Допустимая концентрация сперматозоидов в различной по густоте сперме

Концентрация миллиард в 1 мл:

Баран: 1

Бык 0,7

Хряк 0,1

Жеребец 0,15

 

Определение концентрации сперматозоидов.

Концентрацию определяют с помощью ФЭК, с пом щетной камеры Горяева, с пом оптических стандартов

 

С пом щетной камеры Горяева. Эякулят разбавляют в меланжерах. Сперму быка в 100 р, барана в 200р, хряка и жеребца в 20р. Заполняют камеру Горяева, микроскопируют. Подсчет ведут в 5 больших квадратах. Расчет производится по формуле: С=Н/100, где С –концентрация спермиев, Н – число подсчитанных сперматозоитов, 100 – степень разбавлениея(константа)

 

Определение процента сперматозоитов.

 

 

23.Определение % патологических форм

Анализ проводят 3-4 раза в год или при резком ухудшении качества спермы.

Для проведения метода необходимо развести сперму 1% NaCl:

Для быка в 10-15 раз

Для барана в 20 раз

Для жеребца и хряка в 2-3 раза

Делают мазок разбавленной спермой на предметном стекле, окрашивают по Романовскома-Гимзе. Считают отдельно патологические и нормальные формы спермиев так, чтобы общее их количество было не менее 500 шт.

Расчет производят по формуле: П=(N*100)/500, где П - % пат форм спермиев

N – количество подсчитанных форм.

 

24. Определение % живых сперматозоидов.

Метод основан на неспособности живых спермиев окрашиваться лабораторными красителями.

Делаем мазок из окрашенных эозином спермиев, микроскопируем. Считаем количество мертвых и живых до 500 штук. Расчет делаем по формуле: П = (ж-100)/500, где П- % живых, Ж-кол-во живых неокрашенных спермиев

 

Типы движения сперматозоидов

Может быть: прямолинейно-поступательное(нормальное), манежное(по кругу), колеблющееся(шевелятся, но остаются на месте), отсутствие движения(акиноспермия)

Активность оценивают визуально при микроскопии. Оценку проводят по 10 бальной шкале. В густой сперме барана могут быть вихреобразные движения.

 

Тератоспермия

ТЕРАТОСПЕРМИЯ, патол. изменения спермиев. Могут быть врождёнными (при крипторхизме, гермафродитизме) и приобретёнными (при нарушении функции половых желез, воспалит. процессах в половых органах, отравлениях ядами, воздействии радиоактивных веществ и др.). Т. может быть первичной (изменения в спермиях в процессе сперматогенеза) и вторичной (изменения взрелых мужских половых клетках). Вторичная Т. может возникать в самом организме и in vitro (воздействие факторов внешней среды). При первичной Т. наблюдают появление карликовых или гигантских спермиев с изменённой формой головки, шейки и хвоста, при вторичной — перегибы, скручивания и переломы хвоста, нарушения оболочки половой клетки, отрывы чехлика головки, самой головки, части хвоста, наличие протоплазматич. капли, агглютинацию спермиев и др. отклонения от нормы.

 

Определение резистентности сперматозоидов.

Резистентность обуславливается наличием липопротеидной оболочки.

Резистентность определяется путем добавления к сперме 1% р-ра NaCl, который вызывает набухание липопротеидной оболочки спермиев, после чего она смывается.

Под резистентностью понимают такое количество NaCl, которое необходимо добавлять к 1мл спермы, чтобы прекратились прямолинейно-поступательные движения спермиев.

1. Титрометрический метод. Производят последовательное разбавление спермы, при этом на каждом этапе производят микроскопию. Данную процедуру делают до тех пор, пока не погибнут все сперматозоиты.

2.Экспресс-метод

Производят последовательное трехкратное(1:500,1:1000,1:2000) разбавление спермы в кюветах.

 

Определение дыхания сперматозоидов.

В основе метода лежит способность сперматозоидов при недостатке кислорода обесцвечивать раствор метиленового синего. Чем больше в сперме живых сперматозоидов и чем больше их дыхание, тем быстрее происходит обесцвечивание раствора. В основе данной реакции лежит анаэробный гликолиз.

Сперму с красителем набирают в стеклянный капилляр и ждут изменения цвета.

 

Аспермия, асперметизм, акиноспермия

Аспермия развивается при симптоматическом бесплодии. Следует расценивать ее как симптом нарушения сперматогенеза или непроходимости половых путей. Врожденная аспермия наблюдается у крипторхов, а так же как симптом инфантилизма и недостаточности эндокринной системы. Симптоматическая аспермия наблюдается при хронических и острых заболеваниях организма, особенно если они сопровождаются повышением температуры тела. Иногда аспермия является симптомом нервного расстройства и понижением нервно-мышечного тонуса.

Асперматизм (от греч. а — отрицательная частица и sperma — семя) — состояние, при котором семяизвержения при половом акте не наступает. Образование семенной жидкости и сперматозоидов при асперматизме не нарушено.

Акиноспермия - полная неподвижность живых сперматозоидов в сперме и неспособность их к оплодотворению. Причины этого явления изучены недостаточно. Предположительно, ими могут быть заболевания половых желез (чаще всего воспалительные), гормональная недостаточность и др.; в лабораторных условиях - резкое переохлаждение спермы при хранении, освещение её прямыми солнечными лучами, случайное попадание в пробирку со спермой химических веществ и др

 

Значение компонентов, входящих в разбавители.

Натрий лимоннокислый – для поддержания рН

Желток – предотвращение холодового удара

Антибиотики – против м/о

Трилон и Трилон Б – консерванты

Глицерин – предотвращает кристаллизацию воды

Глюкоза, фруктоза, лактоза, сахароза – снижают электропроводимость раствора, предупреждая агглютинацию спермиев. Глюкозу и фруктозу спермии могут исп-ть как источник энергии

 

31. Состав разбавителей для хранения спермы при t=0

Дистиллированная вода, глюкоза, нарий лимоннокислый, кислота лимонная, желток куриного яйца, стрептоцид белый, пенициллин, стрептомицин

 

32. Состав разбавителей для хранения спермы при t=+16

Вода дист, глюкоза, фруктоза, лактоза, цитрат натрия, натрий глютаминокислый, гидрокарбонат натрия, сульфат аммония, трилон Б, желток куриного яйца, спермосан-3

 

Состав сред для замораживания спермы

Вода дист, лактоза, 11% раствор лактозы, фруктоза, раффиноза пятиводная, натрий лимоннокислый, натрий двууглекислый, магний сернокислый, хелатон-3, ксилит, трис-оксиметил-аминометан, декстрин, желток куриных яиц, глицерин, спермосан

 

Технология замораживания спермы.

После разбавления сперму выдерживают при температуре 2-5’С в течении 2-6 часов. Потом берут специальную пластинку с лунками, охлаждают ее до прекращения кипения жидкого азота. Далее с помощью шприца наносят сперму на лунки, и пластину помещают на 1-2 минуты в жидкий азот. После этого, вынув пластину, замороженные гранулы собирают в пластмассовые коробочки и хранят в жидком азоте.

 

Способы хранения спермы в замороженном состоянии.

Хранят сперму в гранулированном виде в пластмассовых коробочках, помещенных в жидкий азот. В Польше гранулы покрывают желатиновыми капсулами. Во Франции сперму замораживают в «соломинках», которые одновременно служат инструментом для осеменения коров.

 

39. Степень разбавления спермы и содержание в дозе сперматозоидов

Сперму быка обычно разбавляют в 10 раз(1:9) или в 15(1:14). В некоторых странах разбавляют сперму 1:20:25:50. Отдельные специалисты разбавляют сперму быка 1:100 и даже 1:200. Одни авторы считают, что в дозе осеменения одной коровы должно быть минимум 10-15млн живых сперматозоидов, другие – 20-25млн.

 

Транспортировка спермы

Сперму перевозят в термосах. Необходимо предохранять сперму от колебаний температуры. Так же нужно следить за целостностью термосов. Замороженную сперму перевозят в сосудах Дьюара. Их необходимо тщательно закреплять. К каждой партии спермы прикладывают ордер, в котором указывают дату и часы получения спермы, кличку производителя, дозу и оценку спермы.

 

Осеменение коров, методы.

Визоцервикальный – под контролем глаза через влагалище

Маноцервикальный – шейку матки фиксируют через прямую кишку

 

Осеменение свиней, методы

По ВИЖ(нефракционный)

ПО Квасницкому(фракционный) – 1й баллончик – со спермой, 2й – с разбавителем, 3й – с воздухом

 

Осеменение овец, методы

Визоцервикальный