Опыт 1. Определение концентрации пировиноградной кислоты (ПВК) в моче.

1. В две пробирки внесите реактивы согласно следующей таблице:

Раствор	Опытная проба, мл	Контрольная проба, мл
Исследуемый образец	2	-
Дистиллированная вода	-	2
2,4-динитрофенилгидразин	0,8	0,8

 

2. Содержимое пробирок на 15 мин поместите в темное место при комнатной температуре.

3. В каждую пробирку внесите по 1 мл 10%-го раствора NаOH и через пять минут измерьте оптическую плотность при длине волны 620 нм опытной пробы против контрольной и калибровочной пробы против контрольной.

4. Расчет проведите по готовому калибровочному графику.

Расчетсодержания ПВК в суточной моче (на диурез 1500 мл):

Для пересчета содержания ПВК (в мг) в единицы количества вещества (мкмоль) надо умножить соответствующие величины на 11,4 (коэффициент пересчета).

Норма для человека: 10-25 мг/сутки или 114-284 мкмоль/сутки пировиноградной кислоты.

Сравните полученные значения с нормальными величинами. Каковы причины повышенного содержания пировиноградной кислоты в сыворотке крови и моче?

 

Опыт 2. Определение активности сукцинатдегидрогеназы мышц.

1. Взвесьте 1 г мышечной ткани.

2. Поместите ткань в ступку, тщательно разотрите со стеклянным песком, добавляя 3-4 мл раствора 5%-ной янтарной кислоты.

3. Полученный гомогенат перенесите поровну в 2 пробирки.

4. Содержимое одной пробирки кипятите в водяной бане в течение 3-5 минут.

5. Затем в обе пробирки добавьте по 1 капле раствора метиленовой сини, перемешайте и залейте поверхность жидкости 0,5 мл растительного масла для изоляции от кислорода воздуха. Обе пробирки инкубируйте в водяной бане (37^оС) в течение 10 минут.

 

Дайте объяснение наблюдаемым явлениям. Какова функция метиленовой сини в данном эксперименте? На какое соединение эта функция возлагается в живой клетке?

 

 

Дата выполнения ________ Балл ____ Подпись преподавателя ____________

Занятие № 13. «Обмен углеводов (часть 1)»

 

ВОПРОСЫ К КОНТРОЛЬНОЙ РАБОТЕ:

1. Основные углеводы пищи, их характеристика. Биологическая роль и функции углеводов в организме.

2. Переваривание угле­водов в желудочно-кишечном тракте у моногастричных животных. Ферменты, участвующие в переваривании углеводов.

3. Особенности переваривания углеводов у жвачных животных. Пути включения летучих жирных кислот (ЛЖК) в метаболизм.

4. Метаболизм глюкозо-6-фосфата.

5. Регуляция содержания глюкозы в крови. Биологическая значимость данного явления.

6. Синтез и распад гликогена: последовательность стадий и биологическое значение этих процессов.

 

Дата выполнения ________ Балл ____ Подпись преподавателя ____________

Экспериментальная работа.

Опыт 1. Влияние формальдегида на активность амилазы.

1. Возьмите две пробирки.

2. В опытную пробирку налейте по 1 мл растворов крахмала, амилазы и 5 капель 5%-ного формальдегида.

3. В контрольную пробирку налейте по 1 мл раствора крахмала, амилазы и воды.

4. Поместите пробирки на 10 минут в водяную баню при 37°С.

5. В обе пробирки добавьте по 1 капле 1%-ного раствора йода.

 

Объясните полученные результаты.