Основные этапы продуктивной вирусной инфекции:

Основные этапы продуктивной вирусной инфекции:

1. Адсорбция вируса на поверхности клетки.

2. Проникновение вируса в клетку.

3. Депротеинизация вириона.

4. Экспрессия вирусного генома.

5. Морфогенез.

6. Выход вирионов из клетки.

Первый, второй и третий этапы лежат в основе подготовки вируса к процессам репродукции, в которых в соответствии с программой, заложенной в геноме вируса, происходят процессы воспроизведения нового поколения вирусов и выхода вирусов из клетки.

Этап. Адсорбция вируса на поверхности клетки

На первом этапе адсорбция носит неспецифический характер, она обусловлена силой ионного притяжения между вирусом и клеткой. Следующая фаза специфическая, осуществляется за счет специфических рецепторов клетки и прикрепительных белков на поверхности вируса – у простых вирусов и белков гликопротеинов – у сложных вирусов.

Выход вирионов из клетки.

Репродукция вирусов колеблется от 6 до 8 часов и заканчивается выходом вируса из клетки, который может проходить следующими путями:

Взрывной путь – чаще происходит у простых вирусов. При этом из погибающей клетки одновременно (взрывом) выходит большое число вирионов.

Почкование – чаще происходит у сложных вирусов. Сформировавшаяся почка отделяется от клетки в виде сложного вируса. При этом клетка длительное время не погибает и продуцирует новое поколение вирусов.

 

Дефектные вирусы.

  Дефектные вирусы образуются при взаимодействии вируса с клеткой. Дефектным геномом называется любой вирусный геном, в котором один или несколько генов, утратили функцию, которая необходима для осуществления процессов автономной репликации вируса. Для процессов репликации дефектному вирусу необходима помощь другого вирусного генома. Выделяют следующие группы дефектных вирусов:

1.Дефектные геномы, зависящие от вируса помощника – представлены дефектными интерферирующими вирусами – ДИ-частицы. Это субгеномные деляционные мутанты, которые потеряли большую часть генома родительского вируса. Для того чтобы ДИ-частица восстановила утраченную функцию необходимо одновременное заражение родственным вирусом помощником.

2.Дефектные геномы, интегрированные в хромосому клетки хозяина. Интегрировать свой геном в клетку хозяина могут не только вирусы с полным геномом, но и вирусы, содержащие дефектный геном. Как правило это «молчащие» дефектные гены. Интегрированные дефектные геномы могут инактивировать гены клетки хозяина или способствовать их экспрессии, придавать новые генетические свойства, устранять или перемещать регуляторные элементы. Многие РНК онкогенные вирусы – это дефектные вирусы, которые несут клеточные онкогены и зависят от вируса-помощника.

3.Вирусы сателлиты. В отличие от ДИ-частиц, возникновение вирусов сателлитов не связано с делецией генов вируса-помощника. Сателлит при репликации полностью зависит от одновременного заражения вирусом-помощником. Примером может служить дельта-вирус – помощник вируса гепатита В, аденассоциированные вирусы - помощники аденовирусов.

4.Псевдовирионы.  Это  вирусные частицы, которые содержат  вместо геномной НК вируса, НК клеток хозяина.

5.Условно-дефектные геномы. Это мутантные геномы, дефективные только в определенных условиях: ts – мутанты температурочувствительные; hr – мутанты по спектру хозяев.

 

 Цитопатогенность вирусов.

 У вирусов выявлено два механизма  вирусной  цитопатогенности:

- прямые – зависят от самого вируса;

- опосредованные – требуют участия эффекторов иммунитета.

Вирусы способны размножаться только в живых клетках. По чувствительности к вирусу клетки делятся на:

- пермиссивные – поддерживающие инфекцию;

- непермиссивные – не поддерживающие инфекцию;

- полупермиссивные – такие клетки способны заражаться вирусом и поддерживать персистирующую инфекцию, не производя зрелых вирионов.

Цитолитическая инфекция – клетка, пораженная вирусом, погибает, лизируется после первого цикла репродукции, при выходе вирионов из клетки.

Нецитолитическая инфекция – пораженная вирусом клетка способна функционировать длительное время, при этом репродукция вирусов происходит в течение нескольких циклов. Вирус вызывает цитолитическое действие на клетку, это проявляется:

- в образовании многоядерных гигантских клеток, которые образуются при слиянии мембран нескольких соседних клеток;

- в появлении внутриклеточных включений в пораженной вирусом клетке;

- проявление латентной инфекции – регистрируются функциональные нарушения в клетке, их видимое проявление отсутствует;

- вирусная онкогенная трансформация – результат цитопатического действия.

 

ВИРУС ГРИППА

Грипп – острая инфекционная болезнь вирусной этиологии, для которой характерен аспирационный механизм передачи, интоксикация и поражение респираторного тракта.

Этиология. Возбудитель гриппа относится к роду Influenzavirus, семейству Orthomyxoviridae, типам А, В, С. Все представители этого семейства являются возбудителями гриппа.

Вирион вируса округлой формы, размером 80  – 100 нм. Основу вируса составляет (-)РНК, расположенная в сердцевине и покрытая суперкапсидом. РНК вируса однонитевая, фрагментированная, состоящая из 8 фрагментов. 

Поверхностные белки представлены гемагглютинином и нейраминидазой.

а) гемагглютинин (H) - распознает клеточный рецептор; определяет эпидемиологические свойства вируса.

б) нейраминидаза (N) – принимает участие в процессах распространения вирусов; определяет эпидемиологические свойства вируса совместно с гемагглютинином.

Культивирование. Наиболее удобной моделью для культивирования вируса гриппа являются куриные эмбрионы.  Культуры клеток наиболее чувствительные к вирусу гриппа: первично трипсинизированные культуры клеток почек эмбриона человека и некоторых животных (репродукция в них сопровождается слабовыраженным цитопатическим действием).

  Резистентность. Вирус малоустойчив во внешней среде. Сохраняет свою жизнеспособность в течение 1 суток при комнатной температуре, инфекционная активность сохраняется длительное время при температуре хранения – 70⁰С.

      Эпидемиология. Грипп – антропонозная инфекция.

 Источником инфекции является больной человек с явными или стертыми формами болезни. 

Основной путь передачи возбудителя воздушно – капельный, реализуется при кашле, чихании, разговоре. Возможна контактная передача возбудителя.

Грипп высококонтагиозное заболевание, протекающее в виде эпидемии, переходящей в пандемические циклы.

Естественная восприимчивость людей высокая.

Этиопатогенез.   Входными воротами вируса гриппа является эпителий слизистых оболочек дыхательных путем (гортань, трахея, бронхи). Чем мельче вирус по размеру, тем глубже он проникает. Самые мелкие частицы достигают бронхиол и альвеол. Вирус гриппа обладает эпителиотропностью, размножается в клетках однослойного многоядерного эпителия, реснитчатых и бокаловидных клетках слизистой оболочки верхних дыхательных путей.

Воздействие нейраминидазы вируса приводит к некрозу   клеточного слоя, что соответствует инкубационному периоду гриппа, во время которого вирус  размножается внутри эпителиальных клеток и накапливается. Все  процессы приводят к воспалительным изменениям слизистой оболочки.

В случае преодоления защитных барьеров вирус проникает в кровь, возникает вирусемия. Собственных токсинов вирус не выделяет, поэтому процессы интоксикации при гриппе обусловлены накоплением эндогенных биологических веществ (гистамина, серотонина, простагландинов, кинина), которые образуются при распаде клеток. Главное звено в патогенезе гриппа это поражение сосудистой и нервной систем.

Генерализация процесса, наступившая в результате вирусемии, приводит к тому, что вирусы попадают в сердечно-сосудистую систему, ЦНС, мышцы, почки и другие органы. Возникшие нарушения гемодинамики с явлениями отека в различных отделах ткани мозга ведут к расстройствам деятельности ЦНС, вегетативной нервной системы, сердечно – сосудистой системы, эндокринной системы.

Специфическая профилактика

В России зарегистрированы следующие вакцины:

- живая очищенная противогриппозная вакцина для подростков и взрослых;

- аллантоисная интраназальная вакцина для детей от 3 до 14 лет.

- иннактивированная гриппозная вакцина: в основу состава введен очищенный, инактивированный, концентрированный вирус гриппа А и В. Микробиологическая диагностика:

Первичное исследование материала от больного проводят с обязательным применением 2 методов:

1.ОТ - ПЦР.

2.РИФ.

Подтверждающее тестирование положительных образцов проводят с обязательным использованием 2 методов:

1.ОТ – ПЦР.

2. Вирусологическое исследование.

