Тема: днк-содержащие вирусы: адено-, герпес-вирусы. Рнк-содержащие вирусы семейств ортомиксо- и парамиксовирусов. Вирус краснухи.

Цель занятия: изучить свойства и классификацию ДНК- и РНК-содержащих вирусов. Выяснить источник и патогенез данных инфекций. Познакомиться с лабораторной диагностикой и профилактикой заболеваний, вызываемых ДНК- и РНК-содержащими вирусами.   

План занятия.

1. Вирусы, вызывающие острые респираторные заболевания (ОРЗ).

2. Семейство аденовирусов. Свойства, взаимодействие с клеткой, источник и патогенез аденовирусной инфекции.

3. Профилактика и лабораторная диагностика аденовирусной инфекции.

4. Свойства герпесвирусов. Классификация, вызываемые заболевания. Причины рецидивов. Лабораторная диагностика и профилактика герпесвирусной инфекции.

5. Семейство ортомиксовирусов и его представители. Вирус гриппа А, его свойства, строение, источник инфекции, пути распространения, патогенез, причины изменчивости.

6. Вирусы гриппа В и С. Лабораторная диагностика и профилактика гриппа. Ускоренные методы диагностики.

7. Вирус парагриппа, его свойства, пути передачи, патогенез заболевания. Лабораторная диагностика.

8. Вирус кори, его свойства, характеристика заболевания, диагностика, профилактика.

9. Вирус паротита, его свойства, характеристика заболевания, диагностика, профилактика.

10. Вирус краснухи, его свойства, характеристика заболевания. Краснуха и уродства новорожденных.

 

Задания для выполнения лабораторной работы.

1. Отметить основные этапы и характерные моменты в действии на клетку ДНК-содержащих вирусов.

2. Записать классификацию вирусов, вызывающих острые респираторные заболевания.

3. Изучить  и провести реакцию нейтрализации вируса гриппа (РН).

При смешивании в пробирке вируса и сыворотки, содержащей специфические антитела, компоненты системы соединяются друг с другом, в результате чего вирус теряет свою инфекционность. Это обнаруживается при введении смеси в чувствительную биологическую систему (животные, куриный эмбрион, клеточная культура). РН может быть использована для обнаружения вируса и изучения его антигенной структуры.

 

Таблица 15

Схема идентификации вируса гриппа в РН

Ингредиенты, мл	Номер пробирки
	1	2	3	Контроль
Исследуемый материал	0,2	0,2	0,2	0,5
Сыворотка к вирусу:                          гриппа А	0,3	-	-	-
гриппа В	-	0,3	-	-
гриппа С	-	-	0,3	-
Инкубация 2 ч при 37˚С, затем заражение клеточных культур
Результат	Клетки нормальной морфологии (ЦПД-)	Клетки разрушены (ЦПД+)	Клетки разрушены (ЦПД+)	Клетки разрушены (ЦПД+)

Результат РН учитывают по появлению или отсутствию цитопатического действия (ЦПД). Последнее будет отсутствовать только в пробирке, где вирус соответствует иммунной сыворотке.

Вопросы для обсуждения.

1. Классификация вирусов, вызывающих острые респираторные заболевания. 2. Строение и свойства аденовирусов. 3. Особенности взаимодействия вирусов с клеткой. 4. Диагностика и профилактика аденовирусной инфекции. 5. Строение и свойства герпесвирусов. 6. Классификация заболеваний, вызываемых герпесвирусами. 7. Диагностика и профилактика инфекций, вызываемых герпесвирусами. 8. Строение и свойства и особенности вируса гриппа А. 9. Пути передачи, источники инфекции и патогенез гриппа типа А. 10. Строение и свойства вирусов гриппа В и С. 11. Лабораторная диагностика и профилактика гриппа. 12. Ускоренные методы диагностики гриппа.      13. Вирус кори: строение, свойства, клиника, диагностика, профилактика. 14. Вирус паротита: строение, свойства, клиника, диагностика, профилактика. 15. Вирус краснухи: строение, свойства, клиника, диагностика, профилактика. 16. Краснуха и уродства новорожденных.

Дополнительный материал.

 

Методы экспресс-диагностики позволяют обнаружить вирус непосредственно в пробах, взятых от больного, без предварительного накопления возбудителя в чувствительных системах (в культуре клеток, курином эмбрионе, организме лабораторных животных). Ответ можно получить через несколько часов после взятия клинического материала. К методам экспресс-диагностики относятся:

1. Электронная микроскопия (ЭМ) тканевых экстрактов, фекалий, носоглоточных смывов, везикулярных жидкостей с целью обнаружения характерных вирусных частиц.

2. Иммуноэлектронная микроскопия (ИЭМ), при которой исследуемый материал обрабатывается иммунной сывороткой, что позволяет выявить возбудителя и одновременно идентифицировать его.

3. Иммунофлюоресценция, или метод флюоресцирующих антител (МФА), позволяет выявить вирусный антиген в клетках, полученных из пораженных тканей больного, путем обработки их флюоресцирующими антителами. В случае положительного результата при просмотре препарата в люминесцентном микроскопе будут видны светящиеся клетки.

4. Иммуноферментный и радиоиммунный методы (ИФМ и РИМ) являются высокочувствительными и в настоящее время широко применяются в вирусологии.

Таблица 16

Методы экспресс-диагностики наиболее распространенных вирусных инфекций

Инфекционное заболевание	Материал для исследования	Срок взятия материала	Метод экспресс-диагностики
Простой герпес	Соскоб из везикул	1-2-й дни после появления сыпи	Микроскопия окрашенных мазков-отпечатков,МФА
Ветряная оспа, опоясывающий лишай, цитомегаловирусная инфекция	Везикулы	1-7-й день после появления сыпи	ЭМ, микроскопия окрашенных мазков-отпечатков
Аденовирусная инфекция	Мазки-отпечатки слизистой оболочки носа	Последние 1-2 дня инкубационного периода, 7 дней болезни	Микроскопия окрашенных мазков. МФА
Гепатит А	Фекалии	Первые 7-10 дней болезни	ИЭМ, ИФМ, РИМ
Гепатит В	Кровь	В течение всего периода болезни	ИФМ, РИМ, реакция преципитации в геле
Ротавирусный гастроэнтерит	Фекалии	Первые 3-5 дней болезни	ЭМ, ИЭМ, ИФМ, РИМ
Грипп	Мазки-отпечатки слизистой оболочки носа	Последние 2 дня инкубационного периода, первые 5 дней болезни	Микроскопия окрашенных препаратов, МФА
ОРЗ	Мазки-отпечатки слизистой носа	Первые 3-5 дней болезни	Микроскопия окрашенных препаратов, МФА
Бешенство	Мозг погибших человека и животных	Как можно раньше смерти	Микроскопия окрашенных мазков-отпечатков, МФА

Примечание: ЭМ – электронная микроскопия; МФА – метод флюоресценции антител; ИЭМ – иммуноэлектронная микроскопия; ИФМ – иммуноферментный метод; РИМ – радиоиммунный метод.

Оформление лабораторной тетради.

 

Записать классификацию вирусов, вызывающих ОРЗ; записать схему проведения РН вируса гриппа и результат реакции; записать основные методы экспересс-диагностики наиболее распространенных вирусных инфекций.

 

  ЗАНЯТИЕ № 19