заносится непосредственно в печень и там буянит)

Формы вирусных гепатитов:

-вирусный гепатит А

-вирусный гепатит В

-вирусный гепатит Е

-вирусный гепатит С

-вирусный гепатит G (GВ-С)

-дельта-гепатит

-вирус ТТ(но тут ученые еще сомневаются)

Вопрос № 18

Как устроен вирус гриппа? Каковы особенности его генома? Перечислите белки входящие в состав нуклеокапсида.

Вирион имеет сферическую форму и диаметр 80-10 нм, его молекулярная масса 250МД. Его геном представлен однонитевой фрагментированной (8 фрагментов(негативной РНК с общем м.м 5 МД. Тип симметрии нуклеокапсида спиральный. Вирион имеет суперкапсид (мембрану), содержащий два гликопротеида – гемагглютинин и нейраминидазу, которые выступают над мембраной в виду различных шипов.

Нуклеокапсид вириона состоит из 8 фрагментов вРНК и капсидных белков, образующих спиралевидный тяж. Капсидные белки: 1) нуклеопротеид, он выполняет структурную и регуляторную роль.

2) белок РВ1 – транскриптаза (обладает щелочными свойствами)

3) белок РВ2 - эндонуклеаза (то же)

4) белок РА – репликаза (обладает кислотными свойствами)

нуклеокапсид окружен матриксным белком(М1-белок), который играет ведущую роль в морфогенезе вириона и защищает вирионную РНК.

Вопрос № 19

Почему для диагностики вирусного гепатита А наиболее приемлемой является методика «захвата» АТ, относящихся к IgМ?

Преимущество метода «захвата» IgМ состоит в том, что АТ этого класса иммуноглобулинов появляются в первичном иммунном ответе и свидетельствуют об активной стадии инфекции, они исчезают после перенесения заболевании. Противовирусные АТ, относящиеся к классу IgG, напротив, длительно время сохраняются после перенесенного заболевания, обеспечивая приобретенный иммунитет. Для обнаружения вируса гепатита А предложен метод ДНК-зондоа: используют в качестве зонда ДНК с комплементарную РНК

(сам метод для любознательных на стр116 в руководстве)

Вопрос № 20

Почему вирусы являются облигатными паразитами?

Облигатные паразиты — организмы, живущие в организме хозяина в анаэробных условиях. Все этапы жизненного цикла микроорганизма связаны с организмом хозяина. Вне организма человека эти микроорганизмы быстро погибают либо не размножаются.

(У вирусов нет собственных белоксинтезирующих систем и отсутствуют собственные энергообразующие системы, следовательно, вне организма им нечем питаться, и они погибают голодной смертью)

21. С какой целью проводится фаготипирование бактерий, например, стафилококков. (инфа из инета)

Фаготипирование – это методика определения источников заражения при мониторинге окружающей среды и в частности водоемов. Суть ее заключается в маркировке инфекционных штаммов бактерий при помощи бактериофагов. Другими словами, фаготипирование необходимо для идентификации штаммов бактерий, вызвавших тот или иной всплеск инфекционных заболеваний, а также определения состояния водоемов для купания или источников водных ресурсов на предмет их заражения бактериями.

Этот метод стали также использовать для внутривидовой идентификации штаммов бактерий (для определения фаготипа бактерии – фаговара). Для чего необходима внутривидовая идентификация бактерий? Когда человек подвергся инфицированию определенной бактерией, которую высеяли при проведении бактериологических исследований, чтобы назначить эффективное лечение, необходимо знать, конкретно который из штаммов этой бактерии (ее разновидность) присутствует в организме человека. Например, существует много разновидностей стафилококка, к которым трудно подобрать антибиотик, не зная точно их фаготипа. Таким же разнообразием фаговаров «страдают» и бактерии рода Shigella flexneri, Salmonella, энтеропатогенная Escherichia coli и множество других бактерий.

Как проводится фаготипирование? В несколько чашек с питательной средой высевают бактерии неизвестного возбудителя или известного возбудителя, но его неуточненного штамма. В каждую из них наносят капли специфических фагов, заранее известных. Если в чашке оказывается культура бактерий, чувствительных к конкретному фагу, то происходит лизис бактерии (точнее ее оболочки), при котором она разрушается. А в чашке появляются видимые стерильные зоны. Это означает, что штамм бактерии определен. Если такие зоны не образуются, значит, тип запущенного в колонию бактерий фага не соответствует этой бактерии.

Фаготипирование используют в случаях назначения лечения бактериофагами для эффективности их применения. Бактериологический анализ выявляет присутствие в организме конкретного вида бактерии, а с помощью фаготипирования по описанной выше технологии определяют, подходит ли выбранный для лечения препарат бактериофага к данному бактериальному штамму, будет ли осуществлен лизис патогенной бактерии.

Стоит добавить, что активность бактериофага зависит от степени его разведения (концентрации фагов в растворе препарата бактериофага), при которой осуществляется полный лизис выбранной чувствительной бактерии. Готовые препараты бактериофагов допустимо разводить, но наилучший эффект лизиса бактерий будет достигнут при употреблении их в той концентрации, которая предложена фармацевтической промышленностью.