3. Иммунохроматографический метод.

4. Серологическая диагностика -  ИФА.

ВИРУС ПАРАГРИППА

Вирус относится к сем. Paramyxoviridae, п \ с Paramyxovirinae, роду Respirovirus.

Структура. Вирус имеет сложное строение и крупные размеры. Это РНК геномный вирус, РНК(-) нитевая, линейная, однонитчатая, нефрагментированная, окруженная капсидом, капсид спиральной симметрии. Имеется суперкапсид. Размер вириона от 100 – 300 нм.

Культивирование. Культивирование проводят в первично трипсинизированных и перевиваемых культурах клеток (Hep 2, Hela, KB).

Антигенное строение. Вирус содержит два самостоятельных антигенных компонента – гемагглютинин (H-антиген) и (N-антиген) – нейраминидаза.

По антигенам вирусных белков различают 4 основных серотипа вирусов парагриппа: ВПГЧ 1, 2,3, 4.

Резистентность. Вирусы неустойчивы к факторам внешней среды. Они проявляют чувствительность к высокой температуре (50⁰С), дезинфицирующим растворам, детергентам. Устойчивы к низким температурам.

Эпидемиология.

Источником инфекции является больной с клинически выраженной или стертой формой болезни. Наибольшую эпидемическую опасность представляют больные в первые 2 – 3 дня болезни.

Механизм передачи - аэрозольный.

Фактор передачи – воздушная среда. Люди высоковосприимчивы к инфекции.

Репродукция. Репродукция вирусов протекает в цитоплазме.

Этиопатогенез. Воздушно-капельным путем вирусы проникают в организм и попадают на слизистые верхних дыхательных путей. Они проникают в эпителиальные клетки носа, гортани и трахеи, где и происходит их первичная репродукция. Этот процесс приводит к разрушению эпителиальных клеток слизистой оболочки и возникновению воспаления. Наблюдается гиперемия и отечность слизистой оболочки. Наиболее частым местом локализации вируса является слизистая гортани, которая воспаляется максимально сильно. В результате возможно возникновение ложного крупа.

Эпидемиология.

Источником инфекции является больной человек или носитель. Вирус начинает выделяться из носоглотки больных за 1-2 дня до начала клинических проявлений и присутствует до 3- 6 суток клинически выраженного заболевания.

Механизм передачи - аэрозольный, воздушно-капельный.

Этиопатогенез. Входными воротами возбудителя являются верхние дыхательные пути. Вирус аэрогенным путем проникает в слизистую верхних дыхательных путей, внедряется в эпителиальные клетки слизистой оболочки носоглотки, что приводит к развитию воспалительного процесса.

Инкубационный период заболевания длится от 3 до 5 дней. При поражении дыхательных путей, чаще у детей, наблюдается распространение воспалительного процесса преимущественно на мелкие бронхи, бронхиолы. Вследствие репродукции вируса происходит некроз эпителиальных клеток бронхов и бронхиол, лимфоидная инфильтрация. Воспалительный процесс прогрессирует. В просвет альвеол выделяется мононуклеарный экссудат. В зависимости от преимущественного поражения различных отделов дыхательной системы выделены следующие клинические формы RS -инфекции: назофарингит, бронхит, бронхиолит, пневмония.

 Материал для исследования: отделяемое носоглотки, ткань легкого, трахеи, бронхов.

1.Вирусоскопический метод основан на регистрации   цитопатического действия - образование синтициев.

2.Индикацию вируса проводят в РН.

3.Серологическая диагностика - ИФА, РИФ.

 

РЕСПИРАТОРНЫЕ КОРОНАВИРУСЫ

Вирусы относятся к семейству Coronaviridae, которое делится на два рода род Coronavirus, род Togavirus.

Структура. Вирус имеет округлую или сферическую форму, размер вириона колеблется от 50 до 200 нм. Сердцевина вируса представляет геномом – это (+)РНК, однонитевая, нефрагментированная.  Нуклеокапсид спирального типа симметрии, окружен  оболочкой, снаружи переходящей в выросты с хрупкой шейкой и массивной головкой – пепломер.

    Репликация. Процессы репликации происходят в цитоплазме.

 Антигенное строение. Антигенные детерминанты расположены на пепломерах.

     Культивирование. Коронавирусы плохо культивируются в лабораторных условиях, что затрудняет их выделение. Отдельные штаммы можно культивировать в культуре ткани трахеи эмбриона человека, другие в культуре ткани кишечника.

     Резистентность. При 56⁰С выживают в течение 10 - 15 мин.

 Эпидемиология. Источником инфекции является больной человек, наиболее опасен в начальный (острый) период заболевания. Путь передачи – воздушно-капельный и фекально-оральный.

Этиопатогенез. Входными воротами являются слизистые верхних дыхательных путей. У детей инфекция распространяется на бронхи и легкие. На фоне катаральных явлений инфекция быстро поражает нижний отдел респираторного тракта с развитием долевой, многоочаговой или сливной пневмонии. Возможно развитие легочного отека. Способность к образованию синтиция приводит к быстрому распространению вируса в ткани.

     При коронавирусной инфекции поражается альвеолярный эпителий. Через неделю развивается пневмония, которая вначале носит очаговый характер, после чего из множества очагов она сливается и превращается в сливную долевую пневмонию и распространяется на легкие, вызывая их поражение. Это приводит к некрозу пораженной ткани и образованию фиброзных рубцов в легких.

 Материал для исследования - отделяемое носоглотки, кровь, мокрота, биоптаты.

1.Основной метод диагностики - ПЦР

2.Серодиагностика – ИФА.

3.Вирусологическое исследование

Специфической профилактики нет.

 

РЕСПИРАТОРНЫЕ АДЕНОВИРУСЫ

Возбудитель относится к семейству Adenoviridae, в состав его входят два рода: род Mastadenovirus (респираторные вирусы), Aviadenovirus.

Структура. Вирион имеет икосаэдрическую форму, его диаметр 70 – 90 нм. Геном представлен ДНК - линейной, двунитевой. Вирион лишен суперкапсидной оболочки. Он состоит из капсида с кубическим типом симметрии.

Культивирование. Аденовирусы, но хорошо размножаются в первично-трипсинизированных и перевиваемых культурах клеток. Для выделения вируса проводят заражение чувствительных клеток перевиваемых линий (HeLa, Hep 1, KP).

Репликация. Все процессы транскрипции и репликации происходят в ядре. Антигенное строение. Выделяют следующие антигены: родоспецифический АГ, группоспецифический АГ, типоспецифический АГ.

    Резистентность. А деновирусы устойчивы к воздействию факторов внешней среды. Инфекционную активность сохраняют в течение 7 дней при 36 ⁰С. Эпидемиология.

Источником инфекции является больной человек с манифестной или латентной формой заболевания, который выделяет вирусы с носоглоточной слизью до 25 дня болезни и более 1, 5 месяцев с фекалиями.

 Механизм передачи – аэрозольный, возможно фекально-оральный. Естественная восприимчивость людей высокая. Инфекция распространена повсеместно. Этиопатогенез. Входными воротами аденовирусной инфекции является эпителий слизистых оболочек верхних дыхательных путей. Вирус локализуется в клетках эпителия. Далее по мере накопления аденовирусы проникают в подслизистую лимфоидную ткань и лимфогенным путем распространяются в региональные лимфатические узлы. В очагах поражения происходит развитие воспалительной реакции, которая сопровождается расширением капилляров слизистой оболочки, гиперплазией подслизистой ткани и образованием инфильтратов. Часто наблюдается синдром интоксикации. Вирусемия и репродукция возбудителя в клетках эпителия и лимфоидной ткани длительная.

Материал для исследования является отделяемое и смывы из носа, зева, задней стенки глотки, испражнения, кровь, секционный материал.

Вирусологическое исследование.

Идентификация - РИФ, ИФА, РИА, РТГА, РН.

Серологическая диагностика.

 

 

ВИРУСЫ, ВОЗБУДИТЕЛИ  ОСТРЫХ

КИШЕЧНЫХ   ИНФЕКЦИЙ (ОКВИ)

 

ЭНТЕРОВИРУСНЫЕ ИНФЕКЦИИ

Энтеровирусные инфекции – это группа инфекционных заболеваний, которая вызывается энтеровирусами и характеризуется преимущественным поражением слизистой ЖКТ. Возбудители  инфекций принадлежат к семейству Picornaviridae, родам: Rhinovirus, Cardiovirus, Apthovirus, Hepatovirus, Enterovirus.

 

Сем. Picornaviridae

Структура. Вирусы имеют небольшие размеры 22 – 30 нм, тип симметрии нуклеокапсида кубический. Геном вируса представлен молекулой однонитевой плюс РНК, несегментированный. Вирион не имеет суперкапсидной оболочки.

Антигенное строение.

- группоспецифический антиген (общий для рода).

 - типоспецифические антигены.

Род   Enterovirus. В этот род входят: полиовирусы (1-3) типов;

вирусы Коксаки А (24 серовара); вирусы  Коксаки В (6 сероваров); вирусы ECHO (34 серовара); неклассицированные  вирусы – энтеровирусы 68 – 72 сероваров.                               

Репродукция. Репродукция вируса происходят в цитоплазме.

Культивирование. Большинство энтеровирусов хорошо репродуцируется в первичных и перевиваемых культурах клеток тканей человека и сопровождается выраженным цитопатическим эффектом.

Эпидемиология.

Источником инфекции является – больной человек (манифестной и инаппарантной формами), или носитель. Заболевание контагиозно. Наиболее интенсивно возбудитель выделяется в первые дни болезни. После перенесенной инфекции формируется вирусоносительство.

Механизм передачи – фекально-оральный, путь передачи – пищевой.

Факторы передачи – овощи,  грязные руки, игрушки, предметы внешней среды. Возможна вертикальная  передача   энтеровирусов. Редко отмечается воздушно-капельный путь передачи. Естественная восприимчивость высокая. Резистентность. Прогревание при 56 ⁰ С приводит к инактивации вируса. При минусовых температурах энтеровирусы не теряют инфекционности. Этиопатогенез. Входными воротами возбудителя служат слизистые оболочки желудочно-кишечного тракта и верхних дыхательных путей, где развиваются местные воспалительные реакции. Первичная репродукция происходит в эпителиальных клетках слизистой, клетках лимфоидной ткани глоточного кольца и в лимфатических структурах тонкого кишечника. Нахождение вируса в месте входных ворот сопровождается бессимптомным течением инфекции. Далее происходит проникновение вируса в кровь, что приводит к первичной вирусемии и генерализации процесса. С током крови вирус разносится в различные органы. Место дальнейшей локализации вируса зависит от его тропизма. Вирус размножается в органах, оттуда поступает в кровь, вызывая вторичную волну вирусемии. Течение инфекции носит волнообразный характер.

Вирусы Коксаки поражают паренхиматозные органы, у новорожденных вызывают пневмонию; обладая кардиотропностью вызывают миокардиты, перикардиты.

Вирусы ECHO -тропизм к лимфатической ткани, ЦНС, пищеварительной системе.

Вирусы Коксаки А, В, ECHO – вызывают ОРВИ, менингиты.

Серотип 71 вируса ECHO  вызывает ОРЗ, поражает ЦНС, лимфатическую и пищеварительную системы.

Серотип 70 вируса ECHO  вызывает геморрагические конъюнктивиты, поражают лимфатическую и периферическую системы.

Серотипы 68, 69 вируса ECHO  поражают слизистые оболочки верхних дыхательных путей, ЦНС и пищеварительную систему. Инфекция  может протекать как острая (менингит, менингоэнцефалит, миокардиты), и бессимптомно, что связано с  персистенцией вируса.

 

Полиомиелит

Полиомиелит – острая энтеровирусная инфекция, при которой происходит поражение слизистой оболочки кишечника и носоглотки, двигательных нейронов спинного и головного мозга.

Возбудитель: сем. Picornaviridae, род Enterovirus,   Poliovirus.

Эпидемиология. Источником заболевания является больной человек, или вирусоноситель, с бессимптомной формой течения инфекции. 

Основной механизм передачи - фекально-оральный. Возбудителя можно обнаружить в носоглотке через 36ч, в испражнениях через 72 ч после заражения. Клинически заболевание, вызванное полиовирусом, чаще протекает в кишечной форме, в 1% случает с поражением ЦНС.

Фактором передачи чаще всего служат пищевые продукты, грязные руки, предметы обихода. Редко возможен аэрозольный механизм передачи.   Естественная восприимчивость людей высокая. Часто формируется здоровое носительство.

Этиопатогенез. Входными воротами возбудителя является слизистая оболочка носоглотки, верхних дыхательных и пищеварительных путей, тонкого кишечника. Первичная репродукция вируса происходит в эпителиоцитах, лимфоидных структурах: лимфоцитах, фолликулах глоточного кольца и задней стенки глотки, миндалинах, в пейеровых бляшках.

        На следующем этапе вирусы преодолев лимфатический барьер, проникают в лимфатические узлы, чаще мезентериальные, в которых происходит их дальнейшая репродукция. Этот период сопровождается вирусемией. С током крови вирус диссеминирует по организму, проникает во внутренние органы: печень, селезенку, легкие, лимфатические узлы, скелетные мышцы, вдоль аксонов и нервных волокон или по периневральным пространствам попадает в ЦНС и поражает двигательные нейроны передних рогов спинного мозга, ядра продолговатого мозга и варолиева моста, мозжечек, клетки подкорки и мозговых оболочек. Пораженные клетки, как правило, погибают, на их месте формируется рубцовая ткань, что приводит к развитию парезов и параличей. Основные клинические формы полиомиелита:

- бессимптомная и абортивная - протекают без проникновения вируса в ЦНС;

- менингиальная, паралитическая -  протекающая с поражением ЦНС.

Микробиологическая диагностика:  

Вирусологическое исследование.

Иммунодиагностика.

 Молекулярно-генетические методы.

 Материал для исследования: носоглоточное  отделяемое, фекалии, СМЖ, секционный материал (кусочки спинного и головного мозга), кровь.

Специфическая профилактика.

1.Вакцина полиомиелита 1, 2, 3 типов Сейбина-Смородинцева – Чумакова.

2.Полио Сэбин, вакцина против полиомиелита.

3.Имовакс Полио  – вакцина полиомиелитная.

4.Тетракокк 05 для профилактики коклюша, дифтерии, столбняка, полиомиелита.

 

РОТАВИРУСНАЯ ИНФЕКЦИЯ

Ротавирусная инфекция - острая антропонозная вирусная инфекция с фекально-оральным механизмом передачи, при котором происходит поражение слизистых оболочек тонкой кишки и ротоглотки.

Возбудитель относится  к  сем. Reoviridae,    в состав которого   входят несколько родов: род Orthoreovirus, Orbivirus, Coltivirus, Rotavirus.

Структура. Вирион ротавирусов имеет сферическую форму, размер до 70 нм. Геном представляет двунитевую, фрагментированную  РНК. Капсид  двухслойный (наружный и внутренний), похож на колесо с расходящимися спицами (рота – колесо).  Суперкапсид отсутствует.

Культивирование. Вирус можно вырастить в культурах первичных и перевиваемых клеток почек зеленых мартышек.

Антигенная структура: групповые антигены (серогруппы);  типоспецифические антигены.

Репродукция. Репродукция происходит в цитоплазме эпителиальных клеток.

Резистентность. Ротавирусы устойчивы к эфиру, детергентам, дезинфектантам. Прогревание при 50⁰ С приводит к инактивации вируса.

Эпидемиология.

Источником инфекции  являются больные ротавирусным гастроэнтеритом или вирусоносители. Основной механизм передачи фекально-оральный, возможен контактно - бытовой и воздушно-капельный. Основной путь передачи – водный, пищевой.

Этиопатогенез. Инкубационный период от нескольких часов (12 – 48) до 5 дней. Вирус поражает зрелые эпителиоциты 12 перстной кишки и верхнего отдела тонкой кишки. Размножение вируса сопровождается выраженным цитопатическим эффектом. Проникнув в клетки, вирус вызывает их массовую гибель. Образовавшиеся на их месте новые клетки, структурно незрелы. Развивается всасывательная недостаточность в тонком кишечнике. Нарушаются процессы расщепления дисахаров, которые скапливаются в просвете кишечника, что приводит к повышению осмотического давления.

Вирусы циркулируют в пределах слизистой оболочки тонкой кишки.

Материал для исследования: фекалии.

Микроскопическая диагностика методом электронной микроскопии.

Вирусологическое исследование.

Иммуноидентификация - ИФА, РИФ.

Молекулярно-генетический анализ.

Серологическая диагностика.

ВИРУС НОРВОЛК

Вирусы Норволк служат частой причиной развития эпидемического острого гастроэнтерита и являются причиной внутрибольничного гастроэнтерита.

Возбудитель относится к сем. Caliciviridae.

Структура.  Диаметр вириона 25-32 нм. Антигенное строение неоднородное, имеются 4 серовара. Геном представлен однонитевой, нефрагментированной

(+)РНК. Выделить вирус можно в  первые   48 – 72 ч заболевания.

Культивировани е. Вирус не культивируется на культуре ткани.

Резистентность. Вирус устойчив во внешней среде.

Эпидемиология. Факторами передачи инфекции являются инфицированная питьевая вода, зеленый салат, сырые устрицы и др. продукты. Распространяется фекально-оральным путем.

Микробиологическая диагностика.

Материал для исследования фекалии.

Основным методом обнаружения вируса является метод иммунной электронной микроскопии. Разработан радиоиммунологический тест в твердой фазе для выявления АГ вируса Norwalk  и антител к ним.

Для иммуноиндикации используют ОТ-ПЦР.

Раздел 4. ВИРУСНЫЕ ГЕПАТИТЫ

Гепатиты – это группа заболеваний, имеющих общий клинический синдром, характеризующийся поражением печени. Наиболее частым этиологическим фактором гепатитов являются гепатотропные вирусы, основной мишенью воздействия для которых служат клетки печени (гепатоциты).

По этиологии различают:

- энтеральные гепатиты – гепатит А и гепатит Е;

- парентеральные гепатиты – гепатит В, С, Д, G, F, TTV, SEN, NF.

    По частоте поражения печени вирусы разделяют на следующие группы:

1. Основные гепатотропные вирусы − вирусы А, В, С, Д, Е, G, ТТ V, SEN -гепатитов.

   2. Вторично гепатотропные вирусы:

- Herpesvirus (Cytomegalovirus, вирус Эпштейна-Барр, вирус простого герпеса (1,2 типов), Varicella zoster, вирусы герпеса 6-8 типов); Enterovirus (Коксаки-вирус, ECHО-вирус); Adenovirus; Paramyxovirus; Parvovirus; Rubella virus.

3. Редкие гепатотропные вирусы: Ebola virus; Flavivirus.

Микробиология вирусного гепатита  А (ВГА)

Гепатит А – острая, циклическая антропонозная вирусная инфекция с фекально-оральным механизмом передачи, которая характеризуется преимущественно поражением гепатоцитов и клинически проявляется интоксикацией, гепатомегалией и желтухой.

Возбудитель относится к семейству Picornaviridae, роду Hepatovirus.

Структура. Вирион сферической формы, диаметр 27 нм, тип симметрии нуклеокапсида кубический. Геном представлен линейной, однонитевой (+) РНК. Суперкапсидная оболочка отсутствует.

Антигенное строение. Вирус антигенно однороден. Антигенная активность связана с поверхностными капсидными белками.

Культивирование. Вирус гепатита А размножается в организме шимпанзе, павианов, в культуре перевиваемых линий клеток почек эмбриона, макак резус, перевиваемой линии клеток почек зеленых мартышек.

Репродукция. Репродукция вируса происходит в цитоплазме пораженных клеток.

Резистентность. Вирус устойчив к высокой температуре. Инактивируется при 60⁰С в течение нескольких часов. Теряет инфекционность при 120⁰С за 20 минут. Эпидемиология.

Источник – больной, который выделяет вирус с испражнениями за 12-14 дней до появления желтухи и в течение 3 недель желтушного периода.

Пути передачи: фекально-оральный, контактно-бытовой.

Восприимчивый коллектив – дети и взрослые.

Этиопатогенез. Входными воротами является слизистая ротовой полости и тонкой кишки. Первичная репродукция происходит в месте внедрения, где развивается воспаление. Вирус  преодолевает желудочный барьер, проникает в тонкую кишку, всасывается в кровь и по воротной вене достигает печени. В это время отмечается вирусемия. Вирус обладает гепатотропностью, его  репликация происходит в клетках печени. Повреждение гепатоцитов обусловлено клеточными цитотоксическими реакциями. В настоящее время доказана возможность и прямого цитопатического действия вируса на гепатоциты. Следствием прямого цитопатического действия вируса является некроз клеток печени.

В дальнейшем происходит повреждении портальной зоны с образованием клеточной инфильтрации. Поражение гепатоцитов приводит к возникновению желтухи. Снижается барьерная функция печени. Регистрируются дистрофические изменения клеток печени. Гепатоциты увеличиваются в размерах.

Клинические проявления. При вирусном ГА инкубационный период от 7 до 50 дней (обычно15-30 дней). Начало болезни острое. Нарастает желтуха. Печень увеличивается в размерах незначительно, могут быть боли в области печени. Иногда увеличивается селезенка.

Вирусоносительства и хронических форм при гепатите А не наблюдается.

- материал для исследования: кровь, фекалии;

- методы исследования:

1. Вирусологическое исследование.

2. Проведение серодиагностики (ИФА, РИФ).

3. Молекулярно-генетическое исследование - ПЦР.

 

Микробиология вирусного гепатита В (ВГВ)

Гепатит В – антропонозная вирусная инфекция, которая характеризуется парентеральным механизмом заражения, протекает в острой форме и в виде вирусоносительства и приводит к поражению печени с развитием печеночной недостаточности; с переходом в хроническую форму, возникновением цирроза печени и развитием гепатоцеллюлярной карциномы.

Возбудитель гепатита В относится к семейству Hepadnaviridae, роду Orthohepadnavirus.

Строение вириона. Вирион имеет сферическую форму, его диаметр 42 нм, имеет сердцевину (core) и суперкапсид. Капсид кубического типа симметрии. Геном вируса гепатита В – это ДНК; имеет уникальные особенности:

1. Кольцевая частично двунитевая молекула ДНК: минус нить ДНК имеет полную длину;  плюс нить ДНК неполная.

2. В состав генома входят: ДНК-зависимая ДНК-полимераза и протеинкиназа.

3. Геном вируса ГВ имеет маленькую молекулярную массу. Сердцевину окружает липидсодержащая  оболочка – суперкапсид.

Антигенное строение. Вирус ГВ имеет сложное антигенное строение. В состав вириона входят четыре антигена:

- HBsAg – поверхностный антиген оболочки.

- два капсидных антигена: HBcAg (core-антиген) и HBeAg (антиген инфекционности);

- HBxAg –  связан с развитием первичной гапатоцеллюлярной карциномы.

Культивирование. Вирус ГВ способен культивироваться только в культуре клеток, полученной из ткани первичного рака печени.

Репродукция.  Вирус гепатита В имеет уникальный цикл репродукции, который происходит через прегеномную РНК с участием обратной транскриптазы. Инфекция протекает как по продуктивному типу, так и по типу вирус-индуцированной трансформации. Эта ДНК встраивается в геном гепатоцита как провирус. При этом типе взаимодействия развивается вирусоносительство, приводящее к хронизации процесса.

Резистентность. Вирус гепатита В устойчив к действию температуры. Его инфекционность полностью утрачивается при 120⁰С в течение 45 минут.

Эпидемиология.

Источниками инфекции являются: больные острой и хронической формами болезни; вирусоносители.

Пути передачи: парентеральный (основной); артифициальный; трансплацентарный; половой; контактно-бытовой.

  Восприимчивый коллектив – дети и взрослые.

Группы риска: наркоманы;   люди, получающие гемодиализ; врачи: хирурги, акушеры и гинекологи, стоматологи, урологи.

Этиопатогенез. Проникновение вируса в организм осуществляется через поврежденные кожные покровы или слизистые оболочки. Он попадает в кровь, возникает вирусемия. Вирус гематогенно диссеминирует в печень, адсорбируется на гепатоцитах. При этом возбудитель не оказывает прямого цитотоксического действия на клетки печени. На поверхности пораженных гепатоцитов происходит экспрессия зрелых вирионов. Разрушение клеток печени происходит в результате действия цитотоксических иммунных механизмов. Заболевание может приобрести хроническое течение и перейти в цирроз печени (продуктивный тип). Если инфекция протекает по интегративному типу, то чаще проявляется в виде «здорового» носительства.

Клинические проявления. Инкубационный период колеблется от 42 до 180 дней, в среднем 60-120 дней. Острый ВГВ может переходить в хроническую форму с последующим развитием цирроза печени и первичной гепатокарциномы.

Материал для исследования: сыворотка крови, фекалии; слюна, сперма, менструальная кровь, вагинальный секрет, слезная жидкость, пот, моча, ликвор.

Методы исследования:

1. Обнаружение в сыворотке крови HBsAg, HBeAg, HBcAg - ИФА, РИА.

2. Определение ДНК вируса в ПЦР.

3. Выявление анти- HBs, анти- НВс, анти- НВе методом ИФА.

Эпидемиология.

И сточники инфекции: больные хронической или острой формами болезни; вирусоносители.

Пути передачи: парентеральный;артифициальный; трансплацентарный; полов