Тема: организация и правила работы бактериологической лаборатории. Принципы и методы лабораторной диагностики инфекционных заболеваний.

Практическое занятие № 1

Тема: Организация и правила работы бактериологической лаборатории. Принципы и методы лабораторной диагностики инфекционных заболеваний.

Цель занятия. Ознакомиться с понятием «лаборатория», целями и задачей лаборатории с оборудованием рабочего места в микробиологической лаборатории, техникой безопасности при работе с микроорганизмами. Знать методы микробиологического исследования, особенности забора в зависимости от вида материала. Знать проведение микробиологических исследований.

Материалы и оборудование: инструкция по технике безопасности при работе с культурами микроорганизмов; журнал по технике безопасности; микроскоп; микробиологическая петля с петледержателем; спиртовка; предметные стекла; покровные стекла; шпатель Дригальского; пипетка Пастера; пипетка стеклянная градуированная; методички

Задачи:

1. Ознакомиться с оборудованием рабочего места и техникой безопасности при работе с микроорганизмами.

2. Уметь проводить забор и хранение материала для микробиологических исследований

Задание 1.Изучите теоретический материал и законспектируйте.

Определение лаборатории.

«Laborare» – работать (Л.Пастер)

Лаборатория-учреждение, выполняющее экспериментальные, контрольные и аналитические функции.

В системе здравоохранения существуют:

Клинико-диагностические лаборатории общего типа (клинические)

2. Клинико-диагностические лаборатории специального типа (биохимические, иммунологические, цитологические и т.д.);

3. Микробиологические лаборатории (бактериологические, вирусологические, паразитологические, микологические);

С патогенными микроорганизмами работают в специально оборудованных лабораториях, обеспечивающих такие режимы работы и технику безопасности, которые исключают возможность заражения персонала и «утечку» микроорганизмов за пределы лаборатории.

Цели (задачи) микробиологической лаборатории ЛПУ

1.Постановка микробиологического диагноза (выделение микроорганизма, вызвавшего данное инфекционное заболевание- определение вида микроорганизма).

Контроль за санитарным состоянием окружающей среды ЛПУ для профилактики ВБИ (исследование окружающих объектов с целью выявления степени микробного загрязнения)

Выявление носителей патогенных организмов.

Соответственно целям микробиологической лаборатории материалом для исследования являются:

Биологический материал - все выделения от больного человека (испражнения, моча, рвотные массы, мокрота, отделяемое ран), а также кровь, желчь, спинномозговая жидкость, промывные воды желудка, бронхов, трупный (секционный) материал и др.

Объекты окружающей среды (пробы воздуха, воды, пищи, смывы со стен и т.д.)

Любой клинический материал следует рассматривать как потенциально опасный для человека, поэтому при его заборе, хранении и транспортировке необходимо строжайшим образом соблюдать все правила биологической безопасности!!!

Прочитайте с инструкциюпо соблюдению правил внутреннего распорядка, техники безопасности, при работе в учебной бактериологической лаборатории.

А. Требования безопассти перед началом работы.

· Перед началом работы студент должен одеть спец. одежду: тхалат, шапочку.

· Ознакомиться с данной инструкцией и расписаться в журнале учета.

В помещении лаборатории запрещается:

ü входить в микробиологическую лабораторию в верхней одежде.

ü вносить и приниматьпищу, питьевую воду, посторонние вещи, курить, хранить продукты питания.

ü выносить демонстрационный материал из одного помещения лаборатории

ü держать личные вещи на рабочем столе

ü посторонним лицам посещать работающего и отвлекать его от работы.

ü пользоваться не исправным оборудованием, аппаратурой, приборами.

Б. Требования безопасности во время работы

ü Во время работы в лаборатории необходимо соблюдать чистоту, аккуратность и точность в выполнении порученной работы.

ü На рабочем месте размещаются только необходимые для выполнения конкретной лабораторной работы оборудование и материалы.

ü Запрещается прикасаться к демонстрационному материалу без указания преподавателя.

ü При выполнении бактериологических работ строго следить за чистотой рук, по окончании работы дезинфицировать 70⁰спиртом.

ü Не зажигать одну спиртовку от другой. Закрывать фитиль спиртовки колпачком междуиспользованиями.

ü В конце работы привести в порядок рабочее место и тщательно продезинфицировать.

ü Тщательно вымыть руки и обработать ватным тампоном с дезинфицирующим раствором. Халат сложить в полиэтиленовый пакет.

ü Выполнение правил техники безопасности контролируют дежурные студенты, которые также проверяют в конце занятия порядок рабочихмест.

В. Требования безопасности в аварийных ситуациях.

ü При авариях и несчастных случаях, связанных с ранением, ожогом пострадавший (сам или свидетель происшествия) обязан немедленно сообщить об этом преподавателю.

ü При аварии с нарушением целостности кожных покровов необходимо выдавить кровь из раны и смазать кожу раствором йода.

ü В случаях боя посуды сообщить преподавателю. Не принимая самостоятельных действий.

Правилами забора и доставки материала в бак.лабораторию

 виды стерильных пробоотборников

Задание3. Изучите и запишите в тетрадь:

3.1.Общие требования к забору и доставке материала:

Взятие биологических материалов на микробиологические исследования:

· производят в стерильные пробоотборники (пробирки, контейнеры, флаконы и др. посуду) до начала антибактериальной терапии или спустя 12-24 часа после последнего приема;

· доставляют с соблюдением сроков доставки (без транспортных сред) не позднее 2 часов с момента взятия, без переохлаждения

· материал не должен подвергаться воздействию высоки и низких температур, солнечных лучей или дез.средств

· Количество должно быть достаточным для первичного и повторного исследования (в случае необходимости)

· Доставляют в сумках-холодильниках или биксах

· Доставляется с сопроводительным документом: Ф.И.О., возраст, место работы, домашний адрес, вид материала, диагноз, дата: число, месяц, год; время: часы, минуты; данные учреждения направившего материал: ФИО, должность забиравшего.

Направление.

Направление на исследование материала от людей в лабораторию_________

Направляется_______________

Цель исследования____________________________

 

Регистр.номеранализа	Первичный (Повторный)	ФИО	№ проб	возраст	Адрес (местожит-ва)	Место работы, учебы	Клиническийдиагноз. контингент	Датаотбораматериала. время	Применениеантибиотиков

Дата доставки проб_____ час____ число____месяц_____год________

Прбы доставил___________________   Пробы принял_____________

Работа в микробиологической лаборатории опасна (экологически агрессивная зона!)

Поэтому, при работе в микробиологической лаборатории требуется:

1. Соблюдение санитарно-эпидемиологического режима.

2. Соблюдение личной гигиены.

3. Правила по технике безопасности.

 

При работе в микробиологической лаборатории соблюдают следующие правила работы:

1. Работу с инфицированным материалом проводят спомощью специальных инструментов (пинцетов, петельи т.д.)

2. Посев материала проводиться вблизи огня спиртовки с обжиганием петли,шпателя, краев пробирки.

3. При посеве на лабораторной посуде делается надпись с указанием названия материала, номер анализа и даты посева.

4. Во время работы все чашки с посевами помещают в кюветы, а пробирки в штативы.

5. Перед работой тщательно проверяют целостность лабораторной посуды, проходимость игл и поршней шприцев.

6. Забор в пипетки химических реактивов, растворов и жидкостей, содержащих инфицированный материал, проводят с помощью автоматической пипетки.

7. Остатки нативных биологических материалов, содержащих микроорганизмы сливают в специальные емкости для обеззараживания, которое проводиться в тот же день.

8. После завершения проводиться дезинфекция рабочего места, помещения, обработка рук и т.д.

 

Категорически запрещается:

· Выполнять в лаборатории другие виды работ;

· Прикасаться к исследуемому материалу руками;

· Переливать инфицированные жидкости из сосуда в сосуд;

· Забирать в пипетки растворы ртом;

· Оставлять на столах нефиксированные препараты;

· Оставлять посуду с инфицированным материалом.

Структура лаборатории

Задание 4. Изучите и запишите в тетрадь:

Оборудование рабочего места

место	оборудование
Стол для первичногопосева	1. Штатив 2. Бактериальнаяпетля 3. Емкость с дез.раствором хлорамина 1-2% 4. Карандаш по стеклу 5. Спиртовка 6. Питательныесреды 7. Физ.р-р 8. Емкость для мусора
Стол для окраскипрепаратов	1. Лоток для смывакрасок 2. Мостики 3. Наборкрасителей 4. Пипетки 5. Часыпесочные 6. Стеклапредметные 7. вода

Рисунок - Микробиологическая посуда

А — чашка Петри; Б — стекло предметное; В — стекло покровное; Г — игла микробиологическая; Д — петля бактериологическая; Е — шпатель Дригальского

 

1.Предметные стекла. Служат для приготовления микробиологических препаратов. Предметные стекла имеют размеры 26х76 мм. Толщина стекла 1 мм. Существуют модификации предметныхстекол:

- стекло предметное с заточенным краем для растяжкимазков;

- стекло предметное с лункой для микроскопии   препаратов

«висячая капля»;

- стекло предметное с полосой длязаписи.

 

2.Покровные стекла. Покровное стекло предназначено для защитыобъективамикроскопа,авслучаеполученияпрепарата«висячая капля» на него наносится исследуемая культура микроорганизмов. Толщина стекла 0,2 мм. Размеры покровных стекол 18х18, 24х24, 24х48 мм.

Микроскопировать препараты, не защищенные покровным стеклом, категорически запрещается!

3.Бактериологическая петля. Состоит из петледержателя и собственно петли, изготовленной из нихромовой нити различного диаметра.

4.Чашка Петри ( изобретена в 1877 г. немецким бактериологом Юлиусом Рихардом Петри, ассистентом Роберта Коха) обычно изготавливается из прозрачного стекла или пластмассы (прозрачный полистирол) и может иметь самые различные размеры. Наиболее часто используемые варианты имеют диаметр порядка 50 — 100 мм и высоту около 15 мм. Чашка широко используется в микробиологии для культивирования колоний микроорганизмов. Для этой цели чашка Петри заполняется слоем питательной среды, на который производят посев культуры микроорганизмов. Стеклянные чашки — многоразовые, но требуют стерилизации перед повторным посевом. Чашки из пластических материалов поставляются стерильными, в герметичнойупаковке.

5. Шпатель Дригальского предназначен для засевания материала на плотные питательные среды. Выпускаются шпатели L- и Т-формы. Гладкая поверхность рабочей части шпателя позволяет избегать повреждения питательнойсреды.

Задание на дом

1. Изучить методы микробиологического исследования

2. Повторить лекцию по морфологии

· Биологическая систематика или таксономия (закономерное расположение

· Современная классификация микроорганизмов

· бинарная номенклатура

· дайте определение вид, перечислите варианты видов

· Перечислите отделы царства прокариот

· Перечислите группы, классы

· Перечислите формы бактерий

· Опишите строение клетки прокариот

· Перечислите функции цитоплазматической мембраны прокариот

· Перечислите функции клеточной стенки прокариот

· Перечислите непостоянные структуры клетки

3. Строение бактериальной клетки(зарисовать втетради)

Практическое занятие № 1

Тема: Организация и правила работы бактериологической лаборатории. Принципы и методы лабораторной диагностики инфекционных заболеваний.

Цель занятия. Ознакомиться с понятием «лаборатория», целями и задачей лаборатории с оборудованием рабочего места в микробиологической лаборатории, техникой безопасности при работе с микроорганизмами. Знать методы микробиологического исследования, особенности забора в зависимости от вида материала. Знать проведение микробиологических исследований.

Материалы и оборудование: инструкция по технике безопасности при работе с культурами микроорганизмов; журнал по технике безопасности; микроскоп; микробиологическая петля с петледержателем; спиртовка; предметные стекла; покровные стекла; шпатель Дригальского; пипетка Пастера; пипетка стеклянная градуированная; методички

Задачи:

1. Ознакомиться с оборудованием рабочего места и техникой безопасности при работе с микроорганизмами.

2. Уметь проводить забор и хранение материала для микробиологических исследований

Задание 1.Изучите теоретический материал и законспектируйте.

Определение лаборатории.

«Laborare» – работать (Л.Пастер)

Лаборатория-учреждение, выполняющее экспериментальные, контрольные и аналитические функции.

В системе здравоохранения существуют: