Патогенез и клинические признаки

Род Cryptosporidium выделяется.  Очень низкой видоспецифичностью, а также Лёгкостью межвидового перезаражения. Животное инвазируется либо путём прямого контакта, либо непрямым путём через предметы, контаминированные ооцистами, а иногда обоими путями. [4, 3 ]

Симптомы и течение.

  Паразиты вызывают воспаление кишечника. При этом болезнь протекает остро. У больных животных наблюдают понос, они отказываются от корма, худеют, особенно тяжело болезнь протекает у животных с иммунным дефицитом. До 50-60% заболевшего молодняка гибнет. [5]

Диагностика заболевания.

Обнаружение криптоспоридий в мазках фекалий. Для мазков используют хорошо обезжиренные предметные стекла, ¼ часть которых зашлифована и предназначена для маркировки препарата простым карандашом. Если фекалии жидкие, то делают мазки без применения физиологического раствора. Небольшое количество фекалий (на кончике скальпеля) помещают на предметное стекло и делают тонкий мазок стеклянной палочкой или круговыми движениями скальпеля. Если фекалии густые – на предметное стекло наносят каплю физраствора, смешивают с небольшим комочком фекалий и приготавливают мазок. Мазок высушивают на воздухе.

Фиксацию мазков проводят метанолом, этанолом или смесью Никифорова – 8-10 минут. Мазок высушивают при комнатной температуре.

Окрашивание мазков проводят по методу Циль-Нильсена.

Учет результатов: на синем фоне четко выделяются округлые ярко-красные с различным оттенком ооцисты криптоспоридий.

Вместо синьки Лефлера можно использовать 0,5%-ный раствор малахитового зеленого или 1%-ный раствор бриллиантового зеленого, приготовленных на воде или 100 спирте. В первом варианте докрашивание проводят в течение 3 мин., а во втором до 30 секунд.

Учет результатов: на зеленом фоне четко выделяются красные ооцисты. В красный цвет окрашиваются некоторые микробы, споры грибов и жироподобные вещества, но они отличаются от ооцист криптоспоридий размерами, формой и отсутствием внутри структурных образований.

Флотационные методы используют для концентрации ооцист криптоспоридий при исследовании фекалий животных. Для этого используют насыщенные растворы поваренной соли или аммиачной селитры.

Приготовление раствора: 450 г поваренной соли при подогревании растворяют в 1000 мл водопроводной воды. После остывания, раствор фильтруют и определяют его плотность с помощью денсиметра, которая должна быть 1,2.

Для приготовления насыщенного раствора на 1 л водопроводной воды берут 1500 г аммиачной селитры. При этом плотность должна составлять 1,3.

После центрифугирования металлической петлей диаметром 5 мм с пробирки снимают поверхностную пленку, переносят ее на хорошо обезжиренное предметное стекло, делают мазок, который высушивают, фиксируют и окрашивают по выше указанному методу. [ 7]

Лечение.

Для лечения телят при криптоспоридиозе назначают сульфадимезин в дозе 0,1 г/кг 2 раза в день в течение 6 дней; химкокцид-7 по 0,04 г/кг 2 раза в день в течение 4 дней; норсульфазол в дозе 0,05 г/кг 3 раза в день в течение 3 дней. Хороший эффект получен от сочетаний сульфадимезина с фумаровой кислотой; триметазульфа по 4 мл на 50 кг массы 2 раза в день в течение 6 дней. Ягнятам и поросятам назначают сульфадимезин по 0,05 г/кг два раза в день в течение 6 дней; сульфадиметоксин по 0,05 г/кг 1 раз в день в течение 5 дней. [5,6]

Профилактика и меры борьбы.

  Для профилактики заражения молодняка животных криптоспоридиями необходимо обеспечить животных сбалансированным кормлением, предоставить молодняку надлежащие условия содержания. Помещения должны быть хорошо вентилируемыми сухими, регулярно очищать клетки и дезинвазировать их 5%-ным горячим (70-80 °С) раствором натрия гидроокиси. Проводить дератизацию.

Если это криптоспоридиоз молодых особей, а также в случае оппортунистической инвазии, быстрое излечение происходит после избавления от первичного заболевания или после устранения упущений владельцев. Напротив, массовое нахождение ооцист Cryptosporidium Spp в кале взрослых животных должно стать сигналом серьёзного заболевания и вытекающего из этого недостаточного иммунитета организма. Из собственного опыта авторы подтверждают, что они встречались с криптоспоридиозом не только у животных в результате хронического поражения пищеварительного тракта а также у животных с гипотиреозом, синдромом Кушинга, у кошек с вирусами лейкемии или иммунодефицита, а также у собак после лечения кортикостероидами. [7]

 

Предупреждение

 

Зооноз. В связи с низкой видоспецифичностью в определённых случаях может произойти заражение человека от животных. Прежде всего, это вид C. Parvum. У полностью иммунокомпетентных людей протекает несколько дней в виде асимптоматической инвазией, у детей бывают поносы. Разумеется, что человек может заразиться и от других людей, особенно в детских коллективах. Вероятно, криптоспоридиоз является причиной Поносов во время путешествий.

 

У Иммунодефицитных пациентов (типичным примером является ВИЧ-инвазированный человек) инвазия криптоспоридиозом является одним из наиболее часто встречающихся осложнений и долговременные профузные поносы нередко приводят к летальному исходу. Кроме СПИДа инвазия небезопасна для особей с конгенитальной гипогамаглобинурией, иммуносупрессией после химиотерапии, например, кортикостероидами, при истощении организма длительными физическими нагрузками, при стрессе или хронических заболеваниях.

 

 

Собственные исследования.

  2.1. Характеристика хозяйства.

ЗАО «Красный маяк» находится в Ростовском районе Ярославской области, в 68 км от г. Ярославля. В состав хозяйства входит 1 деревня: д. Василево. ЗАО «Красный маяк» имеет 6567 га земли, из них 3675 га сельскохозяйственные угодья, в том числе 2043 га пашни, 718 га сенокосов и 803 га пастбищ.

  Природные условия зоны благоприятны для развития молочного животноводства.

  ЗАО «Красный маяк» Ярославской области занимается молочным животноводством и производством зерна, разводит крупный рогатый скот ярославской, помесной и голштино – фризской  породы. Общее поголовье крупного рогатого скота в хозяйстве 1420 голов.

Структура стада: быки-производители – отсутствуют, по причине получения статуса племенного хозяйства;

                         коровы –620 голов;

                         нетели –120 голов;

                         тёлки 2010 г. рождения –180 голов;

                         бычки 2010г. рождения –55 голов;

                         тёлки 2011 г. рождения –230 голов;

                          бычки 2011 г. рождения –215 голов.  

  В зимний период применяется беспривязное  содержание взрослого скота и боксово-беспривязное содержание молодняка. А также холодный метод содержания телят.

  Содержание коров в помещении беспривязное, секции разделены на группы: отел от 0 до 30 дней, от 30 дней до 100, от 100 до 150, от 150 и до сухостойного периода. Раздача кормов производится мобильными кормораздатчиками, доение осуществляется в молокопровод, поение производится из поилок расположенных в секциях, навозоудаление скрейперное.

  Рацион для молочных коров состоит из силоса кукурузного – 25 кг, дерти овсяной – 1 кг, соли поваренной – 90 г. Поение вволю из автопоилок.

  Почвы хозяйства представлены серыми лесными и чернозёмами. Значительную площадь занимают солонцы.

  Для производства молока и воспроизводства стада используется следующая схема: молочные коровы содержатся в молочном цехе, где производится и искусственное осеменение. Стельные коровы и нетели за 2 недели до отёла переводятся в родильное отделение. Новорожденные телята на сутки остаются с матерью, затем до 10 – ти дневного возраста выращиваются в профилактории. Потом их переводят в телятник, где формируют группы по 10-15 голов. С 6 мес. возраста телят разделяют по полу, бычков кастрируют и ставят на откорм, тёлочек бонитируют лучшие идут на воспроизводство стада, остальные ставятся на откорм.

 

  2.2. Цель и задачи исследования. Целью работы является изучение распространения криптоспоридиоза крупного рогатого скота в ЗАО «Красный маяк» и эффективности применяемых препаратов для проведения лечебно-профилактических мероприятий.

  2.3. Материалы, методы и результаты исследований.

  При написании работы были взяты 2 группы телят по 20 голов в каждой, в возрасте 2-х лет.

      

Как известно, кровь составляет внутреннюю среду организма, так как, соприкасаясь со всеми тканями и клетками, она обеспечивает их жизнедеятельность, являясь посредником между внешней средой и клетками. У высших животных кровь практически омывает все клетки, доставляя к ним необходимые вещества и унося от них продукты жизнедеятельности. Состав крови свидетельствует о нормальных и патологических процессах, происходящих в организме.

Кровь соединяет химические процессы различных частей тела в целостную систему. У высших животных наряду с нервной системой, обеспечивающей регуляцию организма, сформировалась кровеносная система. Как внутренняя среда она осуществляет связь всех органов и тканей, создавая необходимый режим их существования. Наиболее полно обмен веществ между кровью и тканями протекает а капиллярной системе.

В организме животных кровь выполняет транспортную роль (транспорт кислорода к тканям и углекислого газа от тканей к легким, транспорт питательных веществ и удаление из тканей конечных продуктов обмена); регуляторную (поддерживает постоянно рН и осмотическое давление, доставляет к тканям гормоны); защитную (ее антитела и лейкоциты, связывая возбудителей болезней и продукты их жизнедеятельности, предохраняют организм от заболевания).

Целью наших исследований явилось изучение морфологических показателей крови животных, инвазированных ооцистами криптоспоридий экспериментально и спонтанно.

Для проведения экспериментальных исследований было использовано10 телят, из которых образовывали в соответствии с общими правилами по принципу аналогов одну опытную из 10 голов и 1 контрольную группу - 10 голов. При спонтанном заражении также было использовано20 голов, которые были разделены, как и при экспериментальном заражении.

Животных содержали в одинаковых условиях. В зависимости от цели и задач исследований экспериментальных телят инвазировали суспензией ооцист криптоспоридий в дозе 1 тыс. на 1 кг живой массы. Содержали телят в одинаковых условиях исключающих естественное заражение, что подтверждается трёхкратным отрицательными результатами копрологических исследований и отсутствием простейших и других паразитов у контрольных животных в течение эксперимента.

Кровь для гематологического анализа брали из яремной вены. Кровь брали до заражения и после заражения на 4-е, 8-е, 10-е, 12-е, 14-е сутки. Для осуществления поставленной задачи у всех животных учитывались: общее клиническое состояние, температура тела, частота пульса, изменение живого веса, содержание гемоглобина, эритроцитов, лейкоцитов, СОЭ резервную щелочность определяли по общепринятым методам.

Полученные данные анализировали и обрабатывали с помощью стандартных компьютерных программ статистической обработки.

Проявление клинической картины криптоспоридиоза у телят (средняя степень инвазии) большей частью начинается периодическим ухудшением общего состояния.

Затем появляются симптомы расстройства пищеварения: понос, снижение аппетита, отставание в росте, что составляло снижением массы тела поросят и прирост массы подопытных животных составляло 50 - 55 г.

При клиническом осмотре и термометрии установлено, что температура тела у всех подопытных поросят была незначительно повышена на 8-е и 10-е сутки после заражения и составляла от 40,6 до 40,4 ⁰С, когда в организме поросят происходит массовое размножение и выделение ооцист C.parvum во внешнюю среду, а в остальные дни у всех подопытных поросят была в пределах нормы и колебалась от 38,6 до 39,6 ⁰С.

Отклонений в приеме молозива у телят не отмечали. Количество эритроцитов в крови телят составляло от 7,0 ± 0,34 млн/мм³ (Р<0,05) до 4,56 ± 1,10 млн/мм³ (Р<0,05) на десятые сутки после заражения.

Зараженность телят ооцистами C.parvum отрицательно повлияла на гематологические показатели.

Так, у телят, экспериментально инвазированных криптоспоридиями было на 2 раза эритроцитов ниже, чем в контрольной группе. К началу массового выделения ооцист криптоспоридий (на 8-е и 10-е сутки) наблюдается некоторое снижение эритроцитов, а к 14-ти суткам количество их заметно стало приближаться к уровню контрольных животных.

У телят, инвазированных спонтанно, на 8-е, 10-е сутки во втором опыте эритроцитов было 5,05 ± 0,07 млн/мм³ (Р<0,05) против 5,71 ± 0,19 млн/мм³ (Р<0,05) у контрольных (5,05 ± 0,07 млн/мм³ (Р<0,05) в начале опыта). Имеющаяся разница в количестве эритроцитов в крови животных контрольной и опытной групп при статистической обработке оказалась достоверной.

Самое низкое количество лейкоцитов было у телят на первый день после заражения и равнялось 8,65 ± 0,01 тыс./мм³ (Р<0,05), а на восьмые сутки уже составляло 13,80 ± 0,93 тыс./мм³ (Р<0,05) и в последующем держалось на весь момент исследования, т.е. до 14-ти суток. Скорость оседания эритроцитов (СОЭ) колебалось с 1,9 до 2,7 мм/ч (Р<0,05), 4-е сутки после заражения составляло 2,0 ± 0,06 мм/ч (Р<0,05), а на 6-е и 8-е сутки после заражения составляло с 2,3 ± 0,06 мм/ч (Р<0,05) до 2,7 ± 0,07 мм/ч (Р<0,05).

Анализ результатов исследований и литературных данных позволяет сделать заключение, что криптоспоридии способствуют изменению гематологических показателей и происходит максимальное повышение уровня лейкоцитов, уменьшению количества эритроцитов. Эти данные согласуются с показателями других животных, которые приводит в своих исследованиях Кряжев А.Л. (2004; 2005). Так как кровь обеспечивает взаимосвязь обменных процессов, протекающих в различных органах и тканях, выполняет защитную, транспортную, регуляторную, дыхательную, терморегулирующую и другие функции. Морфофункциональный анализ крови позволяет весьма объективно оценить действие различных факторов на организм, хотя эти реакции и не всегда специфичны. Поэтому биохимическая характеристика крови очень важна для оценки патологических и предпатологических состояний организма (рис. 3).

Рис. 3. Наличие криптоспоридий в мазках.

Также в хозяйстве проводились экспресс тесты на наличие в фекалиях телят криптоспоридий: при этом брали возрастную группу телят на 21 день после рождения – (критическая группа) количеством 10 голов.                               Для проведения теста были взяты 10 одноразовых полимерных колб с реактивом светло - розового цвета, в колбы были помещены по1 г фекалий от каждого теленка и помещены в каждую колбу. Колбы закрыли и вращательными движениями смешивали фекалии с реактивом, вращение производилось спокойными колебательными движениями, и были оставлены в вертикальном положении в штатив и оставлены на 30 минут. По прохождении времени реактив поменял свой цвет от светло- розового до темно соломенного цвета – что соответствует наличию в организме телят возбудителей криптоспоридиоза. Телята из контрольной группы были переведены в отдельный бокс для проведения дополнительных лабораторных исследований, а также фекалии были отобраны и у тех телят, которые находились в одной половозрастной группе вместе с изолированными телятами.