Альтернативный путь активации системы комплемента

 

Был открыт в 1956 году. Имеет не иммунологическое начало. Нет взаимодействия АГ и АТ. Система активируется при попадании в организм чужеродных АГ (компоненты альтернативного пути метят эти вещества как чужеродные). Альтернативный путь – это самый древний путь мечения чужого. Это типичный механизм врожденного иммунитета.

Активацию альтернативного пути вызывают ЛПС микроорганизмов, яды змей, вирусы (например, вирус кори), опухолевые клетки.

Ключевым событием является появление С3в, который прикрепляется к чужеродному веществу в его складках и уходит от контроля ингибитора жидкой фазы.

С3в может образовываться в классическом пути активации системы комплемента. Следовательно, классический путь и альтернативный путь связаны между собой по типу обратной связи. Может образовываться в результате гидролиза С3 (спонтанное образование С3в).

Когда С3в уходит от контроля ингибитора, то к нему прикрепляется фрагмент раннего белка альтернативного пути, а именно Вв. Белок D - протеолитический фермент, расщепляющий спонтанно белок В на 2 фрагмента: Ва и Вв. Вв вместе с С3в образует двухферментный белок – конвертазу-С3 альтернативного пути (С3вВв).

Данная конвертаза стабилизируется дополнительным белком Р, препятствующий распаду конвертазы. Данный фермент расщепляет С3 на С3а и С3в. Новая порция С3в прикрепляется к конвертазе - С3 альтернативного пути и образуется С3вВвРС3в. Этот комплекс называется конвертаза-С5 альтернативного пути, расщепляющая С5 на С5а и С5в. И начинает формироваться мембраноатакующий комплекс, как и при классическом пути активации комплемента.

 

Лектиновый путь активации системы комплемента

 

Инициируется маннозосвязывающим белком – лектином крови, структурным аналогом С1q. Маннозосвязывающий белок с маннозой поверхности микробной клетки с последующим расщеплением С4, С2 компонентов комплемента и образованием С3-конвертазы классического пути (С4вС2в).

 

Белки-ингибиторы

Их классифицируют по месту их действия:

1. ингибиторы жидкой фазы С1, С3в;

2. ингибиторы внеклеточного матрикса;

3. клеточные ингибиторы, среди которых выделяют рецепторы компонентов комплемента (CR1, CR2): на фагоцитах, эритроцитах и других клетках. Они участвуют в удалении компонентов системы комплемента.

 

Биологическое значение системы комплемента

1. Выполняет эффекторные функции в гуморальном звене иммунитета, вызывая цитолиз по комплемент-АТ-зависимому пути.

2. АТ не только вызывают цитолиз, но и опсонизацию АГ – объектов фагоцитоза (опсонины С3в, С4в и т.д.).

С3в

АГ

 

 

фагоцит

 

3. Комплемент участвует в элиминации ЦИК через С3в в составе ЦИК и CR1, которые присутствуют на эритроцитах.

4. Комплемент участвует в инициации воспаления. Главное значение принадлежит С3а, С4а, С5а – это анафилотоксины, прикрепляющиеся к тучным клеткам и вызывающие их активацию, дегрануляцию. Они же являются еще и хемоаттрактантами – привлекают к себе лейкоциты. Тучная клетка выделяет гистамин – провоспалительное вещество. Лейкоциты выделяют: ПГ, ЛТ, АФК, провоспалительный цитокины (TNF, ИЛ1, ИЛ6).

 

Лабораторные методы оценки системы комплемента

 

1. Определение общей активности комплемента по СН50 (норма 60-80 единиц).

2. По показаниям можно определить содержание или активность каждого из компонентов системы комплемента с помощью ИФА.

Иммунологические реакции второго поколения

 

Среди них выделяют РСК и реакцию иммунного лизиса.

 

Реакция иммунного лизиса

Принцип реакции иммунного лизиса: при любом взаимодействии АГ и специфических АТ в среде, где присутствует сложная система сывороточных белков, называемая комплементом, происходит обязательное связывание комплемента, что феноменологически проявляется уменьшением содержания свободного комплемента в среде и лизисом АГ, если последний является клеткой. Такой вариант реакции называется реакцией иммунного лизиса. Если АГ неклеточный (вещество), то хотя связывание комплемента происходит, и количество его уменьшается в среде, видимых изменений не происходит.

Обязательным неспецифическим условием реакции иммунного лизиса является присутствие комплемента в достаточном количестве. Чаще всего в качестве комплемента используют сыворотку крови морской свинки, которая содержит большое количество комплемента. В отдельных случаях применяют кровь кролика, человека (IV).

 

АГ	АТ	Неспецифические условия	Феномен	Технические варианты	Примеры
Клеточ-ный	Ig A, M, G (цитолизи-ны)	Наличие комплемента	Лизис АГ клеточного характера	Ин виво     Ин витро: в жидкой фазе   В лунках планшета     Ин витро в геле	Реакция Исаева-Пфайфера для идентификации холерного вибриона (исследуема культура вибриона + диагностическая сыворотка вводится в брюшную полость морской свинки) Учет под микроскопом по цитолизу вибриона   Реакция гемолиза: исследуемые эритроциты + сыворотка, содержащая АТ к эритроцитам + комплемент. Положительная реакция – «лаковая» кровь.   Определение HLA АГ (лимфоцитов): исследуемые лимфоциты+ диагностические сыворотки+ комплемент + эозин. Учет реакции микроскопический.   Реакция Йерне для определения АТ-продуцирующих клеток в эксперименте. Реакция радиального гемолиза для диагностики краснухи. Эритроциты, сенсибилизированные вирусными АГ, и комплемент вводят в гелевую среду, исследуемую сыворотку вносят в лунки в толщу агара, появляются зоны гемолиза

 

Реакцию радиального гемолиза ставят в лунках геля из агара, содержащего ЭБ и комплемент. После внесения в лунки геля гемолитической сыворотки (АТ против ЭБ) вокруг них в результате радиальной диффузии АТ, образуется зона гемолиза. Таким образом, можно определить активность комплемента и гемолитической сыворотки, а также АТ в сыворотке крови у больных гриппом, краснухой, клещевым энцефалитом. Для этого на эритроцитах адсорбируют соответствующие АГ вируса, а в лунки геля, содержащего данные эритроциты, добавляют сыворотку крови больного. Противовирусные антитела (АТ) взаимодействуют с вирусными антигенами, адсорбированными на эритроцитах, после него к этому комплексу присоединяются компоненты комплемента, вызывая гемолиз. Например, Ig G против вируса краснухи обнаруживают по лизису эритроцитов, связанных с антигеном вируса краснухи и суспендированных с комплементом в агарозном геле.