Методы определения глюкозы в крови

Методы определения глюкозы в крови

Для диагностики целого ряда заболеваний (к числу которых прежде всего следует отнести сахарный диабет, патологические состояния, связанные с недостаточностью функции печени и почек, некоторые эндокринные заболевания, новообразования мозга, поджелудочной железы и надпочечников, гиповитаминоз В1, а также ряд наследственных аферментозов) важно иметь объективное представление о состоянии углеводного обмена, кардиальным показателем которого служит содержание глюкозы в крови. Концентрация глюкозы в крови взрослого человека составляет в единицах СИ - 60-100 мг%, в международных единицах - 3,3 - 5,5 ммоль/л. В настоящее время существует достаточно много методов определения глюкозы. Их можно классифицировать следующим образом:

1. Редуктометрические. Практически не используются в клинике.
2. Колориметрические. Практически не используются в клинике.
3. Ферментативные:

 

а) глюкозооксидазный

- фотометрический по конечной точке
- фотометрический кинетический
- отражательная фотометрия - сухая химия
- электрохимический;

б) гексокиназный

- фотометрический по конечной точке
- фотометрический кинетический

 

Первые два метода крайне неудобны, токсичны и обладают низкой точностью, поэтому опишем только принципы метода лабораторной диагностики, недостатки и преимущества метода.

Редуктометрические методы

Редуктометрические методы, основанные на свойстве сахара восстанавливать в щелочной среде соли тяжелых металлов.

К ним относятся: Титрометрический метод Хагедрона и Йенсена (1923), в котором используется свойство сахаров восстанавливать при кипячении в щелочной среде железосинеродистый калий (красную кровяную соль) в железистосинеродистый калий (желтую кровяную соль). По степени этого восстановления титрометрически определяют концентрацию сахара в крови. Однако ввиду того, что в крови присутствуют ряд соединений, не относящихся к углеводам, но обладающих восстановительными свойствами (мочевая ктслота, глютатион, креатинин), полученный результат включает всю сумму восстанавливающих соединений, содержащихся в крови, и получаемое редуктометрическими методами количество сахара в крови оказывается значительно выше истинного количества глюкозы. В этом состоит недостаток всех редуктометрических методов. Но они, тем не менее, сохраняют свое клиническое значение, поскольку разность между "кажущимся" сахаром крови и "истинной" глюкозой (так называемая остаточная редукция) у одного и того же лица есть величина постоянная, не зависящая, в частности от введения инсулина или приема глюкозы. Однако данные методы недостаточно специфичны и не точны, а также трудоемки (вследствие использования большого количества реактивов). Вследствие чего данные методы практически не используются в клинической лабораторной диагностике.

Ниже приводится схема реакций методом Хагедорна-Иенсена:

белки крови + ZnSO4 ---> денатурация и осаждение
глюкоза + К3[Fe(CN)6] ---> глюконовая кислота + К4[Fe(CN)6]
К3[Fe(CN)6] (избыток) + KI ---> I2 + К4[Fe(CN)6]
I2 + крахмал ---> синяя окраска
I2 + Na2S2O3 (титрование) --->
---> Na2S4O6 + NaI (синяя окраска исчезает)