Бурятский научный центр институт биологии

АКАДЕМИЯ НАУК СССР СИБИРСКОЕ ОТДЕЛЕНИЕ

БУРЯТСКИЙ НАУЧНЫЙ ЦЕНТР ИНСТИТУТ БИОЛОГИИ

Глава 3. КЛАССИФИКАЦИИ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА

 

В тибетских медицинских сочинениях приведен ряд классификаций лекарственных средств: по применению, лечебным свойствам, «действию», вкусам, способам приготовления. Каждая из приведенных классификаций обладает развитым терминологическим аппаратом. Их общим недостатком является отсутствие четко разработанных классификационных признаков, все они в той или иной степени непоследовательны, не охватывают всю применяемую номенклатуру. Большинство категорий и терминов, которыми оперируют тибетские авторы при классификации лекарственных средств, не имеют выхода за пределы теоретических разделов тибетской медицины. В схемах и таблицах этих теоретических разделов тибетской медицины попытки обобщения накопленных эмпирических знаний подчинены структуре религиозно-философских построений. Это значительно снижает информативность тибетских текстов для современных экспериментаторов.

Переход от абсолюта, от мира идей, как утверждают тибетские тексты, к воспринимаемому миру предметов и явлений проходит через ряд нисходящих категорий, из которых отправными в рассуждениях тибетских авторов служат «пять первоэлементов» и «три гуны».

 

КЛАССИФИКАЦИИ ПО ПРИНЦИПУ АНАЛОГИИ

 

Основной принцип этих классификаций - выявление общности между каждой из собираемых частей лекарственных растений и частями тела, отдельными органами человека, явлениями природы. В этих классификациях нашли отражение представления людей по той ступени познания, когда только началось выделение объектов природы (растений) и выявление присущих им свойств:

«...корни, ветви, стебли — излечивают болезни костей, мяса и сосудов. Листья, млечный сок и побеги используются при болезнях полых органов и рканг-ла-наг. Цветки, плоды и колосья — при болезнях лица, глаз, головы» [Дзэйцхар Мигчжан, л. 4].

«...корни миробалана лечат болезни костей, ветви — болезни сосудов и жил. Плоды (применяются) - при болезнях плотных органов. Кожица, луб и смола лечат кожу, сухожилья и конечности» [Чжуд-ши, т, IV, л. 31].

Другим вариантом классификации по принципу аналогии является деление лекарственных средств на рвотные и слабительные. В этой классификации объяснение действия растений дано на уровне первобытной магии: весной, когда растения тянутся вверх, соки их тоже движутся вверх, поэтому растения вызывают рвоту. Осенью, когда соки движутся вниз, растения вызывают понос. Эти представления, обогащенные наблюдениями над наиболее ощутимо проявляющимися реакциями организма на попадание внутрь ядовитых растений, послужили поводом для разделения растений на рвотные и слабительные. По-видимому, эта классификация является одной из первых попыток осмысления накопленного опыта.

С усложнением мировоззрения, развитием анимистических представлений древние люди закономерно начинают выделять группы пищевых, ядовитых и лекарственных растений.

Классификация лекарственных средств уже основывается на представлении о болезни как о чем-то одушевленном, проникающем в тело человека, причиняющем страдания. Это дает основание для попыток «поладить с болезнью по-доброму» или «выгнать, подавить, убить» болезненное начало и служит поводом для деления лекарственных средств на «успокаивающие» и «очищающие». В группу «очищающих» в качестве основных средств включены рвотные и слабительные.

Классификация лекарственных средств на рвотные и слабительные, «очищающие» и «успокаивающие» приведена в IV т. «Чжуд-ши» и в «Вайдурья-онбо».

 

КЛАССИФИКАЦИЯ ПО ВКУСАМ

 

Эта классификация изложена в 19-й главе II т. «Чжуд-ши» и 19-й главе II т. «Вайдурья-онбо». Она построена на убеждении тибетцев, что «основа вкуса порождена пятью стихиями: землей, водой, огнем, ветром и пространством». Пространство считается общим для всех. Четыре других стихии образуют шесть парных сочетаний: земля — вода; вода — огонь; огонь — земля; вода — ветер; огонь — ветер; земля — ветер.

Эти шесть пар порождают шесть вкусов: сладкий, кислый, соленый, горький, жгучий и вяжущий. Вкус определяет свойство лекарственных средств, их так называемую силу действия. Перечень вкусов от сладкого до вяжущего характеризуется убыванием этой силы. Наиболее способствующим жизнедеятельности считался сладкий, в то время как лекарственные средства с вяжущим вкусом находятся на противоположном полюсе. Эти шесть вкусов считались первичными. Лекарственные средства после «переваривания желудочным соком» приобретают вторичный вкус: сладкие и соленые после усвоения становятся сладкими, кислый не изменяется, а горькие, жгучие и вяжущие становятся горькими, Таним образом, вторичных вкусов,три: сладкий, кислый и горький (схема 2).

 

Согласно «Вайдурья-онбо», ветер можно лечить лекарствами со сладким, кислым и соленым вкусами; слизь — жгучими, кислыми и солеными, а желчь — горькими, сладкими и вяжущими. Связь вкуса лекарств с их биологической активностью можно изобразить следуюгдим образом (схема 3). Если учесть изменение вкуса после переваривания, то болезни, возникшие при ветре, лечат сладкими и кислыми; слизь — сладкими, кислыми и горькими, желчь — сладкими и горькими.

В тибетской медицине реализация понятий «ветер», «желчь» и «слизь» в конкретные анатомо-физиологические представления была ограничена, по-видимому, прежде всего органами системы пищеварения, где этими терминами обозначили реально существующие газы, слизь и желчь. Правомерность такой трактовки этих понятий подтверждается данными о фармакотерапевтической активности лекарственных средств, предназначенных в тибетской медицине для лечения заболеваний печени, желудка и кишечника (табл. 8) [Асеева и др., 1986].

Так, у большинства растений, рекомендованных тибетской медициной для лечения желчи, в эксперименте установлена достаточно высокая желчегонная активность: гадепии рогатой, зубчатки поздней, ломатогониума карипшйского о др. [Баторова и др., 1983]. Средства, использовавшиеся для «повышения огня» желудка, лечения расстройства ветра и слизи, как правило, обладают раздражающим действием, повышают секрецию пищеварительных желез, усиливают рефлекторное отделение желудочного сока. Кроме указанных в табл. 8 можно упомянуть широко использующийся в медицине аир болотный [Турова, Сапожникова, 1982] и пищевые растения: перец черный [Муравьева, Гаммерман, 1974] и кишнец посевной [Танасиенко, 1985].

Поскольку в представлениях тибетцев каждый орган, каждая ткань, подобно желудку, «усваивают пищу» [Чжуд-ши, т. I, л. 7; Вайдурья-онбо, т. I, л. 60], эти явления - наличие газов, желчи, слизи в органах системы пищеварения - были экстраполированы тибетцами на все органы и ткани в целом, т. е. на весь организм.

Вероятность такой интерпретации, по-видимому, обосновывалась тибетцами тем, что все используемые ими средства для лечепия «слизи», «ветра» и «желчи» способствовали нормализации деятельности органов пищеварения. Данные о фармакотерапевтической активности подтверждают этот тезис (см. табл. 8).

Известно, что между вкусом и химической структурой соединений существует определенная зависимость - так же, как между структурой вещества и его фармакологической активностью. В частности, показано, что все известные флавопоп-7-р-неогесперидозиды имеют горький вкус, а все флавонон-7-р-рутинозиды - безвкусные и, по-видимому, место присоединения - L-рамнозы к D-глюкозе - является фактором, определяющим вкус данной группы веществ [Хоровиц, 1986].

Кроме этого, есть данные о зависимости вкуса веществ от их конформации и наличия свободных гидроксильных групп в кольце. Установлено также, что для интенсивности вкуса необходимо присоединение к гликозиду фенольного агликона определенного размера, формы и степени сложности. Таким образом, вкус лекарственных средств - достаточно объективная по тому времени характеристика, послужившая тибетцам основанием для определения их свойств.

Действительно, в настоящее время четкая зависимость строения и фармакологического действия установлена для многих соединений, в том числе для структурных аналогов алкалоидов опия. Относительно небольшие изменения структуры молекулы алкалоидов опия (например, замена N-метильного заместителя на N-аллиль-ный, N-циклопропильпый или сходные группы) приводят к получению весьма мощных антагонистов морфина [Горкин, 1982]. Установлено, что активность некоторых производных фенотиазипов зависит от расстояний между аминогруппой и фенотиазиновым ядром [Prozialesk, Weiss, 1982]. При изучении фармакологических эффектов 31 карбоксиамида с различными заместителями оказалось, что наибольшей седативной и анальгезирующей активностью обладают соединения с незамещенной аминогруппой и пиперазпновьга кольцом, замещенным фторфепильным остатком [Foussard-Blanpin, 1982]. Известна связь между химическим строением и седативной активностью в ряду производных диизохинолиновых алкалоидов. Из девяти изученных соединений наибольшей седативной активностью обладают соединения с метокси-метилендиоксы группами в различных положениях ароматического кольца молекулы [Садритдинов, Реженов, 1982]. Эти сведения позволяют констатировать, что тибетские характеристики лекарственных средств «вкус», «действие», «свойство» построены на эмпирических наблюдениях и имеют в основе объективные закономерности.

(Таблица 9)

Классификация лекарств «по вкусам» разработан тибетцами для обоснования теории составления рациональных прописей препаратов. Согласно этой теории, в препарате строго определено сочетание компонентов с различными вкусами. Если основной вкус «сладкий», то в сочетании с ним по два-пять могут участвовать все последующие в ряду (табл. 9), при основном «кислом», «соленом», «вяжущем»— также только все последующие после соленого. В многокомпонентных лекарственных композициях эти закономерности проявляются в рамках 3-5-компонентных сочетаний лекарственных средств.

Таким образом, классификация лекарственных средств по такому объективному признаку, как «вкус», служила тибетским медикам для выработки основных принципов составления сложных лекарственных композиций.

Классификация по вкусам также приведена в «Чжуд-ши» (т. II, гл. 20) и «Вайдурья-онбо» (т. II, гл. 20). В «Шэлпхрэнге» сведения о вкусах лекарственных средств вплетены в тексты ботанико-фармакогностических описаний растений.

 

Таблица 20 Пропись состава «обладающего уравновешивающим действием»

 

Таблица 21 Пропись состава «выходящей победителем из сражения со смуг-по»

 

При анализе состава рецептов, рекомендованных для лечения осложненных форм гепатита (табл. 22, 23), нами выявлен комплекс из пяти растений:

девясил высокий, корня; шлемник байкальский, корни; яблоня ягодная, плоды; зубчатка поздняя, трава; шиповник даурский, плод.

Таким образом, сопоставление состава прописей, рекомендованных для лечения тех или иных заболеваний, позволяет выявить сочетания лекарственных средств, часто встречающихся в различных рецептах. Направленность фармакотерапевтической активности этих сочетаний можно предварительно определить при анализе информации трактатов о лечебных свойствах отдельных компонентов, входящих в их состав, данных о химическом составе, фармакологических свойствах и тибетских показаний к применению препарата в целом.

Обратимся еще раз к табл. 12-21 (графа 3). Судя по тибетским источникам, лекарственная смесь из плодов миробалана хебулы, миробалана беллерического и эмбли-ки лекарственной должна обеспечить противовоспалительное действие и нормализацию основных физиологических процессов в организме (табл. 12, 1-3; табл. 14, 5-7). Данные о химическом составе этих растений и их фармакологическом действии свидетельствуют о возможности проявления противовоспалительного действия и нормализации нейрогуморальных процессов.

Сочетание корней девясила высокого, древесины бузины сибирской, корневищ софоры желтоватой и имбиря лекарственного - противовоспалительное средство, стимулирующее рёпаративпые процессы, улучшающие трофику и состав крови (табл. 13, 1-4; табл. 14, 1-4, табл. 15, 1-4). Сочетание «Три красных»: красные листья бадана толстолистного, корни и корневища марены сердцелистной и шеллак (табл. 15, 8-10; табл. 16, 39-41) способствует нормализации водно-солевого обмена и снижению аутоиммунных процессов. Сочетание плода граната, коры коричного дерева, кардамона настоящего и перца длинного (табл. 16, 1-4; табл. 17, 1-4; -табл. 18, 1-4, табл. 19, 1-4) повышает секреторную деятельность слизистой желудка, способствует усвоению пищи и стимулирует биоэнергетику тканей. Сочетание корней девясила высокого, плодов кишнеца посевного и облепихи крушиповой, судя по показаниям «Вайдурья-онбо», обеспечивает противовоспалительное действие, повышает трофическую функцию эпителиальных тканей, нормализует нейрогуморальные процессы и улучшает состав крови (табл. 18. 5-7; табл. 19, 5-7). Корни девясила высокого, шлемника байкальского, плоды шиповника даурского, яблони ягодной и травы зубчатки поздней при совместном использовании регулируют нейроэндокриппые процессы, обладают противовоспалительным и репаративным действием (табл. 22, 2-4, 7, 8; табл. 23, 1-4, 8).

Таким образом, процесс выявления сочетаний растений, обладающих заданным спектром фармакологической активности, складывается из следующих этапов.

1. Группировка рецептурных прописей по заданным признакам (прописи для лечения воспалительных процессов, сопровождающихся нарушением гомеостаза; прописи для лечения осложненных заболеваний печени и системы органов пищеварения и т.п.).

2. Составление рабочих таблиц, демонстрирующих состав прописи, лечебные свойства каждого компонента по тибетским трактатам.

3. Сравнение составов прописей для выявления часто повторяющихся сочетаний лекарственных средств.

4. Анализ потенциальных возможностей лекарственных смесей на основе химического состава и фармакологической активности отдельных ее компонентов в соответствии с показаниями к применению отдельных ингредиентов и смеси в целом.

Проведенный по этой схеме анализ тибетских рецептурных прописей позволил выявить ряд сочетаний растений и предварительно определить направленность их биологической активности. Для некоторых таких лекарственных композиций правильность рекомендаций подтверждена в эксперименте. Материалы экспериментальных исследований изложены в следующей главе.

 

Таблица 25 Состав «Жоныни-25», «полностью побеждающий слизь»

           

       Параллельно с изменением активности трансаминаз сыворотки крови изменялся ровень МДА в гомогенато печени. На 7-е сутки развития гепатита у животных второй группы происходило резкое повышение уровня МДА (на 335 % по сравнению с интактными), который фиксировался и на 14-е сутки. Под действием тибетских лекарственных смесей накопление МДА в печени значительно снижалось: у животных третъей группы на 7-е-сутки оно составляло 239 %, а на 14-е - 135 % от контрольного уровня МДА, что указывает на выраженное: мембранно-стабилизирующее действие лекарственных¹ смесей.

       На 7-е сутки эксперимента у животных второй группы почти полностью была нарушена балочная структура печени. Выявлялись центролобулярные некрозы. Одновременно отмечались явления зерпистой, жировой и сакуольной дистрофии, а также полиморфизм гепатоцитов.

       Ядра мпоТих клеток подвергнуты никрозу. О глубине дистрофических явлений свидетельствовало снижение ядерно-цитоплазм этического отношения до 57 % от показателя интактных животных, которое происходило за счет

 

Таблица 27 Активность АЛТ и ACT в 'сыворотке крови крыс, ммоль/мл

 

увеличения размеров цитоплазмы при одновременном уменьшении размеров ядра гепатоцитов. В сосудах выявлялись гемодинамические изменения в виде полнокровия и стаза. По ходу их обнаруживались клеточные инфильтраты за счет лимфогистиоцитарных элементов. Купферовекие клетки выглядели набухшими. У животных третьей группы на 7-е сутки опыта число гепатоцитов с дистрофическими и некробиотическими изменениями было значительно меньше, чем в контроле, но были заметны нарушения " балочной структуры печени и ди-» скомилексация гепатоцитов. Наряду с этим уменьшалась, клеточная инфильтрация вокруг сосудов и в портальных областях. Отчетливо были видны признаки регенерации - появлялись двухъядерные клетки и митозы. Ядерно-цитоплазметическое отношение составило 105,2 % по сравнению с показателями интактной группы.

На 14-е сутки эксперимента у животных второй группы сохранялись признаки острого токсического гепатита: центролобулярный некроз и дистрофические изменения гепатоцитов. Отчетливо была нарушена балочная гисто-структура органа. Сохранялись гемодинамические нарушения в сосудах и периваскулярная инфильтрация форменными элементами крови. Купферовекие клетки продолжали оставаться набухшими. Позитивный момент в динамике развития острого токсического гепатита в этот период состоял в некотором - до 89,4 % от показателя интактных крыс - увеличении ядерно-цитоплазматического индекса, которое происходило за счет гипертрофии ядра. У животных третьей группы наблюдалось восстановление балочной структуры печени. Почти полностью исчезли дистрофические изменения в гепатоцитах. Ядерно-цитоплазматический индекс не только превышал этот показатель у крыс контрольной группы, но даже на 31,6 % был больше, чем у интактных животных. Причем повышение показателя констатировалось на фоне одновременной гипертрофии цитоплазмы и ядра. В целом морфологическая структура печени крыс третьей группы но 14-е сутки эксперимента приближалась к таковой у интактных животных.

