Осмотическое давление спермиев, депрессия спермы

Осмос и осмотическое давление

Осмос – движение растворенных частиц через полупроницаемую мембрану или между растворами разной концентрации или между растворителем и растворяемой жидкостью.

Осмотическое давление – давление, при котором происходит осмос. Выражается в атмосферах.

Величина осмотического давления в среднем (в половых клетках, плазме и т.д.) = 7 атм. (6,95 атм.).

1. Изотоническая среда: количество растворенных веществ в спермии = количеству растворенных веществ за его пределами.

2. Гипотоническая среда: количество растворенных веществ в спермии выше, в плазме ниже.

3. Гипертоническая среда: количество растворенных веществ в плазме выше, в спермии ниже.

Правила приготовления искусственных сред:

1) Растворитель – дистиллированная или бидистиллированная вода;

2) Все компоненты строго взвешивают.

2 подхода:

1) Изотоничность приготовленного раствора можно определить криоскопически. Используют термометр Бекмана;

2) Биологический способ (оптимальный, более точный).

Криоскопический способ расчета

В биологии для расчета осмотического давления используется «депрессия». Депрессия – разница между точками замерзания дистиллированной воды и биологического объекта.

Дистиллированная вода переходит в твердое состояние при температуре -4,72 ̊С. Точка замерзания спермы = -4,12 ̊С. Величина депрессии = 0,60 (для быка). У барана 0, 64, жеребец 0, 57, хряк 0,62.

Если взять 1 г/мол (грамм-молекулу) любого вещества и растворить её в 22, 4 л дистиллированной воды, величина давления = 1 атм.

Если взять 1 г/мол любого вещества, растворить в 1 л дистиллированной воды, то величина давления будет = 22,4 атм.

Если 1 г/мол любого вещества растворить в 1 литре воды, то величина депрессии будет = -1,86 ̊

Расчет изотоничности для углеводов.

C₆H₁₂O₆: 6*12 + 12 + 16*6 = 180 (молярная масса)

180 г – 22,4 атм. (давление 180 г глюкозы) 7 атм. – давление половой клетки.

Чтобы получить изотонический раствор глюкозы, нужно взять 60 г глюкозы (т.е. 6% раствор).

180 г - -1,86 ̊ (депрессия 180г глюкозы в 1 литре воды)

Депрессия половой клетки = -0,57.

Чтобы получить изотоничный раствор, нужно взять примерно 60 г глюкозы (т.е. 6% раствор).

Расчет изотоничности для электролитов.

При этом учитывается I (коэффициент изотоничности) – указывает, на какое количество ионов диссоциирует данный электролит.

NaCl. Диссоциация на Na⁺ и Cl^-. Коэффициент изотоничности (i) = 2

Чем на большее количество ионов диссоциирует данное вещество, тем выше величина депрессии.

NaCl. Молярная масса = 23+35 = 58

58 г – 22,4 атм.

Х = 7 атм.

Х = 19г (количество растворяемого вещества), т.е. 1,9% раствор.

19/i = 9,5 (так как депрессия зависит от коэффициента изотоничности.

Биологический метод

Базируется на криоскопическом методе, после соответствующих выполненных расчетов в штатив устанавливают 7 чистых теплых пробирок. 1 мл 0,95% раствора хлорида натрия добавляют в среднюю пробирку, столько же к изучаемой сперме. В правую пробирку от средней наливается 0,94% раствор, в следующие 0,93 и 0,92%. Влево: 0,96, 0,97, 0,98%. Определяют активность спермы, штатив помещают в температуру +2-4 ̊С. Определяют активность спермы в растворах с разной концентрацией. Вычисляют тот, в котором активность выше всего.

На теплое предметное стекло с промежутком в 1 см наносят 3 капли спермы. К 1й добавляется дистиллированная вода, ко второй 1% раствора хлорида натрия, к третьей капле 3% раствор. Смотрят, в котором спермии дольше живут.

Виды искусственных сред для разбавления спермы, их характеристика. Биологический контроль разбавителей. Определение абсолютного показателя переживаемости спермиев

Разбавители спермы быка

Синтетическая среда для разбавления и хранения спермы быка при температуре 2-5 ºС в течение 72 часов: ГЦЖ (вода дистиллированная 100, глюкоза 3, цитрат натрия 1,4, желток куриного яйца 20, спермосан-3 75-90 тыс. ед.).

Синтетическая среда для разбавления и замораживания спермы быка в форме гранул: лактоза, желток куриных яиц, глицерин, спермосан-3, вода дистиллированная

Синтетическая среда лактозо-фруктозо-раффинозо-магниево-глицерино-желточная (ЛФРМГЖ) для разбавления и замораживания спермы быка в полипропиленовых соломинках: Лактоза, Фруктоза, Раффиноза пятиводная, Магний сернокислый, Глицерин, Желток куриных яиц, Вода дистиллированная.

Синтетические среды N 1 и 2 для замораживания спермы быка в облицованные гранулы

СРЕДА N 1

11% раствор лактозы или сахарозы, Желток куриных яиц, Глицерин.

СРЕДА N 2

Лактоза или сахароза, Натрий лимоннокислый трехзамещенный пятиводный, Глицерин, Вода дистиллированная.