Тема 35. Вирусы – возбудители кровяных инфекций: возбудители гепатитов b , c , d , вич. Лабораторная диагностика парентеральных гепатитов b , c , D.

Задача № 1.

В инфекционное отделение ГКБ №6 поступила больная 25 лет с предварительным диагнозом «гепатит». Объективно: у больной увеличение печени и селезенки, моча окрашена в темный цвет (цвет «пива»).

Из анамнеза: четыре месяца назад лечилась у стоматолога в частной стоматологической клинике.

1. Назовите предполагаемого возбудителя заболевания; дайте его морфологическую и антигенную характеристику.

2. Какие методы лабораторной диагностики необходимо использовать для подтверждения диагноза?

Ответ:

1. Возбудитель – вирус гепатита В, относится к сем. Hepadnaviridae. Вирионы сферической формы, диаметром 42-45 нм, сердцевина представлена кольцевой двунитевой ДНК, окруженная беками капсида, придающими вирусу кубический тип симметрии. Имеет три антигенные системы: поверхностный – НВsAg, сердцевинный – НВсАg (ядерный) и НВеАg, входящий в состав НВсАg.

2. Серологические методы диагностики, выявляющие антигены вирусной В-инфекции и специфические антитела классов IgM и IgG в реакциях ИФА, а также ДНК вируса методом ПЦР.

Задача № 2.

На прием к инфекционисту обратился студент КрасГМУ, у которого при сдаче крови в «День донора» выявлен HBsAg, маркеры на гепатит С и ВИЧ отрицательны.

1. Какова должна быть тактика врача-инфекциониста?

2. Возможно ли заражение гепатитом В человека, вакцинированного вакциной Engerix В. Обоснуйте.

Ответ.

1. Наряду с клиническим обследованием пациента и проведением биохимических исследований необходимо провести исследование на маркеры активной репликации вируса гепатита В (HBеAg и IgM к HBсAg). В случае необходимости определения формы и периода болезни – другие маркеры.

2. Возможно в том случае, если инфицирование произойдет антиген-дефектным вариантом. Так как существуют антиген-дефектные варианты вируса гепатита В, не имеющие HBs-антигена.

 

Задача № 3.

После внутривенного введения наркотиков у наркомана развился гепатит. Лабораторные исследования подтвердили вирусный гепатит В.

1. Объясните возможность такого факта.

2. Меры специфической профилактики парентеральных гепатитов.

Ответ.

1. Это возможно, т.к. вирус гепатита В передается кровяно-контактным путем и использование одного шприца несколькими лицами для внутривенного введения наркотиков способствует передачи инфекционного агента.

2. Для специфической профилактики гепатита В используют генно-инженерные вакцины, содержащие HBs-антиген. Использование данной вакцины обеспечивает иммунную защиту от гепатита В, а также гепатита D. Вакцин для специфической профилактики гепатита С не разработано.

Автор: Хохлова О.Е.

 

Задача №4.

В родильном доме женщина категорически отказалась вакцинировать своего новорожденного ребенка вакциной «Энджерикс В», мотивируя свой отказ тем, что после вакцинации данным препаратом у ребенка может развиться гепатит.

1. Являются ли опасения оправданными?

2. В чем заключается принцип получения рекомбинантных (генно-инженерных) вакцин?

Ответ:

1. Нет

2. Получение рекомбинантных вакцин включает следующие этапы:

- выявление генов, ответственных за синтез наиболее иммуногенных детерминант возбудителя;

- введение этих генов в вектор. Вектор – это самореплицирующаяся генетическая структура (плазмида);

- введение векторов в клетки-продуценты (вирусы, бактерии, грибы и пр.),

- культивирование клеток in vitro,

- выделение антигена и его очистка.

Примером рекомбинантных вакцин является вакцина гепатита В (Энджерикс В). Это рекомбинантная дрожжевая вакцина. В штамм-продуцент – непатогенные дрожжи Saccharomyces cerevisiae –введена плазмида с геномом HBsAg. При размножении рекомбинантного клона микроорганизмов будет вырабатываться и накапливаться и HBsAg. После завершения процесса культивирования дрожжей из них выделяют белок HbsAg, который подвергают тщательной очистке от дрожжевых белков и используют в качестве иммуногенного компонента препарата.

Автор: Протасова И.Н.

 

Задача №5.

В настоящее время установлено наличие антигендефектных вариантов вируса гепатита В, не имеющих HBsAg.

1. Какой генетический механизм приводит к появлению дефектных вирионов HBV?

2. Какие проблемы возможны в связи с появлением дефектных вирионов HBV и пути их решения?

Ответ:

1. Появление HBs мутантов связано с мутациями в S-гене.

2. Возможные проблемы:

- в лабораторной диагностике;

- HBsAg – основной серологический маркер HBV→ ложный отрицательный результат;

- арбитражный метод – ПЦР;

- неэффективность современных иммунобиологических препаратов (вакцин, содержащих HBsAg и Ig, содержащих анти HBsAg);

- создание вакцин нового поколения.

Автор: Перьянова О.В.

 

Тема 37. Лабораторная диагностика ВИЧ-инфекции. Вирусы герпеса – возбудители заболеваний человека. Лабораторная диагностика заболеваний, вызываемых вирусами герпеса. Контроль по теме: Вирусные инфекции.

Задача №1.

Какие из указанных положений в отношении вирусов не верны. Обоснуйте:

1. Открыты Л. Пастером в 1885 г.

2. Являются паразитами на генетическом уровне.

3. Воспроизводятся за счет нуклеиновой кислоты клетки хозяина.

4. В эволюции органического мира играют роль переносчиков генетической информации.

5. Культивируются на питательных средах сложного состава.

6. Участвуют в круговороте веществ в природе.

7. В цикле развития обязательной является интеграция вирусного генома с геномом клетки хозяина.

8. Вызывают заболевания растений, животных и человека.

9. Окрашиваются по Граму положительно.

10. Для лабораторной диагностики вирусных инфекций используется вирусоскопический, вирусологический и серологический методы диагностики.

11. Критерием оценки при серодиагностике вирусных заболеваний является нарастание титра специфических антител в 4 и более раз.

12. Интерферон – противовирусный препарат широкого спектра действия.

13. Интерферон блокирует репродукцию вирусов на стадии адсорбции.

14. Интерферон синтезируется в организме лейкоцитами, фибробластами, макрофагами.

Ответ:

1. Нет, Д. И. Ивановским в 1892 г.

2. Да

3. Нет, за счет собственной нуклеиновой кислоты

4. Да

5. Нет, т. к. являются внутриклеточными паразитами и могут культивироваться только в живой развивающейся тест-системе: лабораторные животные, в основном, новорожденные, куриные эмбрионы и культуры клеток ткани

6. Нет, т. к. являются внутриклеточными паразитами и не могут использовать «мертвое» органическое и неорганическое вещество.

7. Нет, это характерно только для умеренных вирусов

8. Да

9. Нет, т. к. не имеют клеточного строения

10. Да

11. Да

12. Да

13. Нет, интерферон блокирует инициацию трансляции нуклеиновой кислоты вируса

14. Нет, лейкоцитами, фибробластами и лимфоцитами

Задача № 2.

В вирусологической лаборатории для выделения вирусов куриные эмбрионы заражают на хорионаллантоисную оболочку (ХАО), в амниотическую и аллантоисную полости. Спустя 2-3 дня эмбрионы вскрывают.

1. От чего зависит способ заражения куриных эмбрионов?

2. Как провести индикацию вируса на ХАО? Какие вирусы могут быть обнаружены этим методом?

3. Как провести индикацию вируса в амниотической и аллантоисной жидкости? Какие вирусы могут быть обнаружены этим методом?

Ответ:

1. От тропности вируса к определенным тканям куриного эмбриона.

2. Путем обнаружения бляшек беловатых пятен диаметром 1-2 мм; вирус натуральной оспы, осповакцины, простого герпеса.

3. Путем постановки реакции гемагглютинации с эритроцитами человека, различных видов животных и птиц; вирусы гриппа, парагриппа.

 

Задача № 3.

Условием безопасного забора крови и ее компонентов является:

· использование одноразовых игл и емкостей;

· соблюдение санитарно-эпидемиологических мероприятий;

· исследование донора на ВИЧ, гепатиты и сифилис;

1. Существует ли риск инфицирования реципиента при данных условиях забора крови.

2. Если риск существует, объясните причины возможного инфицирования реципиента.

3. Предложите мероