Микробиологический контроль лекарственных средств

Растительное лекарственное сырье может обсеме- няться микроорганизмами в процессе его получения: инфицирование происходит через воду, нестерильную аптечную посуду, воздух производственных помеще- ний и руки персонала [12].

Обсеменение лекарственного сырья возможно на всех этапах его заготовки и при хранении. Актив- ному размножению микроорганизмов способствует увлажнение растений и растительного сырья. Раз- множившиеся микроорганизмы вызывают изменение фармакологических свойств препаратов, полученных из лекарственных растений. Микроорганизмы мо- гут также попадать из окружающей среды, от людей и обсеменять лекарственные препараты в процессе их изготовления из растительного сырья. Для со- блюдения санитарного режима изготовления лекар- ственных препаратов проводят санитарно-микробио- логический контроль объектов окружающей среды предприятия и каждой серии выпускаемой лекар- ственной формы. Лекарственные средства для парен- терального введения в виде инъекций, глазные капли, мази, пленки и др., в отношении которых имеются соответствующие указания в нормативно-техниче- ской документации, должны быть стерильными. Кон- троль стерильности лекарственных средств проводят путем посева на тиогликолевую среду для выявления различных бактерий, в том числе анаэробов; при по- севе на среду Сабуро выявляют грибы, главным об- разом рода Candida. Стерильность лекарственных

средств с антимикробным действием определяют пу- тем мембранной фильтрации: фильтр после фильтра- ции исследуемого препарата делят на части и вносят для подращивания задержанных микроорганизмов в жидкие питательные среды. При отсутствии ро- ста препарат считается стерильным. Лекарственные средства, не требующие стерилизации, обычно со- держат микроорганизмы, поэтому их испытывают на микробиологическую чистоту: проводят количе- ственное определение жизнеспособных бактерий и грибов в 1 г или 1 мл препарата, а также выявляют микроорганизмы (бактерии семейства энтеро-бакте-

рий, синегнойная палочка, золотистый стафилококк), которые не должны присутствовать в нестерильных лекарственных средствах. В 1 г или 1 мл лекарствен- ного сырья для приема внутрь должно быть не более 1000 бактерий и 100 дрожжевых и плесневых грибов. В случаях местного применения (полость уха, носа, интравагинальное использование) количество микро- организмов не должно превышать 100 (суммарно) микробных клеток на 1 г или 1 мл препарата. В та- блетированных препаратах не должно быть патоген- ной микрофлоры, а общая обсемененность не должна превышать 10 тыс. микробных клеток на таблетку.

Глава 5. ВИРУСЫ

 

 

Вирусы существенно отличаются от других форм жизни своими размерами, строением генома и особен- ностями его воспроизводства.

Размеры вирусных частиц (вирионов) находятся в пределах 28-250 нм, их можно рассмотреть только с помощью электронного микроскопа. Вирион содер- жит только один тип нуклеиновых кислот — ДНК или РНК. Вирусы не способны строить свои структурные элементы (белки, нуклеиновые кислоты и др.) из ком- понентов питательной среды, они не способны расти на питательных средах, а для своего воспроизводства используют метаболические системы клетки хозяина (человека, животного, растения, бактерии), т. е. явля- ются облигатными паразитами.

 

Структура вирусов

Вирусная частица (рис. 35) содержит генетиче- ский материал (ДНК или РНК), окруженный белковой оболочкой (капсидом) [24]. ДНК может образовывать кольцевые или линейные структуры. РНК представле- на одно- или двухнитевыми молекулами, у некоторых вирусов может быть сегментированной. Преимуще- ство сегментированного генома в том, что в дискрет- ных фрагментах содержится информация, которую не способна обеспечить единая молекула. В зависимо- сти от выполняемых функций однонитевые РНК под- разделяют на две группы:

(1) РНК способна непосредственно транслировать генетическую информацию на рибосомы клетки-хо- зяина, т. е. выполнять функции иРНК, ее обозначают

+РНК (плюс-нити РНК, позитивный геном).

(2) РНК вируса не способна функционировать как иРНК, а служит матрицей для образования +РНК, ее обозначают –РНК (минус-нити, негативный геном).

Ретровирусы содержат +РНК, на матрице которой фермент ревертаза (РНК-зависимая ДНК-полимераза) синтезирует ДНК-провирус, интегрирующий в кле- точный геном.

Капсид защищает геном от внешних воздей- ствий, например, от действия нуклеаз клетки хозяи- на. На его поверхности располагаются системы рас- познавания рецепторов клетки хозяина и адсорбции на ее поверхности. Обычно это гликопротеиды, моле- кулы которых в виде ворсинок окружают вирион. Ви- русы бактерий — бактериофаги часто имеют особые

структуры, облегчающие их проникновение внутрь клетки. Некоторые вирусы в составе вириона име- ют ферменты, участвующие в разрушении оболочки клетки хозяина (фаговый лизоцим) или в репликации его генома (например, вирус иммунодефицита че- ловека содержит обратную транскриптазу). Капсид построен из идентичных белковых субчастиц — кап- сомеров. Субъединичная структура обеспечивает эко- номию генетического материала, а также самосборку вириона за счет нековалентных межмолекулярных взаимодействий подобно процессу кристаллизации. Кроме того, такая структура способствует освобож- дению генетического материала внутри клетки хо- зяина путем диссоциации нековалентно связанных субчастиц. Форма вириона определяется характером самосборки капсомеров и может быть кубической, спиральной или соединять несколько структурных компонентов (рис. 36). На поверхности белкового капсида многие вирусы млекопитающих имеют ли- попротеиновую оболочку, которая обычно образуется из мембраны клетки хозяина [12].

Рис. 35. Схема строения вириона ВИЧ.

Рис. 36. Размеры и морфология основных возбудителей вирусных инфекций человека.

 

Рис. 37. Бактериофаг до (А) и после (В) сокращения чехла.