Диагностика и диффер-я диагностика вирусных болезнейжвачных ирт, пг-3, вд и рси

ИРТ

Инфекционный ринотрахеит крупного рогатого скота (ИРТ) - остро протекающая контагиозная вирусная болезнь, характеризую­щаяся воспалением верхнего отдела органов дыхания. Вирус может вызывать вульвовагинит, конъюнктивит, аборт и энцефалит.

Диагноз. Эпизоотологические данные, клиническая картина и ре­зультаты патологоанатомического вскрытия не дают оснований для постановки диагноза, так как сходные признаки могут быть обнару­жены при других вирусных респираторных заболеваниях крупного рогатого скота. На основании этих признаков можно поставить толь­ко предварительный диагноз. Однако при дифференциальной диаг­ностике следует исключить вирусную диарею, злокачественную ка­таральную горячку, параинфлюэнцу-3, аденовирусную инфек­цию.

Окончательный диагноз па инфекционный ринотрахеит ставят по результатам исследований. Для этого из материалов, взятых от боль­ных животных, выделяют вирус и проводят его идентификацию, а также обнаруживают специфические антитела в сыворотках пере­болевших животных.

Из серологических методов Йорк рекомендует ис­пользовать реакцию нейтрализации в культурах клеток, метод иммунофлуоресценции и реакцию непрямой гемагглютинации.

Четем и Грендел, Кендрик и др. (1958), Грендел и др. (1959), 3. Ф. Зудилина (1970) считают харак­терным для ринотрахеита обнаружение в клетках культур тканей, зараженных вирусом, или в эпителиальных клетках больных живот­ных внутриядерных телец-включений типа А Каудри.

Для выделения вируса от больного животного берут тампоном пробы носовой слизи или соскобы со слизистой оболочки носа, влагалища, конъюнктивы или кусочки носовых раковин, трахеи, легкого, головного мозга, плаценты, а от плода - легких, печени, селезенки. Из патологического материала готовит су­спензию и ею заражают культуры первично-трипсинизированных клеток почек эмбрионов коров, тестикул бычков, ночек телят или их субкультуры. При высо­кой концентрации вируса в исследуемом материале цитопатические изменения появляются в первом пассаже. При отсутствии этих изменений необходимо про­вести три последовательных пассажа. Если при третьем пассаже не будет обна­ружено изменений в клетках, исследование материалов прекращают.

В культуре тестикулов бычков, как наиболее чувствительной к вирусу, цитопатические изменения наступают через 36-48 часов по всему монослою и ха­рактеризуются округлением клеток. В культурах клеток почек эмбрионов коров и почек телят эти изменения вначале носит очаговый характер, затем распростра­няются по монослою; могут образовываться симпласты.

Выделенный вирус идентифицируют реакцией нейтрализации в культурах клеток с заведомо положительной сывороткой против ринотрахеита. Подавле­ние цитопатогенного действия вируса специфической сывороткой при наличии этого действия в контроле указывает на видовую принадлежность исследуемого вируса.

Сыворотки получают от морских свинок или кроликов, гипериммунизируя их культуральным вирусом. Активные сыворотки, обладающие высокими ви-руснейтрализующими свойствами, можно получить гипериммунизацией телят культуральным вирусом, а также от отдельных жи­вотных, переболевших в естественных условиях.

Ретроспективную диагностику ринотрахеита проводит исследованием проб сыворотки от переболевших животных реакцией нейтрализации с использова­нием известного штамма вируса или реакцией непрямой гемагглютинации с ис­пользованием специфического антигена. Пробы сывороток берут не ранее 15 дней после выздоровления, лучше на 28-й день, так как в это время титр антител до­стигает максимального уровня (Йорк, 1968). Диагноз считают положительным, если и сыворотках обнаруживают антитела с индексом нейтрализации не ниже 2 ]g ТЦДг,0/мл или с титром 1: 8 и выше в реакции непрямой гемагглютинации.

При постановке реакций непрямой гемагглютинации используют антиген, которым сенсибилизируют эритроциты барана, обработанные танином. Реакцию ставят на досках из органического стекла с лунками, в которые вносят по 0,5 мл двукратные разведения исследуемых сывороток от 1:4 до 1:512 и такое же ко­личество сенсибилизированных эритроцитов. Учитывают реакцию через 3-5 ча­сов. Если в сыворотках есть специфические антитела, происходит агглютинация эритроцитов и оседание их в виде зонтика (реакции положительная).

Для ускоренной диагностики ринотрахеита применяют метод иммунофлуо-ресценции в прямой и непрямой модификациях. При помощи этого метода обнаруживают специфический антиген в культурах клеток, зараженных выделенным вирусом, светящийся ин­тенсивно зеленым светом. Антиген обнаруживают через 12 -16 часов после зара­жения, т. о. раньше, чем наступают цитопатические изменения. В одних клетках он локализуется вокруг мембраны ядра в виде узкой полосы, в других - непо­средственно около ядер, а затем в цитоплазме.

