Феномены, заявленные доказать существование вич

В мае 1983 года Люк Монтанье, Франсуаза Барре-Синусси, Жан-Клод Шерманн и коллеги опубликовали в журнале Science статью «Выделение Т-лимфотропного ретровируса у пациента с риском развития синдрома приобретенного иммунодефицита (СПИД)». Это документ, который с момента разрешения полемики между Монтанье и Галло по поводу обвинений в незаконном присвоении последним французского вируса, направленного в США Институтом Пастера, считается исследованием, доказавшим существование ВИЧ. Там было показано, что митоген-стимулированные клеточные культуры лимфатических узлов от гея (BRU) с лимфаденопатией способны транскрибировать синтетическую РНК-праймер-матрицу An.dT ₁₅, Исходя из этих данных, Монтанье и его коллеги пришли к выводу, что клетки лимфатического узла BRU были инфицированы ретровирусом. Обнаружение такой же активности в супернатанте сокультуры, состоящей из тех же клеток со стимулированными лимфоцитами от здорового человека, считали доказательством как передачи вируса, так и выделения. В другом эксперименте супернатанты из сокультур добавляли к двум, трехдневным, стимулированным культурам лимфоцитов пуповины. «Электронная микроскопия инфицированных лимфоцитов пуповины показала характерные незрелые частицы с плотным серповидным (тип C) почкованием на плазматической мембране». Надосадочную жидкость из культуры связывали в градиенте плотности сахарозы, и было показано, что полоса 1,16 г / мл транскрибирует An.dT ₁₅, Белки в полосе 1,16 г / мл, а также белки клеточного экстракта были разделены в соответствии с их молекулярной массой с использованием «денатурирующего буфера и подвергнуты электрофорезу в 12,5-процентном геле с полиакриламид-SDS». Когда инкубировали полоски с сыворотками человека, было обнаружено, что многие белки из клеточных экстрактов реагируют с сывороткой из BRU, другого гея, а также «здорового донора». В полосках, содержащих белки из полосы 1,16 г / мл, было обнаружено, что три белка, включая p25 («p» для белка, 25 для его молекулярной массы в тысячах), реагируют. Они также сообщили, что р25 не реагировал с антителами к HTLV-I. Было заявлено, что материал с полосами 1,16 г / мл является «очищенным, меченым вирусом», хотя данные электронной микроскопии не были представлены. Авторы пришли к выводу: Ретровирус, принадлежащий к семейству недавно обнаруженных вирусов Т-клеточного лейкоза человека (HTLV), но четко отличающийся от каждого предыдущего изолята, был выделен из пациента с белыми признаками и симптомами, которые часто предшествуют синдрому приобретенного иммунодефицита (СПИД). Этот вирус представляет собой типичный РНК-тип опухолевого вируса типа C, распускается из клеточной мембраны, предпочитает магний для обратной транскриптазной активности и имеет внутренний антиген (p25), аналогичный HTLV p24».

Роберт Галло и его коллеги не считали данные группы Монтанье доказательством «истинной изоляции». Еще в 1997 году в книге, опубликованной одним из самых известных экспертов по ВИЧ, Яапом Гоудсмитом, говорится: «Лимфатический узел BRU был впервые культивирован в начале января 1983 года, а 15 января он выделил фермент, абсолютно уникальный для группа лентивирусов. [Этот фермент даже не специфичен для ретровирусов, а для лентивирусов - гораздо реже (см. ниже)]... Вирус BRU рос медленно и с трудом, но о его идентичности и активности сообщалось в выпуске Science от 20 мая 1983 г.... Группа Пастера была широко признана, но очень обеспокоена. В мире вирусологии найти новый вирус недостаточно: вы должны размножить и изолировать организм для анализа другими вирусологами. Французы еще не изолировали свой новый лентивирус».

Почему тогда: (а) Галло, который просмотрел рукопись Монтанье, рекомендовал ее публикацию? (б) все эксперты по ВИЧ, включая Галло и Гоудсмит (на странице 24 его книги написано: «БРУ был первым штаммом, который был изолирован») признают, что первая изоляция ВИЧ и, следовательно, его существование были доказаны в мае 1983 года. Научная бумага?

Год спустя, в мае 1984 года, Галло, Попович и их коллеги опубликовали четыре статьи по науке в котором они утверждали, что «изолировали» другой ретровирус от больных СПИДом. Однако, помимо использования лейкемической клеточной линии, единственное различие между данными групп Монтанье и Галло было количественным. В первом документе, озаглавленном «Обнаружение, выделение и непрерывное продуцирование цитопатических ретровирусов (HTLV-III) у пациентов со СПИДом и до СПИДа» (HTLV-III = ВИЧ), были описаны эксперименты, в которых «концентрированные культуральные жидкости собирали из коротких Клетки Т-клеток «митогенно-стимулированных» от пациентов со СПИДом или пред-СПИДом культивировали с митогенно-стимулированной лейкемической клеточной линией HT и высоко отобранными клонами, полученными культивированием HT с облученными клетками здорового донора. Данные, представленные в качестве доказательства изоляции ВИЧ, были следующими: (а) RT-активность в бесклеточных супернатантах и ​​полосе 1,16 г / мл; (б) реакция в культурах с «кроличьей антисывороткой к HTLV-III» и «сывороткой пациента (ET)»; (c) EM, показывающий присутствие ретровирусоподобных частиц в культурах.

Исследование, проведенное Национальным институтом здравоохранения по научной целостности, показало, что клеточная линия HT культивировалась не с концентрированными жидкостями (супернатантами), полученными от отдельных пациентов со СПИДом, а с концентрированными жидкостями, первоначально собранными из отдельных культур трех пациентов и в конечном итоге из отдельные культуры десяти пациентов. В доказательствах, приведенных в этом исследовании, причина была в том, что ни один из супернатантов «по отдельности не продуцировал высокие концентрации обратной транскриптазы». Другими словами, Галло и его коллеги не рассматривали уровни ОТ в отдельных культурах как доказательство того, что отдельные образцы содержали ретровирус. Расследование Галло показало, что объединение образцов было «сомнительной научной строгости». Один ученый описал процедуру как для получения кроличьей антисыворотки кроликам сначала нужно ввести чистый ВИЧ? Необъяснимо, как Галло и его коллеги уже могли обладать «кроличьей сывороткой к HTLV-III», прежде чем они доказали существование нового вируса. Однако, если бы антисыворотка была изготовлена ​​«из кроликов, неоднократно зараженных нарушенным HTLV-III», то есть с материалом, полосатым при 1,16 г / мл, можно было бы ожидать получения антител ко всем белкам, составляющим этот материал, даже если белки были клеточными и не вирусный. для получения кроличьей антисыворотки кроликам сначала нужно ввести чистый ВИЧ? Необъяснимо, как Галло и его коллеги уже могли обладать «кроличьей сывороткой к HTLV-III», прежде чем они доказали существование нового вируса. Однако, если бы антисыворотка была изготовлена ​​«из кроликов, неоднократно зараженных нарушенным HTLV-III», то есть с материалом, полосатым при 1,16 г / мл, можно было бы ожидать получения антител ко всем белкам, составляющим этот материал, даже если белки были клеточными и не вирусный.

Во втором документе, озаглавленном «Частое обнаружение и изоляция цитопатических ретровирусов (HTLV-III) у пациентов со СПИДом и риском СПИДа», Галло и его коллеги утверждали, что «изолировали» HTLV-III (ВИЧ) от 26/72 (36%) больных СПИДом. В этой статье изоляция была определена как «более чем одно из следующего»: «повторное обнаружение Mg ²⁺-зависимая обратная транскриптазная активность в надосадочной жидкости; вирус, наблюдаемый с помощью электронной микроскопии (ЭМ) [ретровирусоподобные частицы в культуре]; внутриклеточная экспрессия связанных с вирусом антигенов, обнаруживаемых антителами серопозитивных доноров или кроличьей антисывороткой к HTLV-III; или передача частиц ". Передача частиц была определена как" обнаруженная с помощью RT-анализа или с помощью электронного микроскопа, свежим человеческим [пуповинная] пуповинная кровь, костный мозг или периферическая кровь Т-лимфоцитов ", культивированные с супернатантами от" инфицированных " культур (можно видеть, что метод группы Галло допускал «выделение» ретровируса без доказательств наличия частиц или ОТ).

В третьей статье белки из полосы 1,16 г / мл, которые, как они заявляли, были «очищенными» ВИЧ, а также белки из «инфицированных» клеток были «лизированы и фракционированы с помощью электрофореза на 12% -ном полиакриламидном геле в слябе в присутствие SDS. Белковые полосы электрофоретически переносили на нитроцеллюлозный слой»и реагировали с различными сыворотками. Другими словами, Галло использовал методику, известную как тест на антитела вестерн-блот (WB). Было обнаружено, что многие белки из клеточного экстракта реагируют с сыворотками как пациентов, так и здоровых людей. Они также сообщили, что два белка из полосы 1,16 г / мл, р24 и р41, реагировали с сыворотками пациентов. По этой и никакой другой причине было заявлено, что «эти молекулы являются основными компонентами препарата вируса. Следовательно, р24 и р41 могут рассматриваться как вирусные структурные белки». Что касается морфологии, то группа Галло сообщила, что частица ВИЧ«продуцируется в большом количестве из инфицированных клеток путем отщепления от плазматической мембраны». Возможной уникальной особенностью этого вируса является ядро ​​цилиндрической формы, наблюдаемое во многих зрелых вирионах... HTLV-III является истинным членом семейства HTLV ". (HTLV представляют собой ретровирусные частицы типа C, а не Лентивирусы как ВИЧ утверждают).

В четвертой статье вместо разделения белков, которые соединяются в концентрации 1,16 г / мл, и последующей инкубации их с сыворотками пациентов, использовали смесь всех белков, то есть они выполнили тест, известный как иммуноферментный анализ (ИФА)., «Чтобы понять молекулярную природу антигенов, распознаваемых методом ИФА», они также провели ВБ с некоторыми сыворотками. Они сообщили, что: «Образцы сыворотки от 88 процентов пациентов со СПИДом и от 79 процентов гомосексуальных мужчин с признаками и симптомами, которые часто предшествуют СПИДу, но менее чем у 1 процента гетеросексуальных субъектов, имеют антитела, реактивные против антигенов HTLV-III. Основная иммунная реактивность, по-видимому, направлена ​​против р41, Явное доказательство того, что этиологией СПИДа и АРК был новый лимфотропный ретровирус, HTLV-III» ⁶⁷ (курсив наш).

КОММЕНТАРИИ

Как уже упоминалось, кроме количественного различия, эксперименты группы Галло ничем не отличаются от экспериментов, проведенных Монтанье и его коллегами. Из этого следует, что, если групповые данные Монтанье не доказывают «истинную изоляцию», ни Галло, ни кого-либо еще, потому что до настоящего времени все повторяли (для подавляющего большинства только его части) те же эксперименты, что и эти две группы. Ключевое значение имеет то, что ни одна из групп не сообщила об использовании действительных контролей (см. Выше), а также не доказала, что они получили очищенные ретровирусоподобные частицы. Тогда возникает вопрос: доказывают ли данные, полученные группой Монтанье и Галло, то есть ОТ, частицы в культурах и реакции антиген / антитело, на выделение уникального или даже ретровирусного ретровируса?

Без сомнения, если при выделении ожидается подтверждение очистки, то обнаружение фермента или ретровирусоподобных частиц в культуре или белков в клетках или в полосе 1,16 г / мл, которые реагируют с антителами, присутствующими у человека или животного сера, не подчиняйся. Чтобы утверждать иначе, необходимо определить обнаружение сердечных или печеночных ферментов в крови пациентов, страдающих от боли в груди или желтухи, как доказательство изоляции человеческого сердца или печени. Аналогично, если реакция антитело / антиген является доказательством для выделения вируса, тогда реактивность антитела к белку βHCG является доказательством для выделения плаценты человека. Утверждение о том, что обнаружение ретровирусоподобной частицы в культуре доказывает изоляцию, ничем не отличается от утверждения, что обнаружение рыбоподобного существа в океане такое же, как наличие определенной рыбы на вашей сковороде. Обнаружение ОТ, ретровирусоподобных частиц и реакционной способности антитело / антиген может считаться доказательством обнаружения ретровируса, и тогда, если и только если, имеются предварительные данные о том, что эти три явления специфичны для ретровирусов.

Чтобы утверждать, что обнаружение этого явления доказывает существование нового ретровируса, необходимо иметь доказательство того, что по крайней мере одно из трех явлений отличается от того, которое наблюдается во всех других известных ретровирусах.

Обратная транскриптаза

В настоящее время некоторые из ведущих исследователей ВИЧ считают RT неотъемлемой частью «ретровирусов и рассматривают обнаружение обратной транскрипции в культурах лимфоцитов у пациентов со СПИДом не только как доказательство наличия таких вирусов, но и самого ВИЧ, включая выделение и количественную оценку ВИЧ. Однако, по мнению некоторых из наиболее известных ретровирологов, включая его первооткрывателя», как и нобелевский лауреат и бывший директор Национального института здравоохранения США Гарольд Вармус, обратные транскриптазы присутствуют во всех клетках, а также в бактериях и вирусах. «Обратная транскриптаза (RT) была впервые обнаружена как важный катализатор в биологическом цикле. ретровирусов. Однако в последние годы накопились данные, свидетельствующие о том, что ОТ участвуют в удивительно большом количестве РНК-опосредованных транскрипционных событий, которые включают как вирусные, так и невирусные генетические объекты». Даже если RT был свойством только вирусов, он не специфичен для ретровирусов. По словам Вармуса, «обратной транскрипции отводилась центральная роль в репликации других вирусов [вирусов гепатита В и мозаики цветной капусты] и в транспозиции и генерации других видов эукариотической ДНК». «Вирусы гепатита В (HBV) представляют собой небольшие ДНК-вирусы, которые вызывают постоянные печеночные инфекции у различных животных-хозяев и реплицируют свои ДНК-геномы посредством обратной транскрипции промежуточного РНК. Все члены этого семейства содержат открытую рамку считывания (ORF), "P" (для Обратной транскрипции отводилась центральная роль в репликации других вирусов [вирусов гепатита В и мозаики цветной капусты] и в транспозиции и генерации других видов эукариотической ДНК».«Вирусы гепатита В (HBV) представляют собой небольшие ДНК-вирусы, которые продуцируют стойкие инфекции печени у различных животных-хозяев и реплицируют их ДНК-геномы посредством обратной транскрипции промежуточного РНК. Все члены этого семейства содержат открытую рамку для чтения (ORF), «P» (для Обратной транскрипции отводилась центральная роль в репликации других вирусов [вирусов гепатита В и мозаики цветной капусты] и в транспозиции и генерации других видов эукариотической ДНК».«Вирусы гепатита В (HBV) представляют собой небольшие ДНК-вирусы, которые продуцируют стойкие инфекции печени у различных животных-хозяев и реплицируют их ДНК-геномы посредством обратной транскрипции промежуточного РНК. Все члены этого семейства содержат открытую рамку для чтения (ORF), «P» (для pol), который гомологичен ретровирусным генам pol "[ pol = polymerase]." Вирус гепатита B (HBV) напоминает ретровирусы, включая ВИЧ, в нескольких отношениях. В частности, оба вируса содержат обратную транскриптазу и реплицируются через промежуточный РНК». В связи с этим было высказано предположение, что инфекцию гепатита В следует лечить теми же антиретровирусными средствами, что и ВИЧ-инфекция.

В настоящее время существуют данные, которые показывают, что хотя основным органом-мишенью для вируса гепатита В является печень, клетки, отличные от гепатоцитов, «включая лимфоциты периферической крови и моноциты, могут инфицироваться вирусом гепатита В». Стимуляция лимфоцитов в целом и PHA (агент, используемый в большинстве культур с тканями от пациентов со СПИДом), связана с продукцией вируса гепатита B из лимфоцитов периферической крови у пациентов, инфицированных HBV, включая «репликацию вируса при хронической инфекции гепатита B детство". Вирусная инфекция гепатита В широко распространена в группах риска СПИДа.

В начале 1970 - х лет Галло доказал, что культуры лейкозных клеток транскрибировать An.dT ₁₅ шаблонной грунтовку, как делает материалу полосатость 1,16 г / мл, происходящими из «PHA стимулированных (но не нестимулированные нормальных лимфоцитов человеческой крови». Чтение Gallo 1984 Науки В работах создается впечатление, что линия лейкозных клеток ГТ и, следовательно, ее клоны, включая H9, который использовал Галло, была новой клеточной линией, разработанной в лаборатории Галло. Однако в настоящее время известно, что линия клеток НТ представляет собой линию клеток HUT78, которая возникла у пациента с лейкозом взрослых Т-клеток, заболеванием, которое, по утверждению Галло, вызвано ретровирусом, HTLV-I. Годом ранее Галло заявил, что доказал, что клетки HUT78 инфицированы HTLV-I. Если это так, группа Галло обнаружила бы RT в своих культурах, даже если этот фермент специфичен для ретровирусов, и культуры не были инфицированы ВИЧ. Другие исследователи сообщили об активности РТ у нормальных неинфицированных сперматозоидов.

Следует также отметить, что наличие обратной транскриптазы ВИЧ было обнаружено как Монтанье, так и Галло (и всеми экспертами по ВИЧ с тех пор) косвенно, то есть путем обнаружения транскрипции матричного праймера An.dT ₁₅. Тем не менее, по крайней мере в 1984 году, если не в 1983 году, Монтанье и его коллеги знали, что в 1970-х годах было доказательство того, что «среди ряда шаблонных праймеров (rA) _n. (DT) _12-18 наиболее часто использовались, так как RT показывает высокая активность с этим матричным праймером. Однако проблема заключается в том, что клеточные ДНК-полимеразы (pol b и pol g) также эффективно используют тот же самый матричный праймер». Фактически, в 1975 году Международная конференция по эукариотическим ДНК-полимеразам определила ДНК-полимеразу γ как клеточный фермент, который«копирует An.dT ₁₅ с высокой эффективностью, но плохо копирует ДНК». годом ранее Галло писал: «При соответствующих условиях реакции ДНК-полимераза β может эффективно транскрибировать поли (А), примированную олиго (dT)». Таким образом, можно обнаружить транскрипцию An.dT ₁₅даже при отсутствии ОТ, ни вирусной, ни клеточной, особенно в условиях, используемых для доказательства существования ВИЧ. (И Монтанье, и Галло признают, что явления, обнаруженные в культурах, которые, как говорят, доказывают изоляцию ВИЧ, не могут быть обнаружены, если клетки химически не стимулированы). В настоящее время неспецифичность RT транслируется даже в популярной прессе читателям, которые рассматривают возможность покупки акций биотехнологических компаний.

В заключение, даже если принять определение изоляции групп Монтанье и Галло, учитывая, что ОТ и обратная транскрипция неспецифичны для ретровирусов, их обнаружение даже в неограниченном количестве последовательных культур / совместных культур не может считаться доказательством для изоляции и распространения ретровирус.

"ВИЧ" частицы

Монтанье и его коллеги сообщили о ВИЧ сначала как частицу типа C, затем как частицу типа D и затем как лентивирус, В 1984 году Галло и его коллеги сообщили о ВИЧ как о частице типа С. Тем не менее, в 1985 году Галло писал: «Возможной уникальной особенностью вирионов является цилиндрическое ядро, наблюдаемое во многих предположительно зрелых вирионах. Вирионы, имеющие этот тип ядра, часто сообщались для некоторых ретровирусов типа D, а в некоторых случаях для типа C ретровирусы». Джей Леви сообщил о ВИЧ как о частице типа D. Другие в Калифорнийском университете писали, что «выделенный вирус СПИДа показывает морфологические характеристики типа С, типа D и лентивирусов». По словам Энтони Фаучи и других "" Т-клетки и макрофаги обрабатывают вирус очень по-разному. В Т-клетке вирус выходит из наружной плазматической мембраны клетки. В культурах моноцитов / макрофагов он проникает в мембраносвязанные пузырьки внутри клеток ". Последнее является описанием типа А, ретровирусной частицы. Таким образом, ведущие эксперты по ВИЧ описали ВИЧ как члена двух подсемейств и трех родов Retroviridae. Эти таксономические различия подразумевают, что если бы ВИЧ был недавно обнаруженным млекопитающим, то это мог быть человек, горилла или орангутанг. По общему мнению, в настоящее время ВИЧ считается лентивирусом. Это соглашение было достигнуто, когда выяснилось, что у ВИЧ-позитивных людей СПИД не появлялся вскоре после «инфекции», хотя обозначение «Лентивирус» является морфологическим описанием.

