Методы диагностики гельминтозов.

Методы и оборудование необходимое для подтверждения диагноза при гельминтозных заболеваниях. Для вас наибольшее значение имеют три метода.

1. Гельминтоскопкя - обнаружение либо самого гельминта, либо его фрагменты.

2.   Гельминтоовоскопия - имеет два направления: методы осаждения яиц последовательными промы­ваниями (метод последовательных смывов) и флотационные методы, основанные на всплывании яиц на поверхность жидкости.

3. Гельминтоларвоскопические методы - метод Бермана-Орлова - выделение личинок.

Метод последовательных промываний - чаще всего используется при диагностике трематодозов или мелких гельминтов и личинок. Оборудование:

1. Ступка керамическая (можно использовать банку и ложку)

2. Стаканчик цилиндрический - 100-150 мл (или детское питание)

3. Марля 12X12 или бинт для фильтрования

4. Воронка

5. Колба с водой водопроводной

6. Просгоквашница

7. Смотреть либо на большом стекле, либо в чашке Петри

Берем 5 г фекалий (чайную ложку), помещаем в ступку и заливаем 10 кратным количеством воды и растираем при помощи пестика. Берем воронку с марлей и фильтруем в стакан и оставляем, пока не поя-в1гться осадок, сливаем надосадочную жидкость и добавляем еще воды, размешиваем и т.д. (раз 5), затем осадок переминаем па отекло и смотрим под микроскопом, Флотационные методы (эти же методы используются в протозоологии для концентрации ооцист кокцидий) Метод Котельникова и метод Фюллеборна.

Метод Котельникова - использует насыщенный раствор аммиачной селитры (удобрение) - 1.5 кг селитры + 1 л воды. Растворение идет с забором тепла, поэтому раствор становится ледяной. Для лучшего растворения раствор нужно слегка подогреть, (но не кипятить) помешивая, а затем профильтровать (иначе будет кристаллизоваться).

Метод Фюллеборна - использует насыщенный раствор обычной соли - 400 г соли + 1 л воды. Кипя­тить нужно до появления пленки (налет), затем профильтровать.

Берем 5 г фекалий в ступку (оборудование то же самое - стаканчики не цилиндрические, а кониче­ские - 50 мл можно колбу) - заливаем 30-50 мл раствора, растираем и фильтруем в колбу и оставляем на 1 5 мин, затем специальной петлей собираем не менее 3 раз жидкость с самой поверхности. Этим методом мож­но найти яйца аскарид и других трематод, которые мелкие.

Недостатки - смотреть надо сразу, иначе будет сплошной кристалл.

Метод Дарлинга - более сложный, но зато лучше. Состоит из 2 этапов.

1. осаждение

2. флотация

Дополнительно нужно центрифуга и пробирки.

Жидкость Дарлинга - насыщенный раствор соли (Фюллеборн) и развести 1:1 глицерином. Жид­кость Дарлинга щадит оболочку яйца.

МЕТОДЫ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ ГЕЛЬМИНТОВ

Прижизненной диагностики.

Исследование фекалий, кровь, секреты, ткани.

Методы: гельминтомакроскопии (гельминтоскопия)/ гельминтомикроскопии обнаружение яиц и личинок с помощью микроскопа.

Гельминтоовоскопия яиц, Гельминтолярвоскопия личинок.

Гельминтоовоскопия

Осаждением - +10 воды размешать и процедить и отстаивать 10 мин, затем сливают верхнюю жидкость и добавляют новой. >> микроскопия

Флотацией основано на всплывании яиц в насыщенных р-рах солей. Метод Фюллеборна, мтод Калантбян (р-р азотнокислого Na).

Комбинированные Метод Дарлинга центрифугирование смеси, затем добавляют флотационную ж-ть из глицерина и NaCl. Метод Щербовича (флотац-я ж-ть сернокислая магнезия или гипосульфит Na).

  Гельминтолярвоскопия

 Основаны на смывании личинок нематод с поверхности фекалий и на способности личинок активно выползать из толщи фекалий в воду (теплую).

Метод Вайда фекалии овец на часовое стекло с теплой водой на 5-10 мин, переворачивают в это время фекалии 1-2 раза а затем их удаляют. Жидкость микроскопируют.

Метод Щербовича пробу фекалий КРС 10 г в марлевый узелок и в стакан с водой на 3-5 час. Предварительно в стакан помещают предметное стекло, чтобы узелок не опускался на дно стакана. Осадок на часовое стекло микроскопия.

Проба Ветцеля-Орлова аппарат из стеклянной воронки на узкий конец которой надевают кусоче резинового шланга 10см а свободный конец зажимают зажимом. Заполняют водой 38оС и запускают в верхнюю часть пробу фекалий (10г), помещают на мет сито или марлю. Спустя время (3-5 часов) зажим снимают, 5-10 мл жидкости в центрифужную пробирку и центрифугируют, затем верхний слой сливают, а осадок исследуют под микроскопом.

Метод культивирования личинок. Оставляют под стеклом увлажняя на 10-12 ч. А затем по Ветцеля-Орлова.

Фасциолез жвачных.

Хроническое заб-е, сменяется понос запором, истощение, желтуха, анемия, сухостью и выпадением шерсти, отеками подчелюстного пространства. Также болеют козы, олени, свиньи, лошади, кролики, зайцы, речные бобры, человек. Возб. Fasciola hepatica и F.gigantica локализуются в желчных ходах печени. Тело коричневое листочковидной формы 30мм х 12 мм. На переднем конце вырост хоботок, позади идут плечики и сужаетсяк хвостовому закругленному концу. В передней трети тела тегумент усеян мелкими шипиками. Ротовая присоска и брюшная сближены размещаясь на хоботке. Ротовая присоска меньше, до 1мм; брюшная до 1,6мм. Глотка длиннее пищевода. От кишечных стволов латерально отходят слепо оканчивающиеся боковые выросты. Экскреторные каналы вдоль средней линии тела, от них отходят боковые ответвления. Семенники ветвящиеся, располагаются в средней части тела. От них отходят семяпроводы сливающиеся в семяизвергательный канал в области брюшной присоски. Бурса овальной формы содержит искривленный циррус. Яичник ветвистый в форме оленьего рога, располагается слева от средней линии тела, впереди семенника. Желточники занимают боковые поля и хвостовую часть паразита. Выводные протоки желточников сливаются в крупный желточный резервуар впереди семенников. Тельце Мелиса располагается у переднего края желточного резервуара. Петли матки собраны в клубок в виде розетки. Отверстие матки открывется впереди брюшной присоски. В матке огромное кол-во яиц. Яйца крупные, размером 0,12 х0,07 мм, овальной формы, лимонно-желтого цвета, на переднем полюсе крышечка, а на заднем маленький штифтик. У F.gigantica более крупное тело, боковые стороны его параллельны. 32-75мм х 5-12мм. Передний конец постепенно переходит в тело не образуя плечиков и хоботка.

Цикл развития: развитие с участием дефинитивного и промежуточного хозяина (водный моллюск малый прудовик). Яйца с фекалиями на стадии зародышевой клетки>>мелкие пресноводные водоемы, лужи>>через 2-3 недели формируется мирацидий, вылупляющийся из яйца (0,15мм) густо покрыт ресничками>>прикрепляется к телу моллюска>>теряет реснички и вбуравливается в тело моллюска>>проникает в печень моллюска>>становится неподвижным и через 1 нед превращается в спороцисту (тело веретеновидной формы с тупо закругленными концами, Полость тела спороцисты заполнена зародышевыми клетками из которых формируются редии)>>Редии (червевидные до 1,0 мм, заполнены зародышевыми клетками, имеется кишечник и родильное отверстие)разрывают оболочку спороцисты и вселяются в печень моллюска>> образуются дочерни редии>>церкарии активно выходят в воду (срок развития не менее 2,5 мес). Церкарий состоит из тела (напоминает взрослую трематоду) и хвоста (0,5мм)>>плавая в воде прикрепляется к растению, соломинке>>теряет хвост и выделяет секрет цистогенных желез>>инцистируется Адолескарий. >>> Попадает в ЖКТ дефинитивного хозяина>> растворяется циста>>в 12перстной к-ке мигрирует в печень Гематогенным путем или в Брюшную полость а из нее в печень. В печени в половозрелую форму мариту (у овец паразитируют до3 лет, у КРС до 10 лет). Попадая в другие ткани погибают и покрываются соед. тканью.

Лечение: гексихол (овцам 0,2г/кг; КРС 0,3г/кг однократно), политрем, битионол.