Распределительная хроматография.

Основана на использовании различий в растворимости распределяемого вещества в двух контактирующих несмешивающихся жидких фазах. Обе фазы – ПФ и НФ – жидкие фазы. При перемещении жидкой ПФ вдоль жидкой НФ хроматографируемые вещества непрерывно перераспределяются между обеими фазами. К распределительной относится бумажная.

Бумажная хроматография (хроматография на бумаге).

1. Нормальнофазная (ПФ-неполярный органический растворитель, НФ- вода)

2. Обращеннофазная (ПФ-вода, НФ – неполярный органический растворитель)

Это жидкость - жидкостная распределительная хроматография.

Требования к хроматографической бумаге:

1. готовится из высококачественных, высоковолокнистых сортов хлопка.

2. однородна по плотности и толщине

3. химически чистая

4. инертна по отношению к ПФ и НФ

Недостатки БХ:

1. процесс разделения зависит от состава и свойств бумаги

2. низкая воспроизводимость результатов

3. очень низкая скорость хроматографирования

Техника выполнения: на полоску хроматографической бумаги на линию старта наносят каплю анализируемого раствора, содержащего смесь разделяемых веществ. После испарения растворителя бумагу ниже линии старта помещают в ПФ, располагая вертикально. Закрывают камеру крышкой и проводят хроматографирование до тех пор, пока ПФ не достигнет обозначенной на бумаге линии фронта растворителя. После бумагу сушат и проводят детектирование пятен и идентификацию компонентов смеси.

Осадочная хроматография.

Сущность метода. Осадочная хроматография основана на использовании химических реакций осаждения разделяемых компонентов смеси с реагентом-осадителем, входящим в состав НФ. Разделение осуществляется вследствие неодинаковой растворимости образующихся соединений, которые переносится подвижной фазы с различной скоростью: менее растворимые вещества переносится с ПФ медленнее, чем более растворимые.

Понятие о ситовой (эксклюзионной) хроматографии. Гель-хроматография.

Метод ситовой хроматографии представляет собой один из вариантов жидкостной распределительный хроматографии. Он основан на использовании в качестве НФ пористых веществ – молекулярных сит, размеры пор которых могут быть больше или меньше размеров частиц разделяемых компонентов. Частицы с размерами, меньшими размеров пор сорбента, проникает вместе с растворителем ПФ в эти поры и могут удерживаться в них, тогда как более крупные частицы не могут проникнуть в поры из-за своих размеров и уносятся с ПФ. Крупные частицы элюируются первыми.

Носитель: гель.

НФ: элюент, находящийся в порах зерен носителя.

ПФ: этот же элюент, протекающий вдоль слоя частиц полимера.

Гели – представляют собой вещества, способные к набуханию и имеющие поры разного размера.

1. Гидрофильные: декстрановые

2. Гидрофобные: полистерольные (стирогель)

Гели:

1. Мягкие (сефадексы)

· малое число поперечных связей

· способны поглощать большие количества растворителя, увеличиваясь в объеме

· фактор емкости равен 3

· невысокая механическая прочность

· малая скорость движения ПФ

· большинство гелей гидрофильны

2. Полужесткие (сополимеры, стирола и дивинилбензола)

· большое число поперечных связей

· фактор емкости 0,8-1,2

· скорость движения ПФ больше, чем для мягких гелей

· предел ситового исключения 2500-410*10⁶

· в основном гидрофобны

3. Жесткие гели (силикагель)

· диаметр пор меняется в узком интервале

· устойчивы термически и химически

· скорость элюирования высока

· фактор емкости 0,8-1,1

· как гидрофильные, так и гидрофобные

Фактор емкости – это отношение объема растворителя внутри геля к объему растворителя вне гранул геля.

Предел ситового исключения – величина молекулярной массы вещества, выше которой частицы не способны проникать в поры геля.

Растворители:

1. вода

2. толуол

3. хлороформ

4. диметилформамид