«ВИЧ-инфицированные культуры» содержат помимо частиц с морфологией, приписываемой ВИЧ, много других «вирусных частиц». Например: Хокли и его коллеги из Секции электронной микроскопии и фотографии и Отдела вирусологии в Национальном институте биологических стандартов и контроля в Соединенном Королевстве описывают множество частиц, которые они делят в целом на три группы: зрелые, кольцеобразные и маленький с шипами. «Зрелые частицы» имели приблизительно сферическую форму и диаметр от 100 до 150 нм. Внешняя липидная мембрана часто была сломана или отсутствовала в некоторых местах, и не было никаких признаков поверхностных всплесков... Было найдено несколько зрелых частиц, которые были больше среднего и оказалось, содержит двойной нуклеоид... Лентивирусов и, таким образом, считается, что ВИЧ имеет конусообразное ядро, он и его коллеги также обнаружили центросимметричное и трубчатое ядра. Подпись к одной фотографии гласит: «Видно, что вирионы имеют либо удлиненные,«похожие на жезлы»трубчатые ядра диаметром 30–35 нм, либо содержащие более одного ядра. Трубчатые и правильные конусообразные ядра могут сосуществовать в одном вирионе». В тексте говорится: «Редко наблюдаются трубчатые сердцевинные структуры, напоминающие дубинки диаметром 30–35 нм и длиной 150–250 нм». Лекацас и другие вирусологи из Претории и Йоханнесбурга сообщили: «Мы использовали характерную цилиндрическую структуру в ядре в качестве идентифицирующей характеристики вируса, чтобы отличить его от клеточного мусора, а также отметили, что он может значительно различаться по своим размерам и морфологическим признакам. Мы обнаружили два основных размера вирусных частиц: 90 нм и 120 нм, присутствующих в большом количестве. Более крупная частица не имеет поверхностных выступов, в то время как более мелкая частица редко бывает «голой» и обычно имеет выступы». Центр контроля заболеваний США сообщил: частицы ВИЧ«обычно круглые и имеют диаметр около 85-95 нм... Вирус в форме бруска» Нуклеоиды и частицы с каплевидной формой обычно видны в лимфоцитах, инфицированных HTLV-III / LAV, иногда также могут быть видны кольцевые частицы без плотных нуклеоидов». Тогда возникает вопрос, считаются ли частицы с«уникальной»морфологией ВИЧ представляет собой экзогенный ретровирус, происходящий из тканей пациентов со СПИДом или подверженных риску, тогда каково происхождение и роль многих частиц, не являющихся ВИЧ, и какой, если таковой имеется, «ВИЧ» или полоса частиц не ВИЧ в дозе 1,16 г / мл? То есть, которые имеют плотность, характерную для ретровирусов? Ретровирусоподобные частицы были обнаружены в не-ВИЧ-инфицированных клеточных культурах лимфоцитов пуповинной крови и в клетках, используемых для «изоляции» ВИЧ, таких как В-клетки, трансформированные H9 (HUT-78), CEM, C8166 и EBV. Ретровирусоподобные частицы, антигенно связанные с ВИЧ, были обнаружены в культурах экстрактов слюнных желез от пациентов с синдромом Сьергена. В единственном исследовании EM, либо Ретровирусоподобные частицы, антигенно связанные с ВИЧ, были обнаружены в культурах экстрактов слюнных желез от пациентов с синдромом Сьергена. В единственном исследовании EM, либо Ретровирусоподобные частицы, антигенно связанные с ВИЧ, были обнаружены в культурах экстрактов слюнных желез от пациентов с синдромом Сьергена. В единственном исследовании EM, либо in vivo или in vitro, в которых использовались подходящие контроли и в которых проводилось всестороннее слепое исследование контролей и тестируемого материала, частицы, неотличимые от «ВИЧ», были обнаружены в 18/20 (90%) больных СПИДом, а также в 13/15 (87%) не связанных со СПИДом увеличений лимфатических узлов. Это привело авторов к выводу: «Наличие таких частиц само по себе не указывает на заражение ВИЧ».

Крайне важно отметить, что:

1. Как указывали в 1998 году Ганс Гельдерблом и его коллеги, до настоящего времени никто не сообщал о наличии «инфекционной плазмы ВИЧ».
2. Ни в одной «ВИЧ-инфицированной» культуре нет частиц, которые демонстрируют обе основные морфологические характеристики ретровирусов, то есть «диаметр 100–120 нм» И поверхности, которые «усеяны выступами (шипы, ручки)». Электронный микроскоп согласен с тем, что частицы «ВИЧ» лишены ручек и, следовательно, белка «ВИЧ» gp120 (см. Ниже), который считается составляющим белком ручек.

Ханс Гелдерблом и его коллеги подсчитали, что сразу после высвобождения из клеточной мембраны «частицы ВИЧ» обладают в среднем 0,5 ручки на частицу, которые быстро теряются, но также отметили, что «возможно, что структуры, напоминающие ручки, могут наблюдаться даже когда gp120 [ручек] не было, то есть ложных срабатываний». Все же все эксперты по ВИЧ соглашаются, что инфекционность частиц ВИЧ определяется gp120 (ручки). Таким образом, согласно Монтанье и др. «Gp120 отвечает за связывание рецептора CD4», в то время как для Matthews и Bolognesi «сначала gp120 связывается с рецептором CD4 на неинфицированной клетке; затем gp41 закрепляется в соседней мембране; затем два мембраны начинают плавиться, и др. заявляют: «Вирус иммунодефицита человека (ВИЧ) инфицирует лимфоциты, моноциты и макрофаги, связываясь с его основным рецептором, молекулой CD4, через гликопротеин вирусной оболочки gp120. Петля V3 gp120 является критической для ВИЧ-инфекции». Другие находятся в полном согласии.

