Гистология для практической медицины:

Введение в гистологию

1. Предмет и задачи гистологии, связь с медико-биологическими и клиническими дисциплинами. Значение гистологии для теоретической и практической медицины.

Гистология -наука, изучающая закономерности развития, строения и функции тканей, их взаимосвязь в живых организмах.

Предмет: клеточные комплексы и их взаимодействия друг с другом, с межклет-й и внешней средой.

Задачи сформ. Рудольф Вирхов.

Гистология изучает:

· Закономерности строения, ф-й, разв. тканей.

· Межкл и межтквзаимод-е, роли нервной, эндокринной, иммунной систем в их регуляции

· Исследование возрастных изменений тканей

· Реактивности и адаптации тканей и клеток при экстренных воздействиях

· Регенерация тканей в норме и патологии

· Системы «мать-плод» и особенностей эмбриогенеза человека

· Разработка общей теории предмета, отражающей эволюцию тканей и закономерностей гистогенеза

Гистология тесно связана с цитологией, т.к. клетка – структурная единица ткани. Гистология тесно связана с эмбриологией – наукой о развитии зародыша.

 Связь гистологии с медико –биологическими и клиническими дисциплинами:

· С анатомией – изучение микроскопического строения органов;

· с физиологией – изучение функции клеток и тканей (гистофизиологическая направленность);

· с биохимией и биологией клетки – изучение химизма клетки, локализацию химических соединений, обменных процессов; с генетикой – изучение структуры ядра, хромосом, экспрессии генов на клеточном уровне;

·  с иммунологией – изучение иммунокомпетентных клеток; гистология – фундамент для клинических дисциплин.

Гистология для практической медицины:

· Цитодиагностика – изучение мазков крови, костного мозга, слюны, спинно-мозговой жидкости, мочи, влагалищных мазков и т.д.

· Биопсия – прижизненное взятие ткани для гистологического исследования с целью диагностики заболеваний.

Основные принципы и этапы приготовление гистологических препаратов. Методы выявления нервных элементов и эластической ткани. Гистохимия. Особенности приготовления препаратов эмбрионов.

Цитодиагностика – изучение мазков крови, костного мозга, слюны, спинно-мозговой жидкости, мочи, влагалищных мазков и т.д.

Биопсия – прижизненное взятие ткани для гистологического исследования с целью диагностики заболеваний.

Изготовление гистологических препаратов складывается из следующих основных этапов:

1. Взятие и фиксация биологических объектов;

2. Промывка, обезвоживание и заливка биологических объектов;

3. Приготовление срезов;

4. Окрашивание и заключение срезов.

       1 - взятие и фиксация биологических объектов.

Главное требование: максимальное сокращение сроков взятия материала, минимальное травмирование тканей и создание оптимальных условий для фиксации.

Фиксация предупреждает развитие посмертных изменений в тканях, прекращая в них биохимические процессы. В основе действия любого фиксатора лежат сложные физикохимические процессы, в первую очередь, коагуляция (свертывание) белков.

В гистологической практике применяют различные фиксаторы: простые, содержащие один компонент (формалин, спирт, ацетон) и сложные, содержащие два и более компонентов (жидкость Карнуа: абсолютный спирт, хлороформ, ледяная уксусная кислота; жидкость Ценкера: двухромовокислый калий, сернокислый натрий, сулема, формалин, дистиллированная вода).

Методы цитологических и гистологических исследований. Виды микроскопии: световая (в светлом поле, ультрафиолетовая, метод темного поля, люминесцентная, фазово-контрастная, интерференционная, поляризационная), электронная (трансмиссионная, сканирующая, высоковольтная). Метод замораживания – скалывания. Культура тканей, микрургия. Клеточная инженерия, понятие о гетерокарионе, гибридизация.

Цитодиагностика – изучение мазков крови, костного мозга, слюны, спинно-мозговой жидкости, мочи, влагалищных мазков и т.д.

Биопсия – прижизненное взятие ткани для гистологического исследования с целью диагностики заболеваний.

Культура тканей - выращивание тканей в искусственной среде.

Микрургия – микроманипуляции при исследовании микроскопических объектов Клеточная инженерия - создание клеток нового типа на основе их гибридизации, реконструкции и культивирования.

Гетерокарион - клетка, содержащая два или более ядер, имеющих разные генотипы. Гибридизация- — процесс образования или получения гибридов, в основе которого лежит объединение генетического материала разных клеток в одной клетке.

Световая микроскопия - Основной метод исследования тканей и клеток, использующий спектр видимого света. В световом микроскопе для освещения объекта используются лучи видимого спектра.

Широкопольная микроскопия - Поле наблюдения равномерно и широко освещается с помощью конденсора. Изображение является результатом различного поглощения света участками окрашенного гистологического среза.

Темнопольная микроскопия - Для изучения живых клеток и бактерий Прямые лучи не проходят в объектив, а только периферические лучи, которые формируются диафрагмой или специальным темнопольным конденсором и падают на препарат под косыми углами Освещение сбоку на фоне темного поля Светятся мельчайшие частицы (0,2 мкм)       

Ультрафиолетовая микроскопия - Используется ультрафиолетовый спектр длиной волны 250 нм Разрешающая способность порядка 0,1 мкм Используется для цитофотометрии и флюоресцентной микроскопии

Флуоресцентная (люминесцентная) микроскопия - Объект облучают ультрафиолетовыми лучами, которые возбуждают флуоресцентные вещества к излучению света видимой частью спектра. Позволяет судить о химическом составе вещества.

Различают:

· Первичную флуоресценцию – ею обладают некоторые пигменты (хлорофиллы), витамины (А, В2)

· Вторичную флуоресценцию – после обработки специальными красителями флуорохромами: акридиновый оранжевый, флуоресцин, аурамин, родамин и др.)

Фазово-контрастная микроскопия - При прохождении света через окрашенные объекты изменяется амплитуда световой волны, а при прохождении света через неокрашенные – фаза световой волны, что и используют для получения высоко контрастного изображения.

Интерференционная микроскопия - Для изучения живых клеток, их массы, концентрации веществ в них.

Принцип работы: световой пучок расщепляется комплексом линз, один пучок идет через гистопрепарат, другой мимо. Затем оба пучка собираются, и возникает интерференционное изображение.

Поляризационная микроскопия - Поляризационная микроскопия позволяет изучать ультраструктурную организацию тканевых компонентов на основе анализа анизотропии и/или двойного лучепреломления.

 

В электронных микроскопах используют пучок электронов

Трансмиссионная (просвечивающая) электронная микроскопия: Подготовка объекта фиксация в глутаральдегиде и OSO4 дегидратация в спиртах возрастающей крепости; заливка в эпоксидные смолы (эпон, аралдит) изготовление ультратонких срезов толщиной 0,05 – 0,1мкм на ультратоме с помощью алмазных или стеклянных ножей;размещение на медной сетке и контрастирование солями свинца

Сканирующая электронная микроскопия: Дает трехмерное объемное изображение Объект фиксируют, высушивают в вакууме, напыляют тонким слоем золота Тонкий пучок электронов пробегает по поверхности золотой реплики, отражается, информация передается на электронно-лучевую трубку.

Высоковольтная электронная микроскопия: Ускоряющее напряжение 1- 3 млн В Позволяет исследовать срезы толщиной 1 -10 мкм, более высокая разрешающая способность.

Метод замораживания – скалывания: Клетки замораживают при температуре жидкого азота (196О С) в присутствии криопротектора и используют для изготовления сколов. Плоскости скола проходят через гидрофобную середину двойного слоя липидов. Обнажённую внутреннюю поверхность мембран оттеняют платиной, полученные реплики изучают в сканирующем ЭМ

Метод замораживания – травления: Сходен с предыдущим методом. Но после скалывания перед напылением платиной объект помещают в вакуум при T= -100оС. Удаляются кристаллы льда и обнажаются новые детали, невидимые при простом замораживании – скалывании.

 

История развития гистологии. Зарубежные гистологические школы 19 века (Пуркине, И. Мюллер, С. Рамон-и-Кахал и др.) Развитие гистологии в России – Петербургская, Московская, Киевская, Казанская, Томская гистологические школы. Вклад в развитие нейрогистологии профессоров Ф. С. Догеля и А. Е. Смирнова.

В истории учения о тканях и микроскопическом строении органов выделяют три периода:

· l -й - домикроскопический (продолжительностью около 2000 лет),

· 2-й микроскопический (около 300 лет),

· 3-й - современный, сочетающий достижения в области электронной микроскопии, иммуноцитохимии, цитофотометрии и др. (с середины XX столетия).

