Параметр аскорбиновая кислота

Витамин C (L-аскорбиновая кислота (C6H8O6) представляет собой γ-лактон 2,3-дегидрогулоновой кислоты. Аскорбиновая кислота (АК) является неустойчивым соединением, легко окисляется, превращаясь в дегидроаскорбиновую кислоту. Одним из конечных продуктов обмена АК являются оксалат, на долю которого приходится около 50% оксалата, выводимого из организма с мочой за сутки.

До 80-90 % поступившей с пищей аскорбиновой кислоты поглощается в кишечнике путем активного транспорта. Среднее содержание аскорбиновой кислоты в тканях взрослого человека оценивается в пределах 1.2 - 2.0 г и поддерживается ежедневным ее приемом 60-75 мг в сутки, для беременных и подростков необходим прием 100 мг/сутки и выше.

Период полужизни АК в организме составляет 10-20 дней, и дефицит проявляется спустя несколько месяцев в форме цинги. Прием с пищей 60 мг/сут аскорбиновой кислоты предотвращает развитие цинги после нахождения 30-45 дней на диете, не содержащей аскорбиновой кислоты. Основным путём удаления аскорбиновой кислоты и её метаболитов из организма служит моча.

Выделение с мочой начинается с концентраций аскорбата в плазме приблизительно 1.2-1.8 мг/дл. Прием с пищей более высоких доз витамина C приводит к его выделению с мочой без реабсорбции в почках.

Источники повышенного содержания аскорбиновой кислоты в моче:

1. Профилактический прием при недостаточном поступлении в организм с пищей, в частности, в зимне-весенний период в составе «шипучих» таблеток, содержащих 250 мг или 1000 мг аскорбиновой кислоты.

2. Ежедневный прием высоких доз аскорбиновой кислоты. По мнению Нобелевского лауреата Л. Поллинга каждый человек должен потреблять от 0,25 до 10 г аскорбиновой кислоты, считая оптимальной дозой по 0,25 г 4 раза в сутки во время еды. При контакте с больными, утомлении или переохлаждении дозу рекомендуется увеличить. Данная гипотеза до сих пор не получила надежных доказательств.

3. Поступление с пищей добавок Е300 — E305, содержащих аскорбиновую кислоту в качестве антиоксиданта.

4. Потребление пива, фруктовых соков, безалкогольных напитков, фруктовых и овощных пюре, леденцов, мармелада, жевательной резинки и т.д.

Определение аскорбиновой кислоты в моче тест-полосками проводят для исключения ее влияние на результаты тестов.

АК служит источником ложноотрицательных или заниженных результатов при использовании некоторых марок тест-полосок, что приводит к необходимости подробного ознакомления с инструкциями, поставляемыми производителями вместе с тест-системами.

Аналитическая зона тест-полосок «Аскорбиновая кислота» предназначена для определения содержания АК в моче. При отсутствии данной зоны в составе тестов на тест-полоске наличие АК в моче можно предположить в следующих ситуациях: обнаружение при микроскопии мочи повышенного количества эритроцитов при отрицательной реакции тест-полоски на «кровь»; при отрицательном или заниженном результате теста «глюкоза» на тест-полоске и положительной реакции на кетоновые тела. И в том и другом случае «виновником» занижения является аскорбиновая кислота, реагирующая с органическим пероксидом в тесте «кровь» или в реакции разрушения H2O2, образующейся в первой реакции в тесте «глюкоза». Кроме того, ложноотрицательные или заниженные результаты могут обнаруживаться при определении билирубина, нитритов тест-полосками, в которых использованы реакции чувствительные к вмешательству АК.

Принцип метода. Метод основан на способности аскорбиновой кислоты в кислой среде восстанавливать 2,6-дихлорфенолиндофенол с образованием бесцветной лейкоформы. В зависимости от концентрации аскорбиновой кислоты или других восстановителей веществ в исследуемой пробе мочи исходная темно-сиреневая окраска аналитической зоны может меняться на светло-сиреневую и далее вплоть до полного обесцвечивания. Тест расценивается как положительный при изменении цвета аналитической зоны тест-полоски. В зависимости от концентрации аскорбиновой кислоты или других сильных восстанавливающих веществ в пробе исходная темно-сиреневая окраска реагентной зоны меняется в зависимости от концентраций аскорбиновой кислоты: 0,0 10,0 20,0 ≥ 40,0 мг/дл. Тест реагирует не только на аскорбиновую кислоту, но другие восстанавливающие соединения, которые могут содержаться в моче: метаболиты аспирина, гомогентизиновая кислота и др. Чувствительность реакционной зоны составляет 10 мг/дл.

В идеале определение содержания аскорбиновой кислоты или других веществ в моче, обладающих сильным восстанавливающим действием, следует выяснить перед определением параметров на тест-полоске, на которые влияют восстановители. К ним относятся: глюкоза, кровь, гемоглобин, нитриты или билирубин. Эти исследования должны быть повторены, если реакция на аскорбиновую кислоту положительная. Однако это нужно сделать не раньше, чем через 10 час после последнего приема витамина С.

МИКРОСКОПИЯ ОСАДКА МОЧИ

При стоянии мочи в течение 1 – 2 часов на дне емкости может образовываться осадок в виде облачка. При длительном ее стоянии в холоде может образоваться осадок из уратов, в тепле — осадок из фосфатов. Величина осадка может варьировать от незначительного (невидимого на глаз) до отчетливо видимого (объемистого). Видимый на глаз осадок должен быть описан в бланке анализа мочи. При описании осадков пользуются следующими формулировками: осадок кристаллический, кирпично-красный; осадок гнойный, объемистый; осадок кровянисто-гнойный, с плотноватыми клочками сероватого цвета и др.

Микроскопический анализ осадка мочи является важной составляющей общего анализа мочи, поскольку помогает аргументировать диагноз при различных заболеваниях почек и мочевыводящих путей. В осадке мочи могут содержаться различные компоненты: эритроциты, лейкоциты, эпителиальные клетки, цилиндры, кристаллы. Их количество и состав может существенно меняться в ходе заболевания, что позволяет клиницисту уточнить диагноз и прогнозировать исход заболевания. Все перечисленные составляющие осадка могут попадать в мочу или образовываться в различных отделах мочевыводящих путей.

АВТОМАТИЗАЦИЯ АНАЛИЗА МОЧИ

· Микроскопия осадка мочи, определение химического состава мочи тест-полосками во многих странах мира является общепринятой процедурой анализа.

· В тоже время, она не в полной мере удовлетворяет современным подходам к выявлению заболеваний почек и мочевыводящих путей, поскольку основные этапы анализа мочи – получение осадка мочи и его микроскопический анализ плохо поддаются стандартизации, требуют высокой квалификации специалиста и являются высоко затратными.

· Мероприятия по стандартизации требований к подготовке пациента, процедуре сбора мочи, использование удобных и простых в обращении емкостей для сбора мочи и транспортировки позволило стандартизировать преаналитической этап и снизить количество ошибок, но не исключить их полностью.

· Это стимулировало разработку полностью автоматизированных систем анализа мочи для постепенного вытеснения трудоемких неавтоматизированных приемов анализа мочи, повышения качества анализа, росту производительности труда и снижению финансовых затрат на данную технологию.

Автоматизированный метод идентификации микроскопических частиц в моче был положен метод анализа их изображения, полученных с помощью видеокамеры.

Схема устройства анализатора мочи:

· Подобный анализатор может работать в автоматическом режиме как автоматизированный микроскоп или в составе полностью автоматизированной системы анализа мочи в паре с анализатором тест-полосок.

· Программное обеспечение позволяет проводить распознавание в автоматическом режиме составляющих мочи и выводить результаты распознавания на экране монитора в двух вариантах:

• в виде изображения обнаруженных элементов (рис. 9.2);

• результатов в количественной (содержание в мкл) или в более привычной полуколичественной форме (п/зр.)