Общее согласие, что gp120 (ручки) абсолютно необходимы для того, чтобы частицы ВИЧ были заразными, и тот факт, что этот белок (ручки) не присутствует в бесклеточных частицах, приводит к одному неизбежному заключению, то есть частицы "ВИЧ" не являются инфекционные, они не являются вирусными частицами. Более того,

1. Для заражения лимфоцитов пуповины и клеток HUT-78 Монтанье и Галло использовали бесклеточные жидкости (супернатанты). Монтанье культивируют лимфоцитами пуповины с супернатантом из сокультур лимфоцитов из BRU, культивируемых с лимфоцитами здорового человека. Галло культивировал клеточную линию HUT-78 с супернатантами из культур десяти «инфицированных» особей. Даже если бы надосадочные жидкости содержали частицы, то, будучи свободными от клеток, частицы были бы лишены ручек (gp120), то есть они не были бы заразными. Это означает, что даже если у Монтанье и Галло были доказательства того, что их клонированные культуры пуповины и HUT-78 содержали частицы со всеми морфологическими характеристиками ретровирусов, то в градиентах плотности сахарозы частицы соединились в 1. Полоса 16 г / мл и полоса не содержала ничего, кроме частиц, частицы не могли быть получены от их пациентов. Кроме того, поскольку единственные образцы, которые Институт Пастера передал лаборатории Галло, были свободны от клеток, следует поставить под сомнение основание, по которому Галло был обвинен в незаконном присвоении французского вируса.
2. Общепринято, что гемофилики инфицированы ВИЧ зараженным фактором VIII. Однако до настоящего времени никто не сообщал о наличии частиц "ВИЧ" в плазме. Даже если бы такие частицы присутствовали, частицы были бы лишены gp120. Поскольку gp120 является «критическим для способности ВИЧ инфицировать новые клетки», гемофилиям невозможно заразиться ВИЧ посредством введения фактора VIII. Есть еще одна фундаментальная причина, по которой гемофилики не могут быть заражены «ВИЧ» от «загрязненного» фактора VIII. Согласно публикации CDC, ¹¹²«Чтобы получить данные о выживаемости при ВИЧ, лабораторные исследования потребовали использования искусственно высоких концентраций вируса, выращенного в лабораторных условиях... количество изученного вируса не обнаружено в образцах человека или в других местах в природе... он не распространяет и не поддерживает инфекционность за пределами своего хозяина. Хотя эти неестественные концентрации ВИЧ могут сохраняться в живых при строго контролируемых и ограниченных лабораторных условиях, исследования CDC показали, что сушка даже при таких высоких концентрациях ВИЧ снижает количество инфекционных вирусов на 90 до 99 процентов в течение нескольких часов. Поскольку концентрации ВИЧ, используемые в лабораторных исследованиях, намного выше, чем концентрации, обнаруженные в крови или других образцах тела,высыхание ВИЧ-инфицированной крови человека или других жидкостей организма снижает теоретический риск передачи в окружающую среду до того, что наблюдалось - по существу, ноль». Учитывая, что фактор VIII дозируется в виде лиофилизированного порошка, который тратит много недель или месяцев на ожидание использования Непонятно, что CDC и другие продолжают рассматривать пациентов с гемофилией, подверженных риску заражения ВИЧ через загрязненные концентраты фактора VIII, и загадочно, что не было найдено другого объяснения «ВИЧ» и СПИДа у больных гемофилией.непонятно, что CDC и другие продолжают рассматривать пациентов с гемофилией, подверженных риску заражения ВИЧ через загрязненные концентраты фактора VIII, и загадочно, что не было найдено другого объяснения «ВИЧ» и СПИДа у больных гемофилией.непонятно, что CDC и другие продолжают рассматривать пациентов с гемофилией, подверженных риску заражения ВИЧ через загрязненные концентраты фактора VIII, и загадочно, что не было найдено другого объяснения «ВИЧ» и СПИДа у больных гемофилией.⁴

Единственный вывод, который можно сделать из данных электронной микроскопии, состоит в том, что указанные частицы не являются специфичными для ВИЧ или даже ретровирусными, что означает, что обнаружение таких частиц, будь то в неограниченном количестве последовательных культур / сокультур, не является доказательством для изоляции независимо от того, как определяется изоляция.

Более того:

1. Даже если активность обратной транскриптазы и ретровирусоподобные частицы специфичны для ретровирусов, они не специфичны для уникального ретровируса. Единственным доказательством существования обеих групп существования уникального ретровируса, ВИЧ, является реакция антиген / антитело, что подтверждают и Монтанье, и Галло.
2. Принято считать, что обнаружение ретровируса в культуре, особенно в условиях, используемых Монтанье и Галло, не является доказательством того, что ретровирус присутствует in vivo. Единственным доказательством существования ВИЧ и in vivo в группах Галло и Монтанье была реакция антиген / антитело.
3. Даже сегодня единственным доказательством того, что ВИЧ является причиной СПИДа, является «корреляция» между тестом на антитела и появлением СПИДа.

Очевидно, что:

1. интерпретация реакции антиген / антитело Монтанье и Галло имеет решающее значение для гипотезы ВИЧ о СПИДе и фактически для существования уникального ретровируса, ВИЧ;
2. если толкования не верны, у человека не будет другого выбора, кроме как поставить под сомнение не только гипотезу ВИЧ о СПИДе, но и существование ВИЧ.

"ВИЧ" антитела

Уже упоминалось, что простое взаимодействие между антигеном, таким как белок или вирус, и антитело не доказывают ничего, кроме химической связи. Во всех других аспектах реакция может быть совершенно неспецифичной. Чтобы доказать специфичность реакции, нужно использовать альтернативный, независимый метод доказательства существования антигена, то есть нужно использовать так называемый золотой стандарт. Единственный возможный золотой стандарт для тестов на антитела к ВИЧ (реакция антиген / антитело) - это сам ВИЧ, то есть изоляция ВИЧ. Независимо от того, как вы определяете изоляцию, очевидно, что определение не может включать реакцию антитело / антиген (тест на антитела, ни ВБ, ни ИФА), потому что при этом не только не проводится независимый анализ, тест становится его собственным золотым стандартом и, таким образом, становится бессмысленным. Чтение Галло 1984 года В научных работах выяснилось, что Галло всегда определял изоляцию как «более чем одно из следующего: активность обратной транскриптазы в супернатанте или в полосе 1,16 г / мл; ретровирусоподобные частицы в культуре или реакция между белками (либо в культивируемых клетках» или полоса 1,16 г / мл) с антителами, присутствующими в сыворотках пациентов, или "антисыворотка к HTLV-III". Однако в интервью Галло дал Хью Кристи, редактору британского журнала Continuum На Женевской конференции по СПИДу 1998 года Галло сказал: «Иногда у нас был положительный результат теста«Вестерн-блот», но мы не могли изолировать вирус. Поэтому мы волновались и чувствовали, что иногда получаем ложные срабатывания, поэтому мы добавили вестерн-блот. Это все, что я могу скажу вам. Это был экспериментальный инструмент, когда мы добавили его, и у нас он работал хорошо, потому что мы могли изолировать вирус, когда мы это сделали ". Другими словами:

1. В 1984 году Галло знал, что для доказательства специфичности теста на антитела необходимо использовать золотой стандарт.
2. Золотым стандартом должна была быть изоляция от ВИЧ.
3. Хотя неизвестно, как он и его коллеги первоначально определили изоляцию, определение не включало реакцию антитело / антиген (Вестерн-блот). Это означает, что Галло и его коллеги знали, что реакция антитело / антиген не может быть использована в качестве доказательства для выделения. Тем не менее, к тому времени их наука были опубликованы статьи, и чтобы согласовать низкую корреляцию между тем, что они первоначально называли изоляцией, и реакцией антитело / антиген, произвольно и вопреки всем научным рассуждениям, они «добавили вестерн-блот» к своему определению изоляции. (Интересно, что даже с их новым определением корреляция между «изоляцией» и тестами на антитела была все еще менее чем идеальной. Они «изолировали» ВИЧ от 26/72 (36%) пациентов со СПИДом, в то время как 88% пациентов со СПИДом были серопозитивными с использованием теста на антитела, Галло считался высокоспецифичным).

В интервью, которое Монтанье дал французскому журналисту Джамелю Тахи в 1997 году, он заявил: «Анализ белков вируса требует массового производства и очистки. Это необходимо сделать». Действительно, единственный способ доказать, что белок является вирусной составляющей, - это получить его из материала, который не содержит ничего, кроме вирусных частиц. Вместо этого группы Монтанье и Галло инкубировали протеины, которые в концентрации 1,16 г / мл, с сыворотками пациентов со СПИДом. Говорят, что белки, которые чаще взаимодействуют с сывороткой, являются белками ВИЧ (хотя ни одна из групп не опубликовала никаких доказательств существования ретровирусоподобных частиц, чистых или нечистых, в полосе 1,16 г / мл); и антитела должны быть антителами к ВИЧ. Однако, даже если реакция антиген / антитело является специфической на 100%, то есть антитела реагируют только с индуцирующими антигенами и ни с каким другим, по такой реакции невозможно определить происхождение даже одного реагента, намного меньше происхождения как антигена, так и антитела. Давайте рассмотрим различные сценарии: