Лабораторные методы анализа мочи. Преаналитический этап.

ОБЩИЙ АНАЛИЗ МОЧИ

· (синонимы: клинический анализ мочи, complete urinalysis в англоязычной литературе) представляет собой набор тестов, предназначенных для анализа физико-химического и микроскопического состава мочи.

· Совокупность результатов общего анализ мочи позволяет оценить не только состояние органов мочевыводящей системы, но и выявить нарушения ряда обменных процессов при различных заболеваниях.

· Технология "анализ мочи общий" выполняется с целью диагностики различных заболеваний, при профилактических обследованиях, для мониторинга течения болезни и эффективности лечения.

• Моча человека на протяжении многих веков была единственной доступной для анализа биологической жидкостью.

Моча человека на протяжении многих веков была единственной доступной для анализа биологической жидкостью, в связи с чем врачи пристально изучали ее внешние характеристики (включая цвет, консистенцию, осадок, запах и объем) — процесса, получившего название «уроскопия».

Анализ древних текстов указывает на то, что врачи в древности внимательно относились к проведению уроскопии, тем не менее, к первым «уроскопистам» относят древнегреческих врачей, в частности Гиппократа.

В средневековой медицине вплоть до эпохи Просвещения уроскопия пользовалась особым успехом в диагностике различных заболеваний, оставаясь по характеру сугубо эмпирическим методом, поскольку информацию уроскописты получали исключительно по результатам осмотра мочи.

Присущий эпохе Просвещения рациональный взгляд на науку способствовал переключению интереса с уроскопии на анализ мочи с помощью доступных в то время простых химических реакций, чему в огромной степени способствовали успехи в области химии и оптики.

Была обнаружена способность образцов мочи, содержащих белок, к коагуляции при нагревании или добавлении кислот.

В конце XVII века усилился интерес к выяснению структуры и химического состава камней. При анализе удалённых камней была обнаружена «каменная» кислота, получившая позднее название мочевая кислота.

В начале XIX столетия были идентифицированы другие типы кристаллов, включая цистиновые, соли фосфорной кислоты, оксалаты кальций и др.

В 1837 г в Париже врачи впервые приступили к изучению микроскопического состава на профессиональном уровне. Это позволило в образцах мочи больных обнаружить эритроциты, лейкоциты, эпителиальные клетки, жировые тельца, сперму.

При обучении данному методу широко пользовались гравюрами, выполненные по микрофотографиям, впервые полученными при участии химика Леона Фуко (Léon Foucault).

В России....

В России брошюра врача С. Смирнова «Уроскопия» была издана в 1852 г. В были изложены современные для того времени методы анализа мочи. К систематическому обучению микроскопии мочи приступили в 1861 г в Военно-медицинской академии (ВМА) после открытия при клинике выдающегося отечественного терапевта С.П. Боткина первой в России клинической лаборатории.

Наибольший вклад в распространение анализа мочи в России принадлежит ученику профессора С.П.Боткина профессору Д.И. Кошлакову. В 1880 г он опубликовал руководство «Анализ мочи. Клиническое руководство для студентов и врачей». В его подготовке и написании раздела определения мочевины и азота мочи активное участие принял профессор и выдающийся композитор А.П. Бородин.

В Клиническом институте Великой княгини Елены Павловны (позднее Ленинградском ГИДУВе, Санкт-Петербургской медицинской академии последипломного образования, в настоящее время в СЗГМУ им. И.И. Мечникова) при участии профессора А.В. Пеля и профессора Д.Л. Романовского проходило систематическое обучение врачей микроскопическому анализу мочи. Тематика этих лекций: «Избранные отделы по медицинской химии «О свойстве мочи сифилитиков» (1887), «О холестерине в моче» (1877) и «Анализ мочи и значение его для распознавания болезней».

Классический подход к анализу осадка мочи достиг своего апогея после внедрения в анализ мочи технологий «сухой химии» (dry chemistry).

ЗАПАХ МОЧИ

· Запах свежевыпущенной мочи у здорового человека обусловлен присутствием в ней различных органических нелетучих кислот.

· Моча людей, страдающих сахарным диабетом, может приобретать фруктовый запах в связи с присутствием в ней кетоновых (ацетоновых) тел.

· Его можно уловить в моче пациентов, занимающихся лечебным голоданием, находящихся на причудливых диетах, при тяжелой физической нагрузке, рвоте, диарее.

· После продолжительного стояния моча может приобретать аммиачный запах, обусловленный расщеплением мочевины до аммиака бактериями, находящимися в моче.

· У пациентов с воспалительными заболеваниями мочевыводящих путей моча может иметь неприятный зловонный запах, особенно в тех случаях, когда источником инфекции являются бактерии кишечной группы.

· Некоторые виды продуктов (такие, как спа́ржа, чеснок) могут придавать моче специфичный запах. Несмотря на то что моча может обладать характерным запахом, как правило, данный параметр в настоящее время не относят к диагностически значимым.

ОБЪЕМ МОЧИ

· Для общего анализа мочи в лабораторию доставляют, как правило, первую утреннюю пробу мочи. Доставленный объем не позволяет судить о суточном диурезе.

· При ряде заболеваний измерение объема мочи является одним из методов оценки волюметрической функции почек. У здорового взрослого человека нормальный объем мочи, выделенной за сутки, варьирует в диапазоне от 750 до 2400 мл, составляя в среднем от 1200 до 1500 мл/сут.

· Как правило, объем мочи, выделенной за ночь, составляет не более 1/3 объема, выделенного за сутки.

· Диурез повышается (физиологическая полиурия) в зависимости от количества потребляемой воды, либо потреблением продуктов с высоким ее содержанием, в частности арбузы, дыни. Снижение диуреза наблюдают при ограничении потребления жидкости (физиологическая олигурия), повышении температуры тела, интенсивного потоотделения, рвоты, поноса, что существенно снижает объем выделяемой за сутки мочи.

ХИМИЧЕСКИЙ СОСТАВ МОЧИ

Для определения химического состав мочи пользуются техноло­гиями «сухой химии» (dry chemistry). При данном способе ана­лиза все необходимые для каждой реакции компонен­ты — буферный раствор, индикатор, ферменты, субстрат и др. — наносятся в фабричных условиях на бумажную или пленочную основу (рис.3).

С помощью стандартных тест-полосок определяют 10 показателей (аналитов):

1. относительная плотность;

2. рН;

3. белок;

4. глюкоза;

5. кетоновые тела;

6. билирубин;

7. уробилиноген;

8. эритроциты/гемоглобин;

9. нитриты;

10. лейкоциты (по активности фермента эстеразы нейтрофилах (лейкоцитэстераза);

!!! В некоторых тест-полосках дополнительным параметром является дополнительная зона для определения аскорбиновой кислоты.

Параметр ГЛЮКОЗА

Моча здорового человека содержит такие количества глюкозы, которые не обнаруживают качественными химическими реакциями. Такое содержание глюкозы в моче называют «глюкурез», в отличие от глюкозурии, означающей увеличение концентрации глюкозы в моче до того уровня, при которой химические реакции на глюкозу становятся положительными. Кроме того, термин «глюкурез» используют для обозначения появления глюкозы c мочой при алиментарной глюкозурии.

Появление глюкозы в моче определяется тремя факторами:

• концентрацией глюкозы в крови;

• величиной клиренса;

• количеством реабсорбированной в канальцах глюкозы. Считают, что в норме клетки канальцев способны за 1 мин реабсорбировать 200 – 350 мг глюкозы.

При нормально функционирующих почках глюкозурия развивается только тогда, когда ее уровень в крови превышает так называемый «почечный» порог для глюкозы. В отношении почечного порога для глюкозы выявлены значительные индивидуальные различия. У взрослых почечный порог от 9 до 10 ммоль/л.

Референтные значения: при использовании тест-полосок у здоровых людей в случайном образце мочи реакция на глюкозу отрицательная (отр.).

При трактовке результатов определения глюкозы в моче следует помнить о том, что увеличение концентрации глюкозы в моче, кроме сахарного диабета, обнаруживают при:

· эндокринных заболеваниях (тиреотоксикозе, синдроме Кушинга, акромегалии); заболеваниях печени и поджелудочной железы;

· черепно-мозговой травме;

· нарушении реабсорбции глюкозы;

· синдроме Фанкони;

· далеко зашедших заболеваниях канальцев;

· беременности на фоне латентного сахарного диабета (гестационный диабет).

Параметр КЕТОНОВЫЕ ТЕЛА

Кетоновые тела (КТ) синтезируются в печени, откуда поступают в кровь и служат энергетическими субстратами для органов и тканей. Ацетоуксусная и β-гидроксимасляная кислота являются основными источниками энергии для сердечной мышцы и коркового слоя почек, отдавая им предпочтение перед глюкозой. Напротив, для мозга человека глюкоза является основным энергетическим субстратом. При длительном голодании и низком уровне глюкозы в крови мозг способен переключаться на использование ацетоуксусной кислоты.

Скорость образования КТ в норме невелика, ускорение происходит при ограничении потребления клетками углеводов. Для синтеза КТ используется ацетилкоэнзим А, образующийся в основном при β-окислении жирных кислот. Свой вклад в образование КТ вносят так называемые «кетогенные» аминокислоты

В крови здорового человека кетоновые тела присутствуют в низких концентрациях, не превышая 0,5 ммоль/л, избыток выводится с мочой. За сутки с мочой выделяются небольшие количества кетоновых тел (20-50 мг), которые не обнаруживаются классическими качественными химическими реакциями. При выделении больших количеств кетоновых тел качественные пробы становятся положительными – данное явление получило название «кетонурия».

Кетонемия и кетонурия развиваются всякий раз, когда происходит увеличение потребления липидов при ограничении углеводов, или использование диет, обогащенных жирами.

Кетонемию и кетонурию наблюдают в следующих ситуациях:

· нарушение метаболических процессов (сахарный диабет (диабетический ацидоз), почечная глюкозурия);

· изменение характера питания (голодание, соблюдение «причудливых» диет и диет с низким содержанием углеводов и высоким содержанием жиров и белков,

· неукротимая рвота, диарея, анорексия, эклампсия);

· ускорение метаболических процессов (гипертиреоз, лихорадка, беременность).

Дети подвержены развитию кетоза и кетонурии. Это связано с тем, что при различных заболеваниях при повышении температуры на фоне анорексии запасы гликогена быстро расходуются, что запускает процессы кетогенеза и связанные с ним нарушения водно-электролитного баланса. В связи с этим положительная реакция на кетоновые тела в моче ребенка до 2 лет является тревожным лабораторным тестом.

У людей, не страдающих сахарным диабетом, кетонурия часто развивается при острых заболеваниях, стрессорных воздействиях или тяжелой физической нагрузке. Приблизительно у 15% госпитализированных больных, не страдающих сахарным диабетом, в моче могут обнаруживаться кетоновые тела.

Положительная реакция на кетоновые тела в моче обнаруживают в утренней порции у 30% беременных женщин (с диабетом или без него), при голодании и после гипогликемии. Раннее обнаружение кетоновых тел при беременности является тревожащим фактором, поскольку кетоацидоз является значимым и неблагоприятным для развития плода.

Референтные значения: в норме концентрации кетоновых тел в моче ниже пределов обнаружения тест-системами (реакция отрицательна).

 

Параметр рН МОЧИ

Почки наряду с легкими являются основными регуляторами кислотно-основного баланса в организме путем контролируемой канальцевой секреции протонов в составе ионов аммония, ионов однозамещенного фосфата, нелетучих органических кислот и реабсорбцией бикарбоната в проксимальных канальцах. Если функция легких сводится в основном к выведению избытка летучих кислот, главным образом, угольной, то участие почек в поддержании кислотно-основного равновесия является более сложным процессом. Они поддерживают относительный избыток бикарбоната во внеклеточной жидкости, что обеспечивает ее участие в поддержании кислотно-основного состояния. Кроме того, почки удаляют избыток протонов, источником которых служат органические кислоты, образующиеся в метаболических реакциях. В регуляции транспорта кислот и оснований в почках принимают участие альдостерон, ангиотензин II, вазопрессин, тиреоидные гормоны и другие биорегуляторы.

В зависимости от характера питания, сохранности функций легких и почек, приема лекарственных препаратов, состояния других органов и регуляторных систем в течение суток рН мочи, как правило, не выходит за значения от 4,5 до 8 ед.

При метаболическом ацидозе вследствие избытка образующихся в метаболических процессах протонов моча приобретает кислую реакцию, при метаболическом алкалозе моча становится щелочной. Преобладание в пище растительных продуктов (плодов цитрусовых и овощей, особенно бобов) способствует поддержанию щелочной реакции мочи. Реакция мочи после еды чаще щелочная, она обусловлена секрецией протонов в просвет желудка. Клюквенный сок — единственный растительный продукт, при приеме которого образуется кислая моча. Диеты, богатые животными белками, способствуют ацидификации мочи.

Первая утренняя порция мочи, как правило, наиболее кислая, значение pH укладывается в интервалы от 5 до 6. Постоянное выделение мочи с рН > 6 в пробах утренней мочи, полученной в строго контролируемых условиях, может указывать на наличие полного или частичного почечного канальцевого ацидоза. В моче pH не может достигать значений, равных 9, ни в нормальных, ни в экстремальных ситуациях, в связи с чем следует провести анализ свежего образца мочи

Референтные значения. Референтные интервалы для pH мочи не могут быть установлены в связи со значительными колебаниями его значения в течение суток. У здоровых людей pH мочи может колебаться в течение суток от 4,8 до 7,6 ед. В утренней пробе мочи, как правило, pH находится в пределах 5–6 ед.

Моча со значением pH <7,0 образуется при: метаболическом ацидозе, диабетическом кетоацидозе, диарее, голодании, уремии; инфекции мочевыводящих путей, вызванной Escherichia coli; дыхательном ацидозе за счет замедления выведения углекислого газа; туберкулезе почек.

Моча со значением pH > 7,0 образуется при:

· инфекции мочевыводящих путей, вызванной бактериями, расщепляющими мочевину (Proteus и Pseudomonas);

· почечном канальцевом ацидозе,

· хронической почечной недостаточности;

· потере желудочного содержимого при неукротимой рвоте;

· дыхательном алкалозе, развивающемся при гипервентиляции за счет «вымывания» углекислоты;

· потере калия (гипокалиемический алкалоз).

Параметр БИЛИРУБИН

В организме человека содержится группа сложных белков, простетической группой которых является гем, представляющий собой комплекс производного порфина — протопорфирина с атомом железа. К ним относятся: гемоглобин, миоглобин и ряд ферментов, катализирующих окислительные реакции: цитохромы, пероксидаза, каталаза. При их расщеплении отделяется геминовая группа, одним из продуктов ее деградации является билирубин.

С мочой здорового человека выделяются минимальные количества билирубина, которые не могут быть обнаружены обычными качественными реакциями. При увеличении концентрации билирубина в моче эти реакции становятся положительными, что расценивается как билирубинурия. В моче человека определяется только конъюгированный билирубин (прямой); неконъюгированный (непрямой) билирубин не способен проходить через неповрежденный почечный барьер. Почечный порог билирубина, т.е. та концентрация конъюгированного билирубина в крови, при которой он появляется в моче, выше 30 мкмоль/л.

Исследовать мочу следует в течение 1 часа после получения, поскольку билирубин в моче нестабилен, особенно при освещении. Если моча окрашена в желто-зеленые или коричневые цвета, емкость следует встряхнуть. Окрашивание пены в желто-зеленый цвет указывает на вероятное присутствие билирубина в моче. Образование окрашенной пены объясняется изменением поверхностного натяжения мочи в присутствии билирубина.

Появление окрашивания сенсорной зоны тест-полоски расценивают как положительный результат. В присутствии билирубина в образце мочи сенсорная зона тест-полоски окрашивается в зависимости от его количества. В реакцию может вступать любая форма билирубина.

Референтные значения: в норме — отрицательный (0–0,02 мг/100 мл или 0–0,34 мкмоль/л).

Ложноотрицательные результаты возникают при:

· высоком содержании аскорбиновой кислоты в моче. Тест следует повторить спустя, по крайней мере, 10 часов после приема последней дозы витамина C;

· повышении уровня нитритов в моче; ненадлежащем хранении мочи при комнатной температуре на свету.

Примечание.

Образец мочи следует хранить при температуре от 2°C до 8°C не более 24 часов в защищенном от попадания света месте.

Параметр УРОБИЛИНОГЕН

Уробилиноген является одним из конечных продуктов распада гема, образующихся под действием бактерий в кишечнике. Около 50% уробилиногена выводится с калом, вызывая его окрашивание. Другая часть всасывается в кишечнике, через портальную систему переносится в печень, где расщепляется до ди- и трипирролов и выводится с желчью. Небольшое количество уробилиногена выводится с мочой. В отличие от билирубина уробилиноген бесцветен.

Концентрация уробилиногена в сыворотке и моче может меняться. При массивном гемолизе вследствие избыточного поступления в кишечник билирубина и образования больших количеств уробилиногена гепатоциты не в состоянии справиться полностью с его разрушением, что приводит к уробилиногенурии. Замедление пассажа желчи по желчевыводящим путям ведет к снижению в моче уровня уробилиногена, поскольку поступление билирубина в кишечник замедляется и образуются меньшие количества уробилиногена. Обнаружение уробилиногенурии при анализе тест-полосками может оказаться важным лабораторным признаком для дифференциальной диагностики желтух, в связи с чем определение уробилиногена в моче продолжают относить к чувствительным методам оценки функции печени. Несмотря на то что тест-полосками уробилиноген может не выявляться, его отсутствие в моче диагностически существенно, поскольку указывает на нарушение пассажа желчи в желчевыводящих путях.

О присутствии уробилиногена в моче судят по изменению окраски аналитической зоны тест-полоски. Интенсивность окраски возрастает по мере увеличения содержания уробилиногена.

Референтные значения: верхняя физиологическая граница уробилиногенурии для данных тест-полосок составляет 17 мкмоль/л (1 мг/дл) 0,2–1,0 ед. Эрлиха. Результат 2,0 ед. Эрлиха/дл требует дальнейшего клинического исследования пациента.

Ложноотрицательные результаты могут быть получены при: длительном хранении мочи, особенно под прямым солнечным светом вследствие окисления уробилиногена.

Ложноположительные результаты могут быть обусловлены: приемом препаратов, окрашивающих мочу в красный цвет, либо приобретающих красный цвет в кислой моче, например феназопиридина; присутствием в моче больших количеств билирубина, приводящего к окрашиванию тестового поля в желтый цвет.

Повышение концентрации уробилиногена в моче наблюдают при повышении нагрузки на печень, вызванной разрушением эритроцитов: гемолитическая анемия, внутрисосудистый гемолиз (гемотрансфузии, острые отравления), пернициозная анемия, малярия, рассасывание массивных гематом.

Параметр КРОВЬ (ЭРИТРОЦИТЫ)

Гематурия является одним из наиболее частых проявлений патологического мочевого синдрома. Гематурия, как физиологическая, так и патологическая, отличается по выраженности окрашивания мочи. При макрогематурии моча может приобретать цвет «мясных помоев», покраснение мочи может выявляться самим пациентом или при визуальном осмотре в лаборатории. При микрогематурии цвет мочи может не меняться, и эритроциты могут быть обнаружены в лаборатории только при микроскопии осадка.

Гематурия может быть кратковременной при пассаже конкремента по мочевыводящим путям или иметь интермиттирующий характер при различных нефропатиях. При почечной колике она может сопровождаться болевым синдромом различной интенсивности, при различных нефропатиях может протекать безболезненно. Гематурия нередко сочетается с протеинурией и выведением солей — уратов, оксалатов.

Совершенствование технологий изготовления тест-полосок позволило выявлять в моче (кроме свободного гемоглобина) гемоглобин, высвобождающийся из неразрушенных эритроцитов, за счет их лизиса в сенсорной зоне. Химические реакции в сенсорной зоне для определения «крови» позволяют выявлять в моче эритроциты (гематурию), свободный гемоглобин (гемоглобинурию) и миоглобин (миоглобинурию). Поскольку в моче здорового человека эти гемопротеиды в норме не обнаруживают, положительный тест на скрытую кровь не исключает их присутствия в тестируемой моче в различных клинических ситуациях.

Транзиторную гематурию часто обнаруживают при: контаминации мочи менструальной кровью; воспалительных заболеваниях мочевыводящих путей (вместе с лейкоцитурией); физической нагрузке у здоровых людей. При «нагрузочной» гематурии появление эритроцитов в моче может быть вызвано нарушением проницаемости клубочков, микротравмами почки при контактных видах спорта;

Большинство современных тест-полосок позволяют определять в моче неповрежденные эритроциты наряду со свободным гемоглобином и миоглобином. Неповрежденные эритроциты в аналитической зоне тест-полоски разрушаются, и высвобождающийся из них гемоглобин приводит к появлению зеленых точек на желтом или оранжевом фоне. Таким образом, присутствие в моче неповрежденных эритроцитов вызывает появление пятнистого зеленого окрашивания аналитической зоны, тогда как свободный гемоглобин и миоглобин вызывают равномерное (однородное) окрашивание от зеленого до темно-синего.

Референтные значения: для тест-полосок чаще приводятся следующие значения:

• эритроциты — до 3 – 4 эритроцитов в мкл принимаются в качестве нормальных значений;

• при выявлении 5 – 10 эритроцитов в мкл необходимо повторить тест, при повторном получении аналогичного результата следует углубленное обследование пациента.

К ложноположительным результатам может привести: загрязнение мочи менструальной кровью; попадание в мочу препарата Бтадин (антисептик для наружного и местного применения).

Ложноотрицательные результаты могут быть обусловлены: недостаточным перемешиванием образца мочи непосредственно перед анализом вследствие осаждения эритроцитов на дне контейнера; высокой концентрацией аскорбиновой кислоты в моче. При необходимости тест повторяют спустя по крайней мере 24 часа после приема последней дозы витамина C.

Параметр ЛЕЙКОЦИТЫ

Под лейкоцитурией понимают повышенное по сравнению с нормой выделение лейкоцитов с мочой. В мочу они могут проникать из очагов инфекции в паренхиме почки, слизистой оболочки мочевыводящих путей, вследствие повреждения капилляров клубочков при гломерулонефритах, а также из очагов, находящихся в тканях, которые окружают почки и мочевыводящие пути. Лейкоцитурия является кардинальным симптомом воспалительного процесса в почках и/или мочевыводящих путях. В ряде случаев лейкоцитурия может быть единственным признаком заболевания и не сопровождаться лихорадкой, дизурией, болевым синдромом. Наличие сопутствующей бактериурии является важным диагностическим симптомом бактериальной инфекции.

Тест для обнаружения лейкоцитов в моче основан на изменении цвета аналитической зоны тест-полоски «лейкоциты» при анализе мочи, содержащей лейкоциты. Изменение окраски обусловлено образованием окрашенного комплекса в реакции, катализируемой группой ферментов, объединенных общим названием «эстераза лейкоцитов, лейкоцитэстераза», содержащихся в лизосомах нейтрофилов. Положительная реакция приводит к изменению окраски от бледно-лиловой до фиолетовой, от следов до интенсивно окрашенной. Интенсивность окраски зоны определяется числом лейкоцитов в моче. Фиксируются значения, отражающие число клеток, от отрицательного до 500 кл/мкл.

Следует помнить, что реакция на эстеразу может быть положительной в образцах мочи, в которых нейтрофилы при микроскопии не были обнаружены. Это имеет место при лизисе нейтрофилов в моче и выходе ферментов (эстераз) из их цитоплазмы. В этом случае следует тщательно провести микроскопию свежего образца мочи с целью поиска неповрежденных лейкоцитов.

Количественные диапазоны определения указаны в инструкции. Результаты визуальной оценки тест-полоски и автоматизированного определения могут не совпадать, что связано с более высокой чувствительностью анализатора по сравнению с глазом.

Ложноположительные результаты могут быть получены при: попадании в мочу выделений из влагалища; приеме лекарственных препаратов, способных изменять цвет мочи и затруднять визуальную оценку результатов (нитрофурантоина, клавулановой кислоты).

Ложноотрицательные результаты наблюдают: в моче с высокой относительной плотностью за счет присутствия глюкозы и белка. В этой среде мембрана лейкоцитов препятствует освобождению из них эстераз; при высокой концентрации в моче аскорбиновой кислоты, цефалексина, гентамицина и тетрациклина.

Параметр НИТРИТЫ

У здорового человека моча в почках и мочевом пузыре, как правило, стерильна, в то же время обнаружение в моче бактерий не обязательно свидетельствует о наличии инфекционного процесса. Появление и размножение бактерий в моче может быть связано с длительным стоянием ее при комнатной температуре до проведения анализа, а также с несоблюдением гигиенических процедур при сборе мочи (попадание бактерий из наружных половых органов).

В мочу бактерии могут попадать из периуретральных тканей, мочеиспускательного канала, влагалища и кишечника. В частности, большинство уропатогенных микроорганизмов, как, например, Е. Coli, обитает в кишечнике, перианальной области, а у женщин в преддверии влагалища и периуретральной области.

Принято считать, что бактерии не способны проникать в мочу через неповрежденные гломерулярные и канальцевые базальные мембраны. В связи с этим физиологической бактериурии не бывает, и к факту обнаружения бактериурии, особенно истинной, следует относиться как к свидетельству инфицирования мочевых путей или повреждения почечного фильтра.

Обнаружение нитритов в моче с помощью тест-полоски основано на использовании химического метода в форме нитрит-теста, что приводит к изменению цвета аналитической зоны тест-полоски «нитриты» при анализе мочи, содержащей бактерии и продукты их жизнедеятельности. Результаты приводят в качественной форме: отрицательный или положительный.

Положительная реакция тест-полоски наблюдается в тех случаях, когда содержание бактерий в моче превышает 105 в мл. Для анализа необходимо использовать свежие образцы мочи, чтобы устранить возможность дополнительного образования нитритов за счет бактериального загрязнения. Предпочтение следует отдавать первой утренней порции мочи, поскольку в ней были созданы оптимальные условия (продолжительное нахождение в мочевом пузыре при температуре тела) для накопления достаточного для реакции количества нитритов. Поступление в организм достаточных количеств нитратов с пищей в составе овощей является условием для их накопления для протекания реакции на нитриты. В противном случае недостаток нитратов в пище может явиться причиной получения ложноотрицательных результатов в нитрит-тесте. Увеличение диуреза и частое мочеиспускание может создать ложную картину отсутствия нитритов, поскольку в моче не успевает образоваться необходимое для реакции количество нитритов. Прием антибиотиков может замедлять рост бактерий и приводить к ложноотрицательным результатам даже в случае их присутствия в моче.

К ложноположительным результатам может привести: присутствие в моче билирубина; прием больших количеств аскорбиновой кислоты; высокая относительная плотность мочи; хранение мочи до исследования в течение нескольких часов при комнатной температуре, приводящее к дополнительному образованию нитритов за счет роста микроорганизмов.

Ложноотрицательные результаты могут быть вызваны: высокой относительной плотностью или присутствием аскорбиновой кислоты (в концентрации 5 мг/дл), кислой реакции мочи (pH 6,0 или ниже); присутствие в моче микроорганизмов, не способных к образованию нитрит-ионов: дрожжей, трихомонад, хламидий; недостаточным для превращения нитратов в нитриты временем нахождения мочи в мочевом пузыре.

!!! Важно помнить: Отрицательный результат теста не должен рассматриваться как бесспорное указание на отсутствие бактериальной инфекции.

МИКРОСКОПИЯ ОСАДКА МОЧИ

При стоянии мочи в течение 1 – 2 часов на дне емкости может образовываться осадок в виде облачка. При длительном ее стоянии в холоде может образоваться осадок из уратов, в тепле — осадок из фосфатов. Величина осадка может варьировать от незначительного (невидимого на глаз) до отчетливо видимого (объемистого). Видимый на глаз осадок должен быть описан в бланке анализа мочи. При описании осадков пользуются следующими формулировками: осадок кристаллический, кирпично-красный; осадок гнойный, объемистый; осадок кровянисто-гнойный, с плотноватыми клочками сероватого цвета и др.

Микроскопический анализ осадка мочи является важной составляющей общего анализа мочи, поскольку помогает аргументировать диагноз при различных заболеваниях почек и мочевыводящих путей. В осадке мочи могут содержаться различные компоненты: эритроциты, лейкоциты, эпителиальные клетки, цилиндры, кристаллы. Их количество и состав может существенно меняться в ходе заболевания, что позволяет клиницисту уточнить диагноз и прогнозировать исход заболевания. Все перечисленные составляющие осадка могут попадать в мочу или образовываться в различных отделах мочевыводящих путей.

АВТОМАТИЗАЦИЯ АНАЛИЗА МОЧИ

· Микроскопия осадка мочи, определение химического состава мочи тест-полосками во многих странах мира является общепринятой процедурой анализа.

· В тоже время, она не в полной мере удовлетворяет современным подходам к выявлению заболеваний почек и мочевыводящих путей, поскольку основные этапы анализа мочи – получение осадка мочи и его микроскопический анализ плохо поддаются стандартизации, требуют высокой квалификации специалиста и являются высоко затратными.

· Мероприятия по стандартизации требований к подготовке пациента, процедуре сбора мочи, использование удобных и простых в обращении емкостей для сбора мочи и транспортировки позволило стандартизировать преаналитической этап и снизить количество ошибок, но не исключить их полностью.

· Это стимулировало разработку полностью автоматизированных систем анализа мочи для постепенного вытеснения трудоемких неавтоматизированных приемов анализа мочи, повышения качества анализа, росту производительности труда и снижению финансовых затрат на данную технологию.

Автоматизированный метод идентификации микроскопических частиц в моче был положен метод анализа их изображения, полученных с помощью видеокамеры.

Схема устройства анализатора мочи:

· Подобный анализатор может работать в автоматическом режиме как автоматизированный микроскоп или в составе полностью автоматизированной системы анализа мочи в паре с анализатором тест-полосок.

· Программное обеспечение позволяет проводить распознавание в автоматическом режиме составляющих мочи и выводить результаты распознавания на экране монитора в двух вариантах:

• в виде изображения обнаруженных элементов (рис. 9.2);

• результатов в количественной (содержание в мкл) или в более привычной полуколичественной форме (п/зр.)

Комментарий.

· В с вязи с тем, что не все производители данных анализаторов их «русифицировали», трактовка результатов анализа требует знания не только самих параметры анализа, но и аббревиатуры на английском языке.

· Следует добавить, что в бланк анализа мочи дополнительно вносятся результаты химического анализа мочи, полученного с использованием тест полосок.

В конечном итоге, бланк анализа мочи после его визирования ответственным специалистом, как правило, выгладит следующим образом:

 

Информация о лечебном учреждении:

Информация о пациенте:

Анализ мочи:

Название теста	Результат	Нормы	Ед. изм.
Цвет	желтый
Прозрачность	мутноватая*	прозрачная
Относительная плотность	1,020	1,015 - 1,025
pH	6,5	5,5 - 7
Белок	0,315*	0 - 0,1	г/л
Глюкоза	-		ммоль/л
Кетоновые тела	не обнаружено
Билирубин мкг/сут	0		мкг/сут
Уробилиноген	3,2	0 - 17	мкмоль/л
Нитриты	-	-
Клетки плоского эпителия	небольшое кол-во	небольшое кол-во, единичные, единичные в препарате	п/зр
Клетки переходного эпителия	не обнаружено		п/зр
Эпителий почечный	не обнаружено		п/зр
Лейкоциты	1-2	0 - 4	п/зр
Неизмененные эритроциты	5-15		п/зр
Измененные эритроциты	не обнаружено		п/зр
Цилиндры гиалиновые	не обнаружено		п/зр
Цилиндры зернистые	не обнаружено		п/зр
Цилиндры восковидные	+		п/зр
Слизь	+	++, +	п/зр
Бактерии	отсутствуют	отсутствуют	п/зр
Дрожжеподобные грибы	отсутствуют	отсутствуют	п/зр
Неорганиз. осадок мочи (соли кол-во)	отсутствуют	оксалат кальция, отсутствуют, аморфные фосфаты	п/зр
Простейшие	отсутствуют	отсутствуют	п/зр

*) используется для обозначения «патологических» результатов

 

ОБЩИЙ АНАЛИЗ МОЧИ

· (синонимы: клинический анализ мочи, complete urinalysis в англоязычной литературе) представляет собой набор тестов, предназначенных для анализа физико-химического и микроскопического состава мочи.

· Совокупность результатов общего анализ мочи позволяет оценить не только состояние органов мочевыводящей системы, но и выявить нарушения ряда обменных процессов при различных заболеваниях.

· Технология "анализ мочи общий" выполняется с целью диагностики различных заболеваний, при профилактических обследованиях, для мониторинга течения болезни и эффективности лечения.

• Моча человека на протяжении многих веков была единственной доступной для анализа биологической жидкостью.

Моча человека на протяжении многих веков была единственной доступной для анализа биологической жидкостью, в связи с чем врачи пристально изучали ее внешние характеристики (включая цвет, консистенцию, осадок, запах и объем) — процесса, получившего название «уроскопия».