Первый двухлинзовый несовершенный микроскоп сконструировали братья Ганс и Захарий Янсоны в 1590 г. Р. Гук (1665) впервые описал строение коры пробкового дуба и стебля растений и ввел в науку термин клетка для обозначения ячеек, мешочков, из которых они состояли. М. Мальпиги и Н. Грю (1671-1682) описали микроструктуру некоторых органов растений. В период с 1676 по 1719 г. А. Левенгук открыл красные кровяные тельца, некоторых простейших животных,сперматозоиды. Иоганнес Мюллер

 

Цитология

Клетка как структурно-функциональная единица ткани. Определение. Общий план строения. Клеточная теория. Неклеточные структуры.

Цитология - это наука изучающая строение наименьшей структурной единицы всего живого,

самовоспроизводящейся и объединяющейся в ткани при развитии многоклеточных организмов.

Поэтому любые нарушения в человеческом организме имеют в своей основе патологию клеток и

их производных.

Клетка – самовоспроизводящаяся элементарная живая система, ограниченная плазмолеммой,

содержащая ядро и цитоплазму.

Основные постулаты клеточной теории:

· клетка является наименьшей единицей живого;

· клетки гомологичны по строению;

· размножение клеток происходит путём деления;

· многоклеточный организм представляет собой ансамбли клеток и их производных, объединённых в системы тканей.

Типичная клетка эукариот состоит из трех составных частей – оболочки, цитоплазмы и ядра. Основу клеточной оболочки составляетплазмалемма (клеточная мембрана) иуглеводно-белковая поверхностная структура.

Плазмалемма эукариот отличается от прокариотической меньшим содержанием белков.

Углеводно-белковая поверхностная структура. Животные клетки имеют небольшую белковую прослойку -гликокаликс.

Цитоплазма состоит изгиалоплазмы (основное вещество цитоплазмы),органоидов и включений. В гиалоплазме содержатся 3 типа органоидов:

· двумембранные (митохондрии, пластиды);

· одномембранные (эндоплазматическая сеть (ЭПС), аппарат Гольджи, вакуоли, лизосомы);

· немембранные (клеточный центр, микротрубочки, микрофиламенты, рибосомы, включения).

Гиалоплазма представляет собой коллоидный раствор органических и неорганических соединений.

 Митохондрии («энергетические станции клеток»). Наружная мембрана гладкая, внутренняя имеютскладки – кристы. Между внешней и внутренними мембранами находится матрикс. В матриксе митохондрий содержатся молекулы ДНК, мелкие рибосомы и различные вещества.

Эндоплазматическая сеть представляет собой разветвленную систему трубочек, каналов и полостей. Различаютнегранулярную (гладкую) и гранулярную (шероховатую) ЭПС.

 Аппарат Гольджи состоит из плоских мембранных мешочков и пузырьков. В животных клетках аппарат Гольджи выполняет секреторную функцию.

Лизосомы – мелкие органоиды сферической формы, образованы мембраной, внутри которой содержатся ферменты, гидролизующие белки, нуклеиновые кислоты, углеводы, жиры.

 Клеточный центр. Функцией клеточного центра является управление процессом деления клеток.

 Микротрубочки и микрофиламенты в совокупности формируют клеточный скелет животных клеток.

Рибосомы эукариот более крупные (80S).

Включения – запасные вещества, ивыделения – только в растительных клетках.

Ядро – важнейшая часть эукариотической клетки. Оно состоит из ядерной оболочки, кариоплазмы, ядрышек, хроматина.

Функции ядра: в ядре сосредоточена информация о наследственных признаках организма (информативная функция); хромосомы передают признаки организма от родителей к потомкам (функция наследования); ядро согласует и регулирует процессы в клетке (функция регуляции).

Функции филаментов

1) образуют цитоскелет

2) участвуют во внутриклеточном движении(перемещении митохондрий, рибосом, вакуолей, втгиваниецитолеммы при фагоцитозе

3) участвуют в амебовидном движении клеток.

Микротрубочки тоже образуют в клетке густую сеть. Сеть начинается от перинуклеарной области (от центриоли) и радиально распространяется к плазмолемме. В том числе микротрубочки идут вдоль длинной оси отростков клеток.

Стенка микротрубочки состоит из одного слоя глобулярных субъединиц белка тубулина. На поперечном срезе - 13 таких субъединиц, образуют кольцо. В неделящейся (интерфазной) клетке создаваемая микротрубочками сеть играет роль цитоскелета, поддерживающего форму клетки, а также играют роль направительных структур при транспорте веществ. При этом транспорт веществ идёт не через микротрубочки, а по перитубулярному пространству. В делящихся же клетках сеть микротрубочек перестраивается и формирует т.н. веретено деления. Оно связывает хроматиды хромосом с центриолями и способствуют правильному расхождению хроматид к полюсам делящейся клетки.

Клеточный центр (центросома) состоит из центриолей и связанных с ними микротрубочек — центросферы

Центриоли. Кроме цитоскелета, микротрубочки образуют центриоли.

Состав каждой из них отражается формулой: (9 х 3) + 0. Центриоли располагаются парой – под прямым углом друг к другу. Такая структура называется диплосомой. Вокруг диплосом - т.н. центросфера, зона более светлой цитоплазмы в ней содержатся дополнительные микротрубочки. Вместе диплосома и центросфера называются клеточным центром. В неделящейся клетке – одна пара центриолей. Образование новых центриолей (при подготовке клетки к делению) происходит путём дупликации (удвоения): каждая центриоль выступает в качестве матрицы, перпендикулярно которой формируется (путём полимеризации тубулина) новая центриоль. Поэтому, как в ДНК, вкаждойдиплосоме одна центриоль является родительской, а вторая - дочерней.

Рибосома

25x20x20 нм

Состоит из 2 субъединиц (б и м). Каждая из них построена из рибонуклеопротеидного тяжа, где рРНК взаимодействует с разными белками и образует тело рибосомы.

Могут быть единичными или в комплексе (полисомы)

Могут свободно располагаться в гиалоплазме или быть связанными с мембранами ЭПС.

· Свободные рибосомы обеспечивают синтез белков на собственные нужды клетки.

· Связанные рибосомы-«на экспорт» (нужды организма).

 

Блок Кровь.Кроветворение.

Ткани системы крови являются производными мезенхимы – эмбриональной соединительной ткани, являющейся источником развития всех тканей внутренней среды организма.

 

Мезенхима представлена клетками мезенхимоцитами:

· веретеновидной и звездчатой формы с крупным светлым ядром

· слабо базофильной цитоплазмой.

· Клетки связаны между собой цитоплазматическими отростками, образуя рыхлую сеть, внутреннее пространство которой заполнено студенистым межклеточным веществом.

 Кровь как система состоит из жидкого циркулирующего компонента – периферическая кровь – и центрального тканевого компонента – органы кроветворения (красный костный мозг, тимус, селезенка, лимфатические узлы).

 

Периферическая кровь – это ткань мезенхимного происхождения, состоящая из межклеточного вещества – плазмы – и взвешенных в нем форменных элементов – эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов.

Плазма:

ü составляет 55–60% объема крови

ü  состоит на 90% из воды, 1% – неорганических веществ и 9% – органических веществ, из которых 6% приходится на белки.

Функции крови

· транспортная (перенос питательных веществ, кислорода, углекислого газа, продуктов метаболизма, гормонов, ионов);

· защитная (уничтожение микроорганизмов, участие в иммунных и воспалительных реакциях);

· поддержание гомеостаза (регуляция температуры тела, осмотического давления, кислотно-щелочного состояния);

·гемокоагуляция (свертывание крови).

 

Белки плазмы

1. Альбумины находятся в связи с липидами, углеводами, билирубином, витамином А. Образуются в печени и играют роль в поддержании коллоидно-осмотического давления крови.

 2. Глобулины – белки, среди которых выделяют 3 фракции: a,b и g. a- и b-глобулины переносят ионы металлов и липиды в форме липопротеинов, а g-глобулины представляют собой фракцию антител (иммуноглобулинов), которые синтезируются плазматическими клетками и участвуют в гуморальном иммунитете.

 3. Фибриноген – образуется в печени и участвует в свертывании крови.

 

 Форменные элементы крови:

Эритроциты

· Безъядерные форменные элементы крови, содержание которых в крови зависит от пола.

· Их содержание у мужчин – 4,3–5,3х1012/л; у женщин – 3,9–4,5х1012/л

· Продолжительность жизни – около 120 суток.

·  В периферическом кровотоке встречаются 3 вида эритроцитов: юные (ретикулоциты), зрелые и стареющие.

· Ретикулоциты поступают в кровоток из красного костного мозга и составляют около 1% всех циркулирующих эритроцитов крови. Они содержат остатки органелл предыдущего клеточного вида эритроидногодифферона (рибосомы, митохондрии, комплекс Гольджи).

· При окрашивании бриллиантовым крезиловым синим в клетке в результате взаимодействия красителя с рибосомной РНК формируетсябазофильнаясетеобразная структура, отсюда название – ретикулоцит

·  Зрелые эритроциты имеют форму двояковогнутого диска. Органеллы отсутствуют.

· Средний диаметр – 7–8 мкм.

·  Если диаметр меньше 6 мкм – клетка называется микроцит, если больше 9 мкм – макроцит, больше 10 мкм – мегалоцит.

·  Изменение размеров эритроцитов получило название анизоцито з. Такие формы встречаются при дефиците витамина В12, гемоглобинопатиях.

·  При старении и патологических процессах происходит изменение формы эритроцитов, что называется пойкилоцитозом.

· Форма может меняться двумя способами:

 1. При кренировании образуются выпячивания плазмолеммы (в виде шипов), в результате дискоциты превращаются в эхиноциты, а затем в сфероциты.

 2. Во втором случае двояковогнутая форма клетки меняется на куполообразную. Образуются так называемые стоматоциты. При патологии могут появляться аномальные формы эритроцитов. Например, эритроциты серповидной формы появляются при серповидноклеточной анемии у больных с генетическими нарушениями в b-цепи гемоглобина.

· Разрушение стареющих эритроцитов происходит в основном в селезенке и частично в печени и красном костном мозге. Такие клетки распознаются макрофагами и фагоцитируются.

· При разрушении гемоглобина образуются пигменты билирубин и гемосидерин, содержащий железо. Это железо связывается с трансферрином и захватывается макрофагами красного костного мозга, которые отдают железо вновь образующимся эритроцитам.

· А билирубин транспортируется в печень, откуда в составе желчи поступает в кишечник.

·  Состав эритроцитов: 60% – вода, 30–35% – гемоглобин, 5–7% – негемоглобиновые белки, жиры, углеводы и минералы.

·  Оболочка эритроцита является селективным барьером, через который осуществляется обмен между клеткой и плазмой крови. Она содержит 49% белков, 43% жиров и 8,5% углеводов.

В мембране эритроцитов идентифицировано несколько десятков различных белков. Самые известные из них: Спектрин

· образует на внутренней поверхности плазмолеммы сетку, которая придает мембране эластичность и упругость.

Гликофорин:

· является интегральным белком, пронизывающим всю толщу мембраны.

· С внешней стороны мембраны он связан с олигосахаридными остатками сиаловой кислоты, которые содержат 51 ионизированные карбоксильные группы, придающие эритроциту отрицательный заряд.

Полоса 3:

· образует водные ионные каналы – для анионов: Cl--, HCO3 --, OH - (для катионов мембрана эритроцитов практически непроницаема).

В плазмолемме имеются мембранные гликопротеиды, обладающие антигенными свойствами, которые у разных людей могут различаться:

· На поверхности эритроцитов имеются агглютиногены А и В, а в плазме – агглютинины α и β. Исходя из структуры одного из антигенов, выделяют 4 группы крови по системе АВО: I – отсутствуют агглютиногены, есть агглютинины α и β, II – агглютиноген А и агглютинины β, III – агглютиноген В, агглютинин α, IV – агглютиногены А и В, нет агглютининов.

·  Если в крови одновременно окажутся «чужой», напримерагглютиноген А, и агглютинин α, то произойдет реакция агглютинации (склеивания) эритроцитов.

·  По структуре еще одного антигена (резус-фактора) людей делят на резусотрицательных (Rh-) и резус-положительных (Rh+). У большинства людей (86%) этот агглютиноген присутствует на поверхности эритроцитов. Но при переливании Rh+ крови Rh- реципиенту образуются Rh-антитела, которые вызывают гемолиз эритроцитов.

 В цитоплазме эритроцитов содержится специфический эндогенный пигмент – гемоглобин, составляющий 95% от всех белков эритроцитов.

Содержание гемоглобина у мужчин – 140–165 г/л, у женщин – 120–138 г/л.

 Гемоглобин – это дыхательный пигмент, с помощью которого осуществляется транспорт кислорода из легких в ткани.

· Он относится к сложным белкам хромопротеидам.

· Формула гемоглобина состоит из двух частей: гем – содержит 2-валентное железо (4%) – и глобин – белок типа альбумина (96%).

Выделяют 3 типа гемоглобина, которые различаются составом аминокислот глобиновой части.

1. Примитивный гемоглобин P:

· характеризуется повышенной щелочной резистентностью и малой электрофоретической подвижностью.

· Находится в эритроцитах зародыша до 18- недельного возраста.

2. Фетальный гемоглобин F:

· находится в основном в эритроцитах плода.

·  К моменту рождения он составляет около 80%, а у взрослого человека его содержание – до 2%.

3. Гемоглобин A (от англ. «adult» – взрослый) – основной тип гемоглобина у взрослого человека.

В зависимости от присоединенных химических элементов различают следующие виды гемоглобина:

1. Оксигемоглобин образуется при связывании гемоглобина с кислородом. Транспортируется ко всем органам и тканям, где отдает кислород.

2. Карбоксигемоглобин образуется в тканях при соединении гемоглобина с углекислым газом.

3. Метгемоглобин образует с кислородом постоянный комплекс, что нарушает отдачу кислорода в ткани. Образование метгемоглобина может быть наследственным, а также приобретенным в результате отравления нитратами, нитритами и сульфаниламидами. У курильщиков в крови определяется до 10% этого вида гемоглобина.

Другой важный белок цитоплазмы – это фермент карбоангидраза. Она катализирует обратимое превращение значительной части СО2 (не связавшейся с гемоглобином) в более удобную транспортную форму – гидрокарбонатный ион.

 

 Лейкоциты

· Представляют собой округлые клетки крови, характеризующиеся наличием ядра.

· Их содержание у взрослых – 4,8–7,7х109 /л, у новорожденных детей – 10–30х109 /л

· По морфологическим признакам лейкоциты подразделяются на 2 группы:

Ø зернистые лейкоциты (гранулоциты) У зернистых лейкоцитов при окраске крови по РомановскомуГимзе (азур II – эозином) в цитоплазме выявляются специфическая зернистость и сегментированные ядра. В соответствии с окраской специфической зернистости различают нейтрофильные, эозинофильные и базофильные гранулоциты. Они также содержат неспецифическую азурофильную зернистость (первичные лизосомы).

Ø незернистые – агранулоциты.. К агранулоцитам относятся лимфоциты, моноциты. Они содержат азурофильную зернистость и несегментированные ядра.

Ø ВНИМАНИЕ! ГРАНУЛЫ И АЗУРОФИЛЬНУЮ ЗЕРНИСТОСТЬ СОДЕРЖАТ ВСЕ ВИДЫ ЛЕЙКОЦИТОВ!

Все лейкоциты в цитоплазме содержат сократительные белки: актин, миозин. В связи, с чем способны выходить из кровеносных сосудов в окружающую ткань и участвовать в защитных реакциях.

Нейтрофилы:

·палочкоядерные, содержание в кровотоке – 2–5%;

· сегментоядерные, содержание в кровотоке – 43–59%.

В мазке размеры нейтрофилов достигают 10–12 мкм, а в капле крови – 7–8 мкм.

ü Продолжительность их жизни – около 8 суток.

ü Цитоплазма оксифильна, содержит единичные митохондрии, включения гликогена, в ней практически отсутствуют белоксинтезирующие органеллы, поэтому они не способны к длительному функционированию.

ü Зернистость мелкая, синевато-розового цвета (окрашивается основными и кислыми красителями, отсюда название – гетерофильный или нейтрофильный).

ü  Специфические гранулы диаметром содержат бактериостатические и бактерицидные вещества – муцин, фагоцитин, щелочную фосфотазу, лактоферрин.

ü Азурофильные гранулы (первичные лизосомы) диаметром 0,4–0,8 мкм содержат протеолитические ферменты – кислую фосфотазу, b -глюкуронидазу, миелопероксидазу, пероксидазу, лизоцим, арилсульфатазу.

Палочкоядерные нейтрофилы:

ü являются более юной формой, они имеют S-образное ядро,

 Сегментоядерные нейтрофилы:

ü зрелая форма

ü их ядро образует от 3 до 5 сегментов.

В нейтрофилах женщин один из сегментов ядра содержит вырост, напоминающий барабанную палочку – тельце Барра.

 

Основная функция нейтрофилов – фагоцитоз. И.И. Мечников назвал эти клетки микрофагами.

 

Эозинофилы

ü Гранулосодержащие лейкоциты, содержание которых в периферическом кровотоке – 1–5%,

ü диаметр в мазке крови – 12–14 мкм, а в капле свежей крови – 9–10 мкм.

ü Продолжительность жизни – 8–14 дней.

ü В течение нескольких дней после образования они остаются в красном костном мозге, а затем выходят в кровоток и циркулируют от 3 до 8 часов, после чего большинство из них мигрирует в ткани, контактирующие с внешней средой (слизистые оболочки дыхательных, мочеполовых путей, кишечника).

ü Ядро эозинофила представлено двумя крупными сегментами, соединенными тонкой перемычкой, из-за чего его часто сравнивают с пенсне.

ü  Цитоплазма слабо базофильна, в ней находятся хорошо развитая гранулярная эндоплазматическая сеть, небольшое количество цистерн гладкой эндоплазматической сети, скопления рибосом, отдельные митохондрии и включения гликогена.

ü Эозинофилы имеют мембранные рецепторы Fc-фрагментов Ig G, Ig M, Ig E,компонентов комплемента.

ü В цитоплазме эозинофила присутствуют крупные и мелкие специфические гранулы с выраженной ацидофилией.

ü  Крупные гранулы размером 0,5–1,5 мкм имеют овоидную форму и содержат удлиненный кристаллоид, состоящий в основном из антипаразитарного агента – главного щелочного белка.

ü  В гранулах также присутствуют нейротоксин, пероксидаза эозинофила, гистаминаза, фосфолипаза D, коллагеназа, цинк.

ü Мелкие гранулы содержат такие вещества, как пероксидаза, арилсульфатаза, кислая фосфотаза и др.

ü Специфической функцией эозинофилов является антипаразитарная, благодаря содержимому гранул они уничтожают личинки паразитов, попавшие в кровь или органы.

ü Кроме того, эти клетки принимают участие в предотвращении аллергических реакций.

ü  Данный эффект реализуется посредством снижения содержания гистамина в тканях.

ü  Эозинофилы разрушают гистамин с помощью фермента гистаминазы, вырабатывают фактор, тормозящий дегрануляцию тучных клеток, связывают гистамин с помощью рецепторов плазмолеммы и, наконец, фагоцитируютгистаминсодержащие гранулы тучных клеток.

ü  Также эозинофилы обладают невыраженной, по сравнению с нейтрофилами, фагоцитарной активностью.

 

Базофилы

ü Самые немногочисленные гранулоциты, составляют 0–1% от общего количества лейкоцитов,

ü  их диаметр в мазке – 10–12 мкм, в капле крови – 7–8 мкм.

ü В периферическом кровотоке базофилы находятся 1–2 суток.

ü  способность к амебоидному движению ограничена.

ü Базофилы содержат уплотненное слабосегментированное ядро (часто изогнуто в виде буквы S).

ü В цитоплазме имеются все виды органелл, свободные рибосомы, гликоген.

ü В цитоплазме находятся два вида гранул: специфические и неспецифические (азурофильные).

ü Специфические гранулы довольно крупные (0,5–1,2 мкм), имеют разнообразную, чаще овальную форму с плотным содержимым и окрашиваются метахроматически (не в цвет красителя), палитра цветов – от красноватофиолетовых до интенсивно фиолетовых оттенков.

ü В гранулах содержатся гепарин, гистамин, медиаторы воспаления (например, медленно реагирующий фактор анафилаксии, фактор хемотаксиса эозинофилов).

ü  Секретируемый клеткой гепарин связывает циркулирующий в крови антитромбин III, резко усиливая его противосвертывающую активность.

ü  Гистамин вызывает сокращение гладкой мускулатуры, гиперсекрецию слизи и увеличение проницаемости сосудов с развитием отека.

ü В плазмолемму базофилов встроены рецепторы к FсфрагментамIg E, играющие важную роль в аллергической реакции в ответ на введение антигена (аллергена).

ü Активированные базофилы, покидая кровоток, мигрируют в очаги воспаления и участвуют в аллергических реакциях.

Моноциты

ü Агранулоциты, которые в периферической крови составляют 4–9%,

ü  их диаметр в мазке – до 20 мкм, в капле крови – 14 мкм.

ü В кровотоке циркулируют от 2 до 4 суток.

ü Ядро чаще бобовидной формы (иногда овальной, подковообразной, лопастевидной), с неравномерным распределением хроматина.

ü  В слабо базофильной цитоплазме обнаруживаются многочисленные лизосомы, вакуоли, митохондрии и комплекс Гольджи.

ü  Моноциты относят к незрелым клеткам, находящимся на пути из красного костного мозга в ткани, где они дифференцируются в макрофаги.

ü  Функция этих агранулоцитов – фагоцитоз.

Лимфоциты

ü Клетки, отвечающие за специфичность действия иммунной системы, а также за сохранение иммунной памяти.

ü Их содержание в лейкоцитарной формуле – 27–45% от общего количества лейкоцитов крови.

ü Морфологически лимфоциты классифицируют в зависимости от размеров:

· малые – диаметр до 6 мкм, имеет крупное ядро, занимающее большую часть клетки с резко конденсированным хроматином. Цитоплазма базофильна, узкой каймой окружает ядро. Некоторые лимфоциты содержат в цитоплазме небольшое количество азурофильных гранул

· средние – диаметр 7–10 мкм;

· большие – диаметр 10–20 мкм.

Средний и большой лимфоциты имеют более широкий ободок цитоплазмы. Ядро округлой или бобовидной формы, содержит нежные глыбки хроматина, концентрирующиеся возле ядерной оболочки. Ядрышко различимо. В кровотоке находятся в основном малые и средние лимфоциты, большие локализуются в лимфоидных органах. Классификация в зависимости от продолжительности жизни:

· короткоживущие (5–6 дней);

· долгоживущие (месяцы, годы) клетки памяти, рециркулирующий пул лимфоцитов или лимфоциты, возвращающиеся в неактивное состояние, но несущие информацию о встрече с конкретным антигеном.

При повторном введении антигена они способны обеспечивать быстрый иммунный ответ наибольшей интенсивности (вторичный ответ) вследствие усиленной пролиферации лимфоцитов и образования иммуноцитов. Среди лимфоцитов различают три основных функциональных класса:

ü В-лимфоциты,

ü  Т-лимфоциты

ü нулевые лимфоциты.

В-лимфоциты (бурсозависимые)

Ÿ формируются в сумке Фабрициуса у птиц.

Ÿ У человека В-лимфоциты дифференцируются из стволовой кроветворной клетки красного костного мозга, затем попадают в периферический кровоток и заселяют В-зоны периферических лимфоидных органов – селезенки, лимфатических узлов, скоплений лимфоидной ткани в различных внутренних органах.

Ÿ  В этих зонах под влиянием антигена происходят бласттрансформация, пролиферация и дифференцировка В-лимфоцитов в плазматические клетки, которые вырабатывают антитела, т. е. участвуют в гуморальном иммунном ответе.

Ÿ В-клетки практически отсутствуют в лимфе грудного лимфатического протока, так как обладают слабой способностью к рециркуляции.

Ÿ В периферическом кровотоке их количество составляет не более 30%.

Ÿ Характерной особенностью В-лимфоцитов является наличие на поверхности иммуноглобулиновых рецепторов, рецепторов для комплемента (С3), а также характерных антигенных маркеров СД 19, 20, 22, 21.

 Т-лимфоциты (тимусзависимые)

Ÿ составляют 70% лимфоцитов периферической крови и около 90% лимфоцитов грудного лимфатического протока.

Ÿ Их предшественники мигрируют в тимус из красного костного мозга, где под влиянием эпителиоретикулоцитов, образующие факторы дифференцировки – тимозина, тимопоэтина, тималина и др., происходит антигеннезависимая дифференцировка Т-лимфоцитов.

Ÿ При этом в плазмолемме лимфоцитов появляются характерные рецепторы, способные специфически распознавать и связывать антигены.

Ÿ Из тимуса лимфоциты попадают в кровоток и далее заселяют Т-зоны в периферических органах иммунной системы – лимфатических узлах, селезенке, в солитарных и групповых фолликулах различных органов.

Ÿ образуются Т-иммуноциты (эффекторные) и Т-клетки памяти.

Ÿ Популяция Т-лимфоцитов не однородна, а состоит из нескольких субпопуляций, отличающихся как репертуаром поверхностных антигенов, так и функцией.

Ÿ Лейкоцитарные антигены называют кластерами дифференцировки и обозначают буквами CD и соответств