Подсчет лейкоцитов с составлением лейкоцитарной формулы.

Подсчет лейкоцитов производится в мазке крови. Препарат следует установить при малом увеличении так, чтобы край мазка находился в центре поля зрения. Затем поднять тубус и нанести каплю иммерсионного масла на покровное стекло. Перевести револьвер на иммерсионный объектив (х90) и, глядя сбоку, опустить тубус до погружения объектива в масло. Окончательно сфокусировать изображение микровинтом.

Учитывая, что лейкоцитарная формула - это процентное соотношение разных видов лейкоцитов в периферической крови, расчет производится на 100 клеток этого ряда. При перемещении препарата будут встречаться лейкоциты разных видов. Все они должны быть опознаны и записаны в таблицу 1 (разлиновать ее в виде сетки: 10х10 клеток, итого 100 клеток). Запись можно производить первыми буквами названий лейкоцитов (Н, Э, Б, Л, М). Необходимо опознавать и учитывать все без исключения лейкоциты, иначе результат подсчета будет неверен. Необходимо учитывать, что клетки в мазке распределяются неравномерно: более крупные (моноциты, эозинофилы) чаще располагаются по периферии, более мелкие (лимфоциты, нейтрофилы) - в средней части мазка. Поэтому подсчет ведут ступенеобразно, передвигая препарат на 4-5 полей зрения по краю мазка сверху вниз, затем на 2-3 поля вглубь от края, потом — на 4-5 полей параллельно краю в направлении снизу вверх и т.д. Как только общее количество лейкоцитов достигнет 100, запись прекращают. В этом случае абсолютное количество разных видов лейкоцитов, полученное при подсчете, будет совпадать с их процентным выражением.

Результаты подсчета свести в таблицу 2 (в таблице для примера представлены нормальные показатели лейкоцитарной формулы взрослого человека):

	Гранулоциты	Агранулоциты
Нейтро-филы п/я	Нейтро- филы с/я	Эозинофилы	Базофилы	Лимфоциты	Моноциты
Норм. показатели	1-6 %	47-72%	0,5-5%	0-1%	19-37%	3-11%
Результат исследования

 

Сравнить полученные данные с нормальными показателями (соответственно возрасту пациента) и сделать вывод.

При оценке полученной лейкоцитарной формулы рекомендуется использовать общепринятую терминологию. Так, увеличение общего количества лейкоцитов, а также отдельных их видов, характеризуют термином, включающим в себя окончание... — цитоз (лейкоцитоз, лимфоцитоз, моноцитоз, нейтрофилез), либо... — филия (эозинофилия, базофилия, нейтрофилия), уменьшение общего количества лейкоцитов и отдельных их видов обозначается терминами с использованием окончания... - пения: лейко (цито) пения, лимфо (цито) пения, моноцитопения, нейтропения, эозинопения. Важным показателем является увеличение количества незрелых нейтрофилов — метамиелоцитов (юных), палочкоядерных нейтрофилов - “сдвиг лейкоцитарной формулы влево” (т.к. на лабораторном бланке молодые клетки принято помещать слева).

При анализе лейкоцитарной формулы и показателей гемограммы необходимо учитывать возрастные особенности. Так, после рождения процентное содержание нейтрофилов падает, а лимфоцитов — возрастает, выравниваясь к 4суткам (1-й физиологический перекрест, около 45% тех и других), к 1-2 году жизни количество лимфоцитов достигает максимума, в 2 и более раза превышая показатели содержания нейтрофилов. Наступающее за этим уменьшение содержания лимфоцитов и возрастание нейтрофилов приводит к выравниванию обоих показателей в возрасте 4-5 лет (второй физиологический перекрест). К моменту полового созревания лейкоцитарная формула приближается к нормальным показателям взрослого человека (см. таблицу 2).

Методические указания к изучению электронограмм.

Эозинофильный гранулоцит

Зрелый эозинофил имеет сегментированное ядро (1), обычно состоящее из двух сегментов. В цитоплазме имеются крупные специфические гранулы с кристаллоидом (2). Из органелл хорошо развиты митохондрии (3) и эндоплазматическая сеть (4).

Схемы и таблицы.

Показатели гемограммы

	взрослого	новорожденного
Эритроциты	Муж. 4,0-5,1·10^12/л Жен. 3,9-4,7·10^12/л	6-7·10^12/л
Лейкоциты	4-9·10^9/л	10-30·10^9/л
Тромбоциты	180-320·10^9/л	180-320·10^9/л

6.3.2.Показатели лейкоцитарной формулы в %

показатели	взрослого	ребенка
4-5 дней	1-2 года	4-5 лет	12-14 лет
Нейтрофилы Всего Из них: П/я С/я	48-78 1-6 47-72	»45 »1-6 »39-44	»25 »1-6 »19-24	»45 »1-6 »39-44	48-78 1-6 47-72
Эозинофилы	0,5-5	0,5-5	0,5-5	0,5-5	0,5-5
Базофилы	0-1	0-1	0-1	0-1	0-1
Лимфоциты	19-37				19-37
Моноциты	3-11	3-11	3-11	3-11	3-11

Увеличение показателя: (-цитоз, -филия)

Эритроциты –	эритроцитоз
Лейкоциты – Нейтрофилы все – Нейтрофилы п/я –   Эозинофилы – Базофилы – Лимфоциты – Моноциты –	лейкоцитоз нейтрофилия (нейтрофилёз) сдвиг лейкоцитарной формулы влево эозинофилия базофилия лимфоцитоз моноцитоз
Тромбоциты –	тромбоцитоз

Уменьшение показателя: (-пения)

Эритроциты –	Эритроцитопения (»анемия)
Лейкоциты–Нейтрофилы все – Лимфоциты – Моноциты –	лейкоцитопения нейтрофилопения лимфоцитопения моноцитопения
Тромбоциты –	тромбоцитопения

Контрольно-обучающие и профессиональные задачи.

7.1. Какой термин обозначает повышенное содержание лейкоцитов в крови?

7.2.На препарате мазка крови видна клетка с обильной базофильной зернистостью, сквозь которую просматривается слабо сегментированное ядро. Назовите эту клетку.

7.3. На препарате мазка крови видна крупная округлая клетка со слабо базофильной цитоплазмой, без специфической зернистости, со светлым ядром бобовидной формы. Назовите эту клетку.

7.4. Какова продолжительность жизни эритроцитов?

7.5. Содержание нейтрофилов в лейкоцитарной формуле составляет 85%. Из них палочкоядерных -13%, а сегментоядерных -72%. Соответствует ли это норме? Назовите 2 показателя изменения содержания нейтрофилов в представленном варианте.

7.6. В лейкоцитарной формуле здорового человека содержаниие нейтрофилов составляет 32%, лимфоцитов - 54%. В каком возрастном периоде данное содержание клеток является нормой?

7.7. В судебной практике на месте преступления обнаружена кровь преступника. Какие клетки крови должны быть исследованы, чтобы определить пол преступника? Какой морфологический признак в них используется при этом?

8. Тестовые задания для самоконтроля.

8.1. Кровь и лимфа относятся к группе тканей

1) эпителиальных;

2) мышечных;

3) соединительных;

4) скелетных;

5) со специальными свойствами.

8.2. Возрастные особенности лейкоцитарной формулы касаются в основном соотношения

1) эритроцитов и тромбоцитов;

2) лимфоцитов и нейтрофилов;

3) моноцитов и лимфоцитов;

4) нейтрофилов и эозинофилов;

5) юных и с/я нейтрофилов.

8.3. Сегментированные ядра имеют зрелые

1) гранулоциты;

2) агранулоциты;

3) эритроциты;

4) ретикулоциты;

5) тромбоциты.

8.4. К незернистым лейкоцитам относятся

1) эозинофилы;

2) базофилы;

3) лимфоциты;

4) нейтрофилы;

5) моноциты.

8.5. Макрофагами крови являются

1) нейтрофилы;

2) моноциты;

3) лимфоциты;

4) эозинофилы;

5) базофилы.

 

Тема занятия № 8: Рыхлая волокнистая соединительная ткань и соединительные ткани со специальными свойствами

2. Мотивация. Соединительные ткани — весьма распространены в организме. Рыхлая волокнистая соединительная ткань сопровождает кровеносные сосуды и нервы, образует строму многих органов, принимает активное участие в метаболических, защитных, репаративных процессах, играет важную роль в поддержании гомеостаза. Вместе с кровью она образует внутреннюю среду организма.

На этом же занятии изучаются ткани со специальными свойствами: ретикулярная, жировая, пигментная, слизистая. В них преобладают клетки одного типа, которые и определяют специализацию ткани.

Знание гистофизиологии соединительных тканей и их топографии необходимо при изучении строения и функции всех органов как в норме, так и при различных патологических состояниях (воспаление, иммунные реакции, злокачественные новообразования и т.д.).

Цели занятия.

3.1. Общая цель.

В результате изучения теоретического материала и освоения практических навыков, студент должен научиться ориентироваться в гистологических препаратах: определять рыхлую соединительную ткань и дифференцировать ткани со специальными свойствами.

3.2. Конкретные цели:

Знать	Уметь
3.2.1. Эмбриональные источники развития соединительной ткани	3.2.8 3.2.8. Объяснять участие соединительной ткани в создании внутренней среды организма.
3.2.2. Классификацию и общую характеристику соединительных тканей. Соотношения клеточных элементов и межклеточного вещества в различных видах соединительной ткани.	3.2.9. Определять структурные компоненты (клетки и неклеточные структуры) в различных видах соединительной ткани.
3.2.3. Морфологическую и функциональную характеристику клеток рыхлой волокнистой соединительной ткани.	3.2.10. Определять в препарате базофильные и оксифильные структуры и знать, с какими структурно-химическими компонентами связана окраска.
3.2.4. Состав межклеточного вещества рыхлой волокнистой соединительной ткани, функциональное значение его компонентов.	3.2.11. Уметь объяснять функции клеток соединительной ткани по ультрамикроскопическому строению и гистохимической характеристике.
3.2.5. Виды волокон соединительной ткани, их строение, свойства, способы их выявления, функциональное значение.
3.2.6. Химический состав, функциональное значение и происхождение аморфного вещества.
3.2.7. Локализацию в организме всех видов волокнистой соединительной ткани и тканей со специальными свойствами. Возрастные особенности соединительной ткани и возможности физиологической регенерации.

4.Необходимый уровень знаний:

4.1. Из материалов других дисциплин:

- из анатомии — общее представление о распределении в организме РВСТ, жировой, пигментной, ретикулярной ткани;

- из органической химии – строение гликозамингликанов.

4.2. Из предшествующих занятий по гистологии:

4.2.1. Из раздела «Гистотехника»: принципы окрашивания препаратов (понятия оксифилии, базофилии);

4.2.2. Из «Цитологии»: структура и функции органелл (комплекса Гольджи, гранулярной и гладкой ЭПС, лизосом. Понятие и биологический смысл фагоцитоза, секреции, дифференцировки;

4.2.3. Из «Эмбриологи»: производные мезенхимы; нервного гребня.

4.2.4. Из «Общей гистологии»: определение понятия «ткань», классификация тканей.

5.Новый материал:
5.1. Учебник гистологии /Ю.И.Афанасьев, Н.А.Юрина, Е.Ф.Котовский и др., глава 8. Раздел «Рыхлая волокнистая соединительная ткань. Ткани со специальными свойствами». Конспекты лекций.