Лабораторные методы диагностики ТБ

В общем анализе крови при ТБ возможны увеличение СОЭ, часто при нормальном количестве лейкоцитов, сдвиг лейкоцитарной формулы влево. Иногда изменений в ОАК нет. При прогрессировании болезни – лимфоцитоз, лимфопения, лейопения, эозинофилия.

Лабораторные методы выявления МБТ

При изучении материала – воспользуйтесь учебным видео «Лабораторная диагностика туберкулеза», перейдя по ссылке https://www.youtube.com/watch?v=wft41OnKOXs&t=653s

Для исследования используется различный материал, чаще всего мокрота. Лучше исследовать утреннюю мокроту, при незначительном её количестве рекомендуется собирать мокроту в течение суток. Однако немалая часть больных туберкулезом не выделяет мокроту, поэтому в специализированных учреждениях применяется исследование промывных вод трахеи и бронхов, бронхо-альвеолярного смыва.

Исследуются на МБТ также мазки из зева, моча, кал, выпот из полостей, спинномозговая жидкость, выделения из гениталий, отделяемое свищей, материал, полученный при пункциях и биопсиях, а также бронхоальвеолярный смыв (БАС), полученный при бронхоальвеолярном лаваже.

Группы методов для выявления МБТ:

- бактериоскопические (прямая бактериоскопия, флотация, люминистцентная микроскопия). Позволяет сделать вывод о наличии или отсутствии КУБ.

- бактериологический (культуральный) – посев на питательные среды. Является ведущим методом диагностики. Недостаток – медленный рост – первые колонии появляются на 18-30 день, максимально – до 2-2,5 мес. Поэтому материал выдерживают в термостате 3 месяца. Большое значение имеет определение чувствительности МБТ к противотуберкулезным препаратам.

- биологический – биопроба, определение вирулентности штаммов МБТ путем заражения лабораторных животных (чаще морских свинок). В течение 3 месяцев наблюдают. После гибели животных вскрывают и выявляют туберкулезные изменения.

- иммунологический (ИФА) и молекулярно-генетический. Для диагностики латентной ТБ инфекции, заменяют пробу Манту. В последнее время используют новые иммунологические методы диагностики в основе которых лежит измерение иммунологического ответа Т-лимфоцитов на высокоспецифичные микобактериальные антигены, выраженного продукцией γ- интерферона в культуре цельной крови. Один из таких тестов – квантифероновый тест (QuantiFERON) (Австралия) – золотой стандарт диагностики латентного ТБ. Еще один метод - Т-SPOT (Великобритания) – основан на выявлении секреции интерферона-гамма лимфоцитами, стимулированными специфическими антигенами микобактерии туберкулеза, может диагностировать и активные формы. Оба метода обладают высокой чувствительностью и специфичностью (до 99%) и являются in vitro тестами. Отсутствие необходимости контакта с пациента с туберкулиновым антигеном позволяет избежать риска аллергии. Недостатки: высокая стоимость и необходимость в лабораторном оснащении и квалифицированном персонале.

- туберкулинодиагностика.

Бактериовыделителем считают больного, у которого найдены МБТ любым методом 1 раз при наличии клинико-рентгенолгических признаков активности процесса, а при отсутствии этих признаков – 2 раза любым методом. Прекращение бактериовыделения подтверждают не менее, чем 2 последовательными негативными бактериоскопиями и посевами с интервалом в 2-3 месяца.

Туберкулинодиагностика

Туберкулинодиагностику проводят с помощью пробы Манту с 2 ТЕ ППД-Л.

Туберкулин впервые был получен Р. Кохом в 1891 г. В настоящее время используется очищенный туберкулин, ППД-Л (Линниковой М. А.), выпускаемый как в сухом виде – по 50.000 туберкулиновых единиц (ТЕ) в одной ампуле, так и в стандартном разведении, которое содержит 2 ТЕ в 0,1 мл препарата.

Туберкулин – белковый продукт жизнедеятельности МБТ. Сухой очищенный туберкулин – фильтрат убитой нагреванием культуры МБТ, очищенный путем ультрацентрифугирования, отмытый спиртом и высушенный в вакууме в замороженном состоянии.

Туберкулиродиагностика основана на определении туберкулиновой аллергии –повышенной чувствительности к туберкулину, наступившей вследствие заражения вирулентными МБТ или вакцинации БЦЖ. Туберкулиновая аллергия относится к феномену повышенной чувствительности замедленного типа (ПЧЗТ) и является иммунологически специфичной. При проведении туберкулиновой пробы человеку, не зараженному ТБ (не иммунизированному вакциной БЦЖ) туберкулин не вызывает реакции. Зараженный ТБ или вакцинированный БЦЖ организм на введение туберкулина может ответить местной (туберкулиновая реакция на месте введения) и общей (повышение температуры тела, недомогание, слабость, мышечные боли) реакцией.

Туберкулинодиагностика – основной метод выявления первичного туберкулезного инфицирования детей.

Вираж – впервые положительная проба Манту послед предыдущих отрицательных (или увеличение папулы на 6мм и более за 1 год).

В настоящее время используют пробу Манту с 2 ТЕ и Диаскинтест.

Показания к проведению пробы Манту: отбор контингента для ревакцинации БЦЖ, определение инфицированности ТБ, выявление гиперергической реакции на туберкулин у инфицированный ТБ лиц. С целью выявления противопоказаний перед постановкой туберкулиновой пробы обязательно проводится опрос и осмотр.

 Реакция Манту ставится на внутренней поверхности предплечья, в средней трети. Кожу обрабатывают 70˚ спиртом. Иглу вводят строго внутрикожно, срезом вверх, набирают из ампулы 0,2 мл, вводят 0,1 мл. При правильном введении образуется белесоватая папула размером 5-6 мм. Реакция оценивается через 72 часа. Измеряют поперечный размер папулы перпендикулярно к продольной оси руки.

Отрицательная реакция:

- полное отсутствие инфильтрата и гиперемии;

- наличие уколовой реакции 0-1 мм.

Сомнительная реакция: только гиперемия или инфильтрат 2-4 мм (необходимо повторить пробу через 3 месяца).

Положительная реакция: папула (инфильтрат) диаметром 5мм и более.

Гиперергическая реакция:

- диаметр папулы 17 мм и более (у детей и подростков), 21 мм и более (у взрослых);

- везикуло-некротические реакции независимо от размера инфильтрата.

Гиперергическая реакция свидетельствует о том.что обследуемый инфицирован ТБ. Сомнительная или слабо и умеренно положительная реакция наблюдается у детей через 1-2 года после вакцинации. Положительная реакция может быть следствием инфекционной или поствакцинальной аллергии.

Реакция Манту ставится всем детям и подросткам ежегодно с 12 месяцев до 15 лет с целью, прежде всего, выявления её виража. Неинфицированным детям из контакта до инфицирования, невакцинированным БЦЖ (с 6 месяцев) до вакцинации р. Манту ставится 2 раза в год.

О первичном заражении свидетельствуют следующие признаки: вираж туберкулиновой чувствительности. усиление предыдущей послевакцинальной аллергии на 6 мм и более, появление гиперергической реакции в любые сроки после вакцинации, образование инфильтрата 12 мм и более через 3-4 года после вакцинации.

Диаскинтест представляет собой усовершенствованный вариант внутрикожного теста для определения латентной туберкулезной инфекции. В его состав входит рекомбинантный белок, продуцируемый генетически модифицированной культурой кишечной палочки, разведенный в стерильном изотоническом фосфатном буферном растворе и консервант (фенол). Диаскинтест содержит 2 антигена, присутствующие в вирулентных штаммах МБТ и отсутствующие в вакцинном штамме БЦЖ. Инъекцию препарата проводят строго внутрикожно, в область средней трети предплечья, тонкой иглой (как и Манту). В шприц набирают 2 дозы препарата (0,2 мл) и выпускают раствор до метки 0,1мл в стерильный ватный тампон. Вводят 0,1мл препарата. Оценка результата. Его считывают через 72 часа. Оценивается диаметр гиперемии и уплотнения (папулы), которые образовались на месте инъекции.

Отрицательный результат – при отсутствии красного пятна или уплотнения в месте инъекции.

Сомнительный – при наличии красного пятна или небольшой припухлости менее 2-4 см в диаметре.

Положительный – при наличии припухлости диаметром 5 мм и более.

Гиперергический – при образовании уплотнения более 15 мм, в случае появления пузырьков, изъязвлений или увеличения л/у.

Все лица, у кторых выявлена сомнительная. положительная или гиперергическая реакция подлежать обследованию на туберкулез.

 

Выявление больных (лиц) с подозрением на ТБ о существляется медицинскими работниками всех специальностей в учреждениях здравоохранения всех типов и уровней и на всех этапах оказания медико-санитарной помощи населению.

Цель: выявление лиц (больных) с подозрением на ТБ (клиническими симптомами и другими объективными признаками, не исключающими наличие ТБ) для направления на последующие этапы его диагностики.

Способы выявления:

1. Активное выявление лиц с подозрением на ТБ – осуществляется в ходе различных видов скрининговых (профилактических) обследований населения (групп населения) на ТБ и при обращении больных за медицинской помощью с жалобами и симптомами, не связанными с заболеванием ТБ.

Скрининг-опрос проводится в соответствии с унифицированным перечнем вопросов.  Положительным результатом скрининга АКС-ТБ является минимум один ответ «да» на вопросы 1-7 Анкеты (направляются на первичную диагностику) или более двух «да» на все вопросы (1-10) Анкеты (ответы «да» на вопросы 8-10 - направляются на профосмотр). Анкета представлена в приложении.

Проводятся так же скриннинговые осмотры (ФГ ОГК у взрослых и туберкулинодиагностика у детей), скриннинг по эпид. показаниям.

1. Пассивное выявление больных ТБ осуществляется при самостоятельном обращении больных за медицинской помощью с жалобами (клиническими проявлениями), которые не исключают заболевание ТБ (сразу направляются на первичную диагностику ТБ).

Клиническая диагностика ТБ

Является первым этапом диагностики ТБ при любой локализации и включает следующие действия: