Иммунобиологические препараты

Иммунобиологические препараты

Для диагностики, профилактики и

Лечения инфекционных заболеваний

Учебное пособие для самостоятельной подготовки студентов к практическим занятиям по микробиологии

Барнаул, 2011

Рецензенты:

В учебном пособии изложены теоретические вопросы, касающиеся природы и использования иммунобиологических препаратов - диагно­стических и лечебно-профилактических: вакцин, сывороток, бактерио­фагов и др.

Студенты факультетов лечебного профиля (лечебного, педиатриче­ского, стоматологического) нуждаются в более глубоком изучении ме­ханизмов действия бактериологических препаратов, ответной реакции организма на введение вакцинных и сывороточных препаратов, ослож­нений, возникающих при использовании некоторых препаратов.

Иммунобиологические препараты для диагностики, профилак­тики и лечения инфекционных заболеваний: Юрова В.А., Бутако­ва Л.Ю., Крафт Л .А., Куклина Н.В., Сазанская А.А., Карабасова Е.Б., Винникова Ю.В., Илинская Б.В.. - Барнаул, 2002. - 46 с.

(с) Алтайский государственный медицинский университет, 2002

© Юрова В.А., Бутакова Л. Ю., КрафтЛ.А., Куклина Н.В., Сазанская

А.А., Карабасова Е.Б., Винникова Ю.В., Илинская Б.В., 2002

В профилактике, диагностике, лечении инфекционных заболеваний широко используются иммунобиологические препараты, изготавлива­емые из живых и убитых микроорганизмов (бактерий, риккетсий, виру­сов), продуктов их жизнедеятельности (токсинов), а также отдельных антигенов микробной клетки, извлеченных различными методами. Так­же для лечебных и диагностических целей используются сыворотки и специфические гамма-глобулины и иммуноглобулины. Кроме того, широко используются в диагностических и лечебных целях препараты бактериофагов.

Сведения о составе, получении, механизме действия иммунобиоло­гических препаратов необходимы врачу в его практической деятельнос­ти. Вместе с тем, возможность ознакомления с вновь созданными вак­цинными и сывороточными препаратами, особенностями их применения у практических врачей есть не всегда. Кроме того, в современных учеб­никах не полностью отражены вопросы, касающиеся получения, меха­низма действия и использования иммунобиологических препаратов.

Все вышесказанное привело к необходимости создания учебного по­собия, содержащего сведения об иммунобиологических препаратах. Дан­ное пособие включает информацию о получении, активном начале, при­менении иммунобиологических препаратов, об осложнениях, возника­ющих при использовании некоторых из них. Пособие предназначено для подготовки студентов третьего курса лечебного, педиатрического, сто­матологического и медико-профилактического факультетов к практи­ческим занятиям по частной микробиологии.

 

 

Классификация иммунобиологических препаратов

I.Диагностические препараты.

· Препараты, содержащие антигены - диагностикумы, аллергены,
токсины.

 

· Препараты, содержащие антитела - диагностические сыворотки.

 

· Диагностические бактериофаги.

 

· II.Лечебно-профилактические препараты.

· Препараты, содержащие антигены - вакцины.

 

· Препараты, содержащие антитела - лечебные сыворотки и гам­ма-глобулины и иммуноглобулины.

 

· Бактериофаги.

 

· Микробы-антагонисты.

 

· Интерфероны и другие цитокины.

 

 

РАЗДЕЛ I

Диагностические препараты

Диагностические препараты используются при лабораторной диаг­ностике ряда заболеваний, точный диагноз которых может быть постав­лен только при помощи бактериологических и вирусологических иссле­дований. Кроме того, диагностические препараты необходимы при под­тверждении лабораторными методами диагноза заболевания, имеюще­го атипичное течение, либо заболевания, характеризующегося полимор­физмом симптомов. Помимо этого, диагноз заболеваний, не встреча­ющихся на данной территории и в данное время, должен быть обяза­тельно подтвержден лабораторными методами.

В диагностике инфекционных заболеваний широко применяются мик­робиологические приемы диагностирования. При этом используются бак­териологический, вирусологический, серологический, аллергический,им­мунологические методы диагностики, а также методы молекулярной гиб­ридизации и ПЦР. Для каждого из этих методов необходимы опреде­ленные диагностические иммунобиологические препараты: диагностикумы, диагностические сыворотки (видовые, типовые, комплексные, ад­сорбированные и др.), комплемент, аллергены, бактериофаги, системы для проведения РИФ и ИФА, зонды нуклеиновых кислот.

Классификация диагностических препаратов

1.Препараты, содержащие антитела - диагностические сыво­ротки:

· агглютинирующие;

· преципитирующие;

· антитоксические;

· гемолитические;

· противовирусные;

· люминесцирующие;

· антиглобулиновые.

2.Препараты, содержащие антигены:

2.1) диагностикумы:

2.1.1.бактериальные;

2.1.2.эритроцитарные;

2.1.3.вирусные;

2.2.)токсины;

2.3.)аллергены.

Диагностические бактериофаги.

Диагностические сыворотки

В диагностике инфекционных заболеваний широко используют­ся иммунные реакции для идентификации микроорганизмов (бактерий и вирусов) или токсинов. Для постановки таких реакций необходимы специфичес­кие диагностические сыворотки.

1.1. Агглютинирующие сыворотки.

Агглютинирующие сыворотки получают путем иммунизации кроли­ков взвесью убитых микроорганизмов или их антигенов с последующим взятием у них крови и приготовлением сыворотки. Агглютинирующие сыворотки применяют для идентификации микроорганизмов в реакции агглютинации. Недостатком таких сывороток является то, что они спо­собны давать групповые реакции агглютинации, т.к. они содержат ан­титела к бактериям, имеющим общие антигены. Поэтому, в настоящее время большинство сывороток используется адсорбированными, Ад­сорбированные сыворотки содержат только типовые или видовые ан­титела, соответствующие определенному типу или виду антигена. Для получения таких сывороток применяют метод Кастеллани - метод ад­сорбции. Этот метод заключается в истощении сыворотки на групповые агглютинины путем насыщения ее родственными гетерогенными бакте­риями. При этом происходит адсорбция групповых антител, а специ­фические антитела остаются в сыворотке. Таким путем можно получить монорецепторные сыворотки - сыворотки, содержащие антитела толь­ко к одному антигену, и поливалентные сыворотки, дающие реакции аг­глютинации с двумя-тремя родственными бактериями, имеющими об­щий антиген. Титром агглютинирующей сыворотки называется то ее на­ибольшее разведение, при котором идет реакция агглютинации.

Агглютинирующие сыворотки широко применяют, например, при диагностике заболеваний, вызываемых эшерихиями, сальмонеллами и другими представителями семейства энтеробактерий.

1.2. Преципитирующие сыворотки.

Преципитирующие сыворотки получают иммунизацией кроликов ан­тигенами бактерий, их экстрактами и токсинами. Титром преципитирующей сыворотки называется то максимальное разведение антигена, при котором идет реакция преципитации. Преципитирующие сыворотки вы­пускаются с высоким титром - не менее 1:100000. Это связано с тем, что антиген, определяемый в реакции преципитации, имеет мелкодис­персную структуру и в единице объема его может содержаться больше, чем в таком же объеме сыворотки - антител.

Специфические преципитирующие сыворотки применяются при ди­агностике инфекционных заболеваний (сибирская язва, чума, туляре­мия, дифтерия, и др.), в судебно-медицинской экспертизе для определе­ния видовой принадлежности белка, в санитарной практике для обнару­жения соответствия белковых веществ в продуктах (при подозрении на фальсификацию).

Реакция преципитации может быть поставлена в виде кольцепреци-
питации или реакции преципитации в геле.

1.3.Гемолитические сыворотки.

Гемолитические сыворотки получают путем иммунизации кроликов
взвесью эритроцитов барана. Титром сыворотки называют то ее макси­мальное разведение, которое в присутствии комплемента вызывает ге­молиз 3% взвеси эритроцитов барана. Гемолитические сыворотки ис­пользуют для титрования комплемента и при постановке реакции свя­зывания комплемента в индикаторной системе.

1.4.Противовирусные сыворотки.

Иммунные противовирусные сыворотки получают путем иммуниза­ции различных животных в зависимости от вида вируса. Например, сы­воротку против аденовирусов получают иммунизацией кроликов, сыво­ротку против вируса гриппа - иммунизацией белых хорьков и т.д.

Диагностические противовирусные сыворотки используются для оп­ределения вида или типа вируса в РТГА, РСК., РН.

1.5.Люминесцирующие сыворотки.
Люминесцирующие сыворотки представляют собой иммунные сы­воротки, содержащие специфические антитела, меченые флюоресциру­ющими красителями. При приготовлении люминесцирующих сыворотокпроводят присоединение к глобулиновой фракции иммунной сывороткиразличных флюорохромов путем прочной химической связи. Люминес­цирующие сыворотки используют при постановке РИФ.

1.6. Анпшглобулиновые сыворотки.

Антиглобулиновые сыворотки (АГС) содержат антитела к иммуног­лобулинам сыворотки человека или кролика - в зависимости оттого, ка­кая иммунная сыворотка используется в реакции. АГС получают путем иммунизации животных иммуноглобулинами человека или кролика. Такие сыво­ротки используют для постановки непрямой РИФ, реакции ИФА, реак­ции Кумбса.

 

Диагностикумы

При серологической диагностике инфекционных заболеваний необ­ходимы препараты, содержащие антигены. Такие препараты называют­ся диагностикумы. Для приготовления диагностикумов подбираются штам­мы микроорганизмов с высокой чувствительностью к антителам и спо­собностью длительно сохранять антигенные свойства. Для инактивации микроорганизмов при приготовлении диагностикумов чаще всего исполь­зуют химические вещества, особенно формалин, являющийся лучшим консервантом. Убитые нагреванием микроорганизмы хуже сохраняют антигенные свойства и используются редко.

2.1.1.Бактериальные диагностикумы.

Бактериальные диагностикумы содержат инактивированную микроб­ную взвесь или отдельные антигенные компоненты бактерий. Примером таких диагностикумов являются:

а)бактериальные диагностикумы сальмонелл брюшного тифа, пара­тифа А и В, шигелл Флекснера, Зонне, единый бруцеллезный диагностикум и др.; они содержат взвесь бактерий, инактивированных формалином, и применяются в реакции агглютинации для об­наружения антител в сыворотке больных;

б)сальмонеллезные О-диагностикумы - содержат О-антигены раз­личных групп сальмонелл, применяются для выявления антител к О-антигену при сальмонеллезных инфекциях в реакции агглюти­нации с сывороткой больных;

в)сальмонеллезный Н-диагностикум и Vi-диагностикум брюшноготифа.

2.1.2..Эритроцитарные диагностикумы.

Эритроцитарные диагностикумы представляют собой эритроциты (об­работанные танином или формалином) с адсорбированными на их поверхности ан­тигенами, извлеченными из бактерий. Эритроцитарные диагностикумы используются в РНГА (реакция непрямой гемагглютинации) для обна­ружения антител. В том случае, когда РНГА используется для выявле­ния антигена в патологическом материале, применяют антительные ди­агностикумы, т.е. эритроциты с адсорбированными на них антителами. Существуют дизентерийный, сальмонеллезный, псевдотуберкулезный и др. эритроцитарные диагностикумы.

2.1.3. Вирусные диагностикумы.

Вирусные диагностикумы содержат инактивированные вируссодержащие жидкости или живые вирусные частицы, используются при се­рологической диагностике вирусных инфекций в реакциях связывания комплемента, торможения гемагглютинации, нейтрализации для обна­ружения антител и определения их титра.

 

Токсины.

Примером подобного препарата является токсин Шика. Это дифтерийный токсин, который вводится в ладонную поверхность предплечья в объеме 0,2 мл. В 0,2 мл препарата содержится 1/40 Dlm дифтерийного токсина для морской свинки. С помощью такой пробы определяют степень напряженности противодифтерийного антитоксического иммунитета. Если в месте введения токсина появляется воспалительная реакция, считают, что антител к дифтерийному токсину в организме нет, такого человека необходимо ревакцинировать. Если же воспалительная реакция не возникает, считается, что иммунитет к дифтерийному токсину достаточно напряженный и ревакцинация не нужна. Метод диагностики серологический.

Аллергены

Аллергены - это препараты, представляющие собой взвесь убитых микробных клеток или извлеченных из них различных фракций. Аллер­гены применяются для выявления гиперчувствительности замедленного типа при аллергической диагностике различных инфекционных заболеваний. Положительная ре­акция ГЗТ может свидетельствовать об инфицированности организма определенным возбудителем, либо об активном инфекционном процес­се. Примером таких диагностических препаратов являются туберкулин, тулярин, бруцеллин, токсоплазмин, дизентерии и др.

Бактериофаги

Диагностические бактериофаги используются в диагностике с це­лью индикации бактерий в объектах окружающей среды, идентифика­ции микроорганизмов, выделенных от больного или из инфицированных объектов внешней среды. Также производят фаготипирование культур с целью определения источника и путей передачи инфекции при анали­зе эпидемиологической ситуации. Для фаготипирования используют ти­повые диагностические бактериофаги. Для получения диагностических бактериофагов используют умеренные фаги (получе­ние препаратов бактериофагов см. в разделе «Лечебные бактериофа­ги»).

РАЗДЕЛ II

Глава 1

Общая часть

Классификация вакцин

Вакцины:

1) живые;

2) убитые (корпускулярные)

3) химические (субъединичные)

4) расщепленные (сплит)

5) анатоксины;

6) рекомбинантные;

7) искусственные (коньюгированные и с искусственными адьювантами)).

Видовой состав:

· бактериальные;

· вирусные;

· риккетсиозные;

· лептоспирозные;

· аутовакцины

Способы изготовления:

· физические;

· биологические;

· генно-инженерные;

· химические

Цель применения:

· профилактика;

· лечение.

По числу содержащихся антигенов:

· моновакцины;

· комплексные (ассоциированные);

Пути введения:

· парентеральный;

· энтеральный;

· аэрозольный (ингаляционный);

· контактный (аппликационный).

Вакцины получают из живых аттенуированных штаммов бактерий
и вирусов, из убитых микробов, из их токсинов или антигенов.
Вакцины используются для создания искусственного активного имму­нитета с целью специфической профилактики и терапии инфекционных болезней.

Календарь прививок РФ

Вакцина	Природа антигена	Форма вакцины	Наличие адъюванта	Сроки введения
БЦЖ	Аттенуированный штамм M. bovis	Сухая	Нет	3-7 день после рождения
АКДС, АДС, АД, АС	Дифтерийный анатоксин, столбнячный анатоксин, убитые возбудители коклюша B.pertussis	Жидкая	Al(OH)3	С 3-х месяцев с интервалом в 1,5 мес. - трехкратная вакцинация, ревакцинация в 1,5 года. В 7 лет, 14 лет, взрослым – каждые 10 лет – ревакцинация против дифтерии и столбняка.
Полиомиелитная	Аттенуированные живые штаммы 3-х типов вируса полиомиелита	Жидкая	Нет	С 3-х месяцев с интервалом в 1,5 мес. – трехкратная вакцинация per os, ревакцинация в 18 мес, 20 мес., 7 лет, 14 лет.
Коревая	Аттенуированный штамм вируса кори	Сухая	Нет	Первичная вакцинация в 12 мес., ревакцинация в 6 лет.
Паротитная	Атенуированный штамм вируса паротита	Сухая	Нет	Первичная вакцинация в 12 мес, ревакцинация в 6 лет.
Против гепатита В	HBsAg	Жидкая	Al(OH)3	Вакцинация: первая – в первые 12 часов после рождения, вторая – в 1 мес.. третья – в 6 мес.
Против краснухи	Аттенуированный штамм вируса краснухи	Сухая	Нет	Первичная вакцинация в 12 мес., ревакцинация в 6 лет, вакцинация девочек в 13 лет, если ранее не вакцинировались и не болели.

Глава 2.

Специальная часть

Препараты интерферонов.

1) Интерферон человеческий лейкоцитарный сухой. Препарат со­держит интерферон - белок, синтезируемый лейкоцитами донорской кро­ви в ответ на воздействие интерфероногена. Обладает противовируснойактивностью, предназначен для профилактики и лечения гриппа и дру­гих респираторных вирусных инфекций.

2) Свечи с интерфероном лейкоцитарным. Активное начало пре­парата - интерферон, препарат обладает противовирусной активностью. Предназначен для лечения вирусного гепатита в острой и хронической формах у детей и взрослых

3) Человеческий лейкоцитарный интерферон для инъекций. Пре­парат содержит интерферон, а также белки донорской крови, главным образом альбумины. Препарат получают в культуре лейкоцитов, выде­ленных из крови клинически здоровых доноров, под воздействием ин­
терфероногена. Человеческий лейкоцитарный интерферон для инъек­ций используют в комплексной терапии при следующих заболеваниях:остром и хроническом вирусном гепатите В, в том числе осложненном дельта-инфекцией; менингоэнцефалитах вирусной и вирусно-бактериальной этиологии; рецидивирующем герпесе гениталий; рассеяном скле­розе; лимфобластном и миелоидном лейкозе.

4) Лейкинферон для инъекций сухой. Лейкинферон представляет собой препарат человеческого интерферона и других цитокинов, синте­зированных лейкоцитами из крови клинически здоровых доноров. Пре­парат предназначен для лечения вирусных инфекций, а также для кор­рекции иммунодефицитных состояний при острых и хронических инфек­циях различной этиологии, в том числе гнойно-септических, при онко­логических и других заболеваниях.

5) Реаферон для инъекций сухой. Реаферон - человеческий рекомбинантный альфа-интерферон, синтезированный бактериальным штаммом псевдомонады, в генетический аппарат которой встроен генчеловеческого лейкоцитарного альфа-интерферона. Реаферон иденти­чен человеческому лейкоцитарному альфа-интерферону. Обладает ан­тивирусной, противоопухолевой, иммуномодулирующей активностью. Ре­аферон применяется в комплексной терапии при вирусных гепатитах В, С, а также при вирусных конъюнктивитах, кератоконъюнктивитах, ке­
ратитах, кератоувеитах.

 

Иммунобиологические препараты