Таким образом, в эксперименте показано, что многокомпонентные лекарственные смеси, приготовленные по тибетским прописям, в значительной степени предотвращают изменения, вызываемые СС1₄, и оказывают гепато-протекторное действие. При этом функциональная активность печени сохраняется, что свидетельствует о структурно-функциональной целостности центролобулярных образований, состоящих из наиболее дифференцированных гепатоцитов.

Известно, что достаточно высокий уровень клеточной и внутриклеточной регенерации обеспечивается за счет сохранения матричных и барьерных функций биологических мембран [Бурлакова и др., 1975]. Нами в эксперименте показано, что многокомпонентные лекарственные смеси ингибируют процессы перекисного окисления липидов, тем самым предотвращая деструкцию биологических мембран.

Полученные данные свидетельствуют о полипотентном действии использованных лекарственных смесей на структурно-функциональное состояние печени. Оно способствует сохранению гистоструктуры органа и выполнению им специфических функций, стимулируют репаративную регенерацию. Это подтверждает достоверность информации тибетских трактатов о разностороннем действии многокомпонентных смесей.

 

Таблица 30

Действие компонентов лекарственной смеси «Тхаший-тханг» на гемокоагуляцию

 

ная - на 31,4 %. В эксперименте с раствором сухой свиной желчи нам не удалось выявить достоверных изменений времени свертывания крови. Отвар полной смеси сократил время свертывания крови на 58,2 %.

В дальнейших экспериментах отвары всех компонентов лекарственной смеси, за исключением желчи, сокращали время рекальцификации плазмы соответственно на 18,8%; 8,0; 16,4; 28,5; 43,4%. Толерантность плазмы к гепарину повышалась под влиянием отваров: горца птичьего - на 19,2%, горечавки крупнолистной - на 18,5, оносмы песчаной - на 20,0, желчи - на 1,6, зубчатки поздней - на 26,0 и полной смеси - на 37,2 % «

 

Сравнение влияния отваров на изученные тесты гемокоагуляции показывает, что отвар полной смеси «Тхаший-тханг» оказывал более выраженное биологическое действие, чем отвар каждого компонента в отдельности.

Кровоточивость часто обусловливается патологическими изменениями, приводящими к нарушению проницаемости и резистентности сосудов. При субмикроскопическом исследовании структура кровеносных капилляров разных органов имеет ряд общих признаков. Стенка кровеносного капилляра состоит из трех слоев: эндотелиальных клеток, базальной мембраны и слоя периваскулярных клеток, окутанных аргирофильными и коллагеновыми волокнами и погруженных в аморфную часть основного вещества соединительной ткани [Movat, Fernando, 1963]. Ю. М. Шидаков и др. [1981] в экспериментах, выполненных в условиях высокогорья, отметили сопряженность между степенью проницаемости сосудистой стенки и свертывающей способностью крови.

Резистентность сосудистой стенки, или устойчивость ее к механическим воздействиям, в значительной степени лимитирует риск появления кровоточивости.

Существенное значение в поддержании нормальной резистентности сосудов имеют кровяные пластинки. При этом тромбоциты, внедряясь в эндотелиальные клетки, выделяют в них биологически активные вещества, в том числе факторы III и V, что нормализует функции стенки капилляра [Баркаган, 1980]. Трансфузия свежих ':$ тромбоцитов, взвешенных в плазме, прекращает спонтанные кровотечения [Ширяев, 1970]. Изложенное показывает что проницаемость и резистентность сосудов, состояние сосудистого эндотелия прямо связаны с коагулологической активностью крови. В связи с этим мы исследовали фармакологическую активность отваров полной лекарственной смеси и ее компонентов на проницаемость сосудистой стенки.

Критерием степени проницаемости в наших экспериментах служило изображение разной степени проницаемости частиц туши в стенку микрососуда (рис. 9). У животных интактной группы после перорального введения физиологического раствора и внутривенной инъекции туши микроскопирование брыжейки не позволило выявить окрашенных микрососудов (рис. 11). У животных второй группы, которым вводили физиологический раствор, гистамин и тушь, сосудистая стенка интенсивно пропитывалась частицами туши, что соответствовало IV степени проницаемости (рис. 12).

В группе животных, которым вводили отвар лекарственной смеси «Тхаший-тханг», сосудистая проницаемость также изменялась до IV степени (рис. 13).

Исследование активности каждого компонента лекарственной смеси показало, что введение отвара горечавки крупнолистной вызывало проникновение частичек туши в сосуды брыжейки также как в случае введения отвара полной лекарственной смеси (рис. 14). Введение отваров зубчатки поздней, корня оносмы песчаной и раствора желчи не вызывало проникновения туши в морфологические структуры микрососудов, в связи с чем сосуды у животных в этих группах не отличаются от контроля (рис. 15-17).

В группе животных, получавших отвар из травы горца птичьего, отмечалось очаговое проникновение частиц тущи в стенки брыжеечных сосудов, что соответствовало II степени проницаемости (рис. 18).

Таким образом, исследование биологической активности отвара полной лекарственной смеси «Тхаший-тханг» и ее компонентов выявило различное их действие" на проницаемость сосудистой стенки. Отвары полной смеси, и отдельно горечавки крупнолистной, вызывали внедрение частиц туши в структуры сосудов брыжейки крыс, по интенсивности не уступающее действию гистамина. При этом необходимо подчеркнуть, что частицы туши, вводимые в кровоток животные, могли оседать в разных слоях стенки сосуда [Черных и др., 1975; Томилов и др., 1985].

Таким образом, отвары лекарственной смеси «Тхаший-тханг» и ее компонентов проявляли гемокоагулирующее действие, повышая общую свертывающую активность крови интактных животных. Вместе с тем они активно действовали на сосуды микроциркуляторного русла, что могло инициировать адгезию и динамические функции тромбоцитов.

В серии монографий, а также в многочисленных статьях представлен ряд звеньев регуляции нормального гемостаза, тромботических состояний и кровоточивости [Кузник, Скипетров, 1974; Кудряшов, 1975; Скипетров, 1978; Баркаган, 1980; Raby, 1974]. В этих и других работах [Акопов, 1981] большое значение придается проблемам регуляции функций системы гемостаза. Работа И.Э. Акопова [1981] посвящена поискам новых гемостатических средств резорбтивного действия. Автор справедливо выделяет возможность изыскания эффективных гемостатических препаратов из арсенала лекарственных растений.

Среди 17 групп лекарственных средств, насчитывающихся в классификации тибетской медицины [Вайдурья-онбо, гл. 20-21], выделены лекарства, влияющие на состояние органов кроветворения, и препараты, применяющиеся для остановки кровотечений [Базарон, Асеева, 1985]. Хотя общий гемостатический эффект препаратов отмечался еще и древности, до сих пор остается неясным механизм их действия.

В настоящем разделе представлены результаты изучения системы гемостаза у животных под влиянием однократного и курсового введения тибетского препарата. Использованные методы исследования характеризовали состояние плазменной коагуляции крови, а также позволяли судить об изменениях в сосудисто-тромбоцитарном звене гемостаза.

В исходной коагулограмме контрольной группы животных время рекальцификации плазмы и ее толерантность к гепарину, характеризовавшие общую свертывающую активность крови, имели средние значени - 126 и 311 с (табл. 31). Среднее значение времени рекальцификации, характеризующее также активность плазменных прокоагулянтов,- подтверждалось обычным уровнем активности фактора VIII (43,2 с). Физиологическое соотношение между указанными тестами характеризовало нормальный процесс тромбопластинообразования, что подтверждалось уровнем утилизации протромбина, показатель которого составлял 40,4 с. Протромбиновый индекс, отражающий процесс внешней активации коагуляции крови, не имел существенного отклонения от физиологического уровня и был равен 81,0 %. Тромбиновое время составляло 17,4 с. Конечная стадия процесса свертывания крови в контрольной группе, крыс характеризовалась активностью факторов XIII (38,3 с) с концентрацией фибриногена (3,47 г/л).

Однократное введение многокомпонентного тибетского препарата из сырья природного происхождения другой группе крыс вызывало значительное изменение процесса свертывания крови. Через 2 ч после введения отвара препарата время рекальцификации плазмы достоверно сократилось по сравнению с контролем, а толерантность плазмы к гепарину в активность фактора VIII, напротив, повысились (см. табл. 31). Протромбиновый индекс, характеризующий активность факторов протромбинового комплекса, повысился на 26,7 %. Антикоагулянтная активность крови, о которой можно было судить по тесту утилизации протромбина, сохранялась на физиологическом уровне. Тромбиновое время составляло 14,5 с, в контроле - 17,4 с. Активность фактора XIII у крыс под влиянием препарата повышалась на 3,3 с, концентрация фибриногена существенно не увеличивалась. (Таблица 31)

У крыс, однократно получавших отвар многокомпонентного препарата, количество тромбоцитов достоверно увеличилось, а длительность кровотечения и объем теряемой крови уменьшились по сравнению с контролем (табл.32).

Анализ электрокоагулограммы, дающий представление об интегральном процессе свертывания крови при участии форменных элементов и плазменных факторов коагуляции, показал, что время начала свертывания крови (показатель Т,) у крыс, получавших отвар тибетского препарата, достоверно сокращалось по сравнению с контролем (табл. 33). Аналогичным образом изменялись показатели Т_г и Т. Иллюстрацией результатов эксперимента, представленных в табл. 33, являются рис. 19 и 20, на которых представлена запись электрокоагулограммы у крыс контрольной и подопытной групп.

(Таблица 32)

       Таблица 33.

 

       Представляло интерес исследовать состояние свертывающей системы крови и количество тромбоцитов у животных при курсовом применении гемостатического препарата «Тхаший-тханг». Такая постановка вопроса связана с принципом применения этого препарата в тибетской медицине, где его назначали курсом; на 7-10 дней в дозе не более;, 1 г в сутки [БАЖ, л. 3-4].:

       В экспериментах данной серии, использовали ту же дозу препарата, что и в опытах на животных при однократном его введении.

При курсовом введении отвар препарата вызывает состояние гиперкоагуляции, фиксируемое по большинству тестов (табл. 34). Причем сравнение результатов, полученных у животных при однократном применении препарата, с таковыми при курсовом его введении показало более выраженное стимулирующее воздействие на систему гемостаза во втором случае. Существенное различие отмечено по следующим тестам: толерантность плазмы к гепарину, протромбинотшй индекс, активность фактора VIII и концентрация фибриногена. При этом возрастание свертывающего потенциала крови происходило на фоне физиологического уровня утилизации протромбина и практически не изменившегося тромбинового времени, что,

 

Таблица 35

 

Показатели гемостаза у собак после курсового введения отвара тибетского препарата вероятно, следует считать адаптивной реакцией организма, нивелирующей риск спонтанного тромбогенеза.

Известно, что на одни и те же биологически активные вещества реакция животных разных видов неодинакова [Петков, 1974; Балуда и др., 1978]. Мы провели исследование изменений системы гемостаза у собак. Использовали ту же дозу препарата, с которой работали в экспериментах на крысах.

Курсовое введение препарата стимулировало систему гемостаза. Достоверно выраженная гиперкоагуляция, по сравнению с контролем, констатировалась по тестам: время рекальцифакадии плазмы и ее толерантность к гепарину (табл. 35). Гиперкоагудяция по этим тестам подтверждалась достоверным повышением активности фактора VIII и протромбинового индекса. Процесс гиперкоагуляции по данным тестам сопровождался нормальным уровнем утилизации протромбина, тромбинового времени и активности фактора XIII. Как и в предыдущем эксперименте, зафиксировано достоверное возрастание количества тромбоцитов по сравнению с аналогичным показателем в контрольной группе.

При сравнении стимулирующего действия препарата на общие коагуляционные тесты при длительном его применении у крыс и собак выяснилось, что более выраженное влияние препарат оказывает на систему свертывания крови крыс. Так, время рекальцификации плазмы у крыс сократилось на 52%, а у собак - на 37; толерантность плазмы к гепарину у крыс повышалась на 53, а у собак - на 41,5; протромбиновый индекс у крыс повышался до 110,2, а у собак - до 102,7 %.

Таким образом, серия экспериментов, проведенных на крысах и собаках, показала, что действие препарата вызывает у животных гиперкоагуляцию крови, повышает функцию компонентов сосудисто-тромбоцитарного гемостаза, увеличивая при этом количество тромбоцитов, сокращая время кровотечения и объем теряемой крови.

В процессе изучения функций тромбоцитарно-сосудистого гемостаза, наступающих под влиянием однократного и длительного применения тибетского препарата, обнаружено, что во всех случаях увеличивается количество кровяных пластинок.

Продукция тромбоцитов в физиологических условиях осуществляется гигантскими клетками костного мозга - мегакариоцитами, которые отшнуровывают их от цитоплазмы. В свою очередь, процессы мегакариоцитопоэза и тромбодитопоэза, осуществляемые кроветворной тканью, тесно связаны между собой и регулируются холинореактивными системами [Мосягина и др., 1976; Денисенко, 1У80; Kimura, 1986].

Известно, что введение в организм животного мелкого стекла, скипидара, яичного белка и некоторых других iopRi^CTu вызывает реактивный тромбоцитоз [Баранов, Ubb ]. Наряду с этим показано, что стимуляция функциональной активности мегакариоцитарно-тромбоцитарного аппарата в физиологических и экстремальных условиях осуществляется тромбоцитопоэтинами [Кассирский Алексеев, 1970; Mizoguchi, Nomura, 1986]. Учитывая это, для выяснения возможного механизма тромбоцитоза, возникающего у животных под влиянием тибетского гемостатического препарата, изучали тромбоцитопоэтическую активность сыворотки крови крыс, получавших отвар тибетского препарата в течение 5 дней. В контрольных сериях изучена динамика количества тромбоцитов у крыс после введения физиологического раствора и сыворотки от интактных животных (табл. 36). Полученные данные показали, что инъекция физиологического раствора и сыворотки крови от интактных животных-доноров не изменяет числа тромбоцитов в периферической крови крыс-реципиентов через 1,3 и 6 сут от начала эксперимента. В то же время введение сыворотки от крыс, получавших отвар тибетского препарата, привело к значительному увеличению количества тромбоцитов у животных-реципиентов. При этом существенное увеличение числа кровяных пластинок на 94,3 • 10³/л зарегистрировано уже через сутки после введения сыворотки. Известно, что накопление тромбоцитов в мегакариоцитах происходит постепенно, тогда как отторгаются они от цитоплазмы этих клеток путем «взрыва» [Пиксанов, 1969]. Очевидно, что у животных, получавших препарат, ускоряется процесс накопления и отторжения кровяных пластинок. Это положение не противоречит данным других исследователей, так как многие гемостатические препараты из растений увеличивают количество тромбоцитов [Алиев, 1960; Аконов, 1981]. Через 3 и 6 сут тромбоцитоз продолжал нарастать: количество пластинок увеличивалось соответственно на 222,4 и 238,1 • 10^п/л.

В костном мозге крыс, получавших физиологический раствор (контроль 1), количество мегакариоцитобластов составляло 1,0%, базофильных мегакариоцитов насчитывалось 6,4, полихроматофильных мегакариоцитов - 69,6, оксифильных форм - 16,0, голоядерных - 4,2 и дегенератшшых мегакариоцитов - 3,8 % (табл. 37).

В то же время у животных-реципиентов, получавших сыворотку крови интактных животных (контроль 2), существенных изменений в мегакариоцитограмме по сравнению с контролем не произошло.

Сравнение мегакариоцитограмм и функциональной активности мегакаряоцитов показало, что под влиянием сыворотки крыс-доноров у крыс-редипиентов (опыт) по сравнению с контролем 2 количество мегакариоцитоблйстов и базофильных мегакариоцитов увеличилось на 50 и 40 % соответственно, показатели полихроматофильных и оксифильных форм мало отличались от показателей группы контроля и составляли 76 и 12%. Число голо-ядерных и дегенеративных форм значительно уменьшилось по сравнению с таковым крыс первой и второй контрольных групп и было равно соответственно 1,4 и 1,0 %. Существенная разница выявлена в количестве шнурующих тромбоциты мегакариоцитов, показатель которых в этой группе крыс достигал 54 %.

Следовательно, увеличение в костном мозге тромбоцитоотделяющих клеток мегакариоцитарного ряда и появление периферического тромбоцитоза обусловлены введением тромбоцитопоэтически активной сыворотки крови крыс-доноров.

Таким образом, в данной серии экспериментов изучены изменения системы гемостаза у здоровых животных в процессе применения многокомпонентной смеси из лекарственного сырья природного происхождения. Результаты экспериментов показали, что отвар многокомпонентной лекарственной смеси повышал общую свертывающую активность крови, которая характеризовалась ускорением времени рекальцификации плазмы, повышением толерантности плазмы к гепарину и протромбинового индекса. При этом у животных через 2 ч после введения отвара повышалась активность фактора VIII. Гиперкоагуляция цельной крови зарегистрирована на электрокрагулограмме по показателям T^ T_Z и Т.