По данным Шроера и Естердея, методом иммунофлуоресценции нельзя обнаружить антиген в клетках, полученных от боль­ных животных, так как он в большинство случаев дает неспецифические ре­зультаты.

Удовлетворительные результаты диагностики инфекционного ринотрахеита дает реакция преципитации в агаровом геле. Сыворотки от жи­вотных необходимо получать через 4 недоли после переболевания. В качестве ан­тигена используют культуральный вирус, очищенный углеводородом. Линии преципитации появляются через 48 часов инкубирования реагентов во влаж­ной камере при температуре 5°.

ПГ-3

Парагрипп-3
Парагрипп-3 — острое инфекционное заболевание крупного рогатого скота вирусной этиологии, характеризующееся поражением преимущественно органов респираторного тракта.

Диагноз на парагрипп-3 крупного рогатого скота ставится по эпизоотологическим данным, клинике и патологоанатомическим изменениям с обязательным подтверждением вирусологическими и серологическими исследованиями.

Для выделения вируса у больных животных лучше отбирать носовую слизь на 2—3-й день болезни, а от павших или вынуждено убитых — кусочки легкого (на границе пораженной и здоровой ткани), трахеи, носовой перегородки.

Серологическая диагностика - основана на исследовании в РТГА парных проб сыворотки крови, взятых в начале болезни и через 12—14 дней, или носовых секретов, отобранных в начале болезни и через 7—9 дней, Для обнаружения вирусных антигенов в носовой слизи или в отпечатках слизистой оболочки носовой полости используют МФА.

При дифференциальной диагностике принимают во внимание респираторные инфекции, вызываемые другими вирусами (аденовирусы, PC-вирусы, инфекционный ринотрахеит, вирусная диарея), хламидиями, микоплазмами, а также возбудителями бактериальных инфекций (пастереллез, паратиф, дипло-кокковая инфекция).

ВД

Вирусная диарея крупного рогатого скота (болезнь слизистых оболочек, мукозальная болезнь, инфекционная диарея крупного рогатого скота, инфекционный энтерит крупного рогатого скота, диарея новорожденных телят) (diarrhea vizalis bovum) — контагиозная болезнь преимущественно молодых животных, характеризующаяся эрозивно-язвенным воспалением слизистых оболочек пищеварительного тракта.

Диагноз ставят комплексно на основании клинико-эпизоотологических данных, патологоанатомических изменений и лабораторных исследований Лабораторная диагностика на вирусную диарею включает в себя проведение следующих исследований: выявление специфического антигена из биологического материала с использованием иммуноферментного анализа (ИФА) или иммунофлуоресценции (МФА), выделение вируса на культуре клеток и его идентификация в реакциях нейтрализации (РН) и торможения непрямой гемагглютинации (РТНГА). Сюда же входит реакция связывания комплемента (РСК), иммуноферментный анализ (ИФА), а также ретроспективная диагностика с помощью реакции непрямой гемагглютинации (РНГА), иммуноферментного анализа (ИФА), нейтрализации (РН), связывания комплемента (РСК).

Дифференциальный диагноз. Вирусную диарею дифференцируют от инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, аденовирусной инфекции, хламидиоза, пастереллеза, респираторно-синтициальной инфекции.

РСИ

Определение. Респираторно-синцитиальная инфекция к.р.с. (заразный кашель, пульмональная эмфизема) - контагиозная, остро протекающая болезнь, преимущественно телят. Она характеризуется лихорадкой и катаральным воспалением слизистых оболочек органов дыхания, сильным кашлем, потерей аппетита, поражением легких.

Диагноз.
Поставить диагноз на PC-инфекцию на основании клинических признаков, эпизоотологических данных и патомор-фологических изменений трудно ввиду сходства болезни с Другими респираторными вирусными заболеваниями телят. Решающее значение при диагностике имеют лабораторные методы исследований, в частности, выделение и идентификация вируса на культуре клеток и обнаружение вирусного антигена методом иммунофлуоресценции в препаратах, слизистой оболочки носа или трахеи (В. Н. Сюрин, Н. В. Фомина, 1979).

Ретроспективная диагностика основана на обнаружении прироста специфических антител в парных пробах сыворотки крови в РН, РСК, РДП. В нашей стране разработан и внедрен в ветеринарную практику метод диагностики РС-инфекции крупного рогатого скота в РСК (В. В. Гуненков и др., 1975).

М. S. Мс Nulty et al. (1983) обнаружили вирусный антиген методом иммунофлуоресценции у экспериментально зараженных телят между 1 и 14-м днями. На диагностическую ценность этого способа указывали также L. Н. Thomas et al. (1981), Р. Бестанджиева и др. (1984), изучали эффективность выявления антител к PC-вирусу в сыворотке крови на неблагополучных по респираторным заболеваниям телят фермах в Болгарии методом РСК. При этом авторы отмечают, что эта реакция весьма подходящая для быстрой диагностики РС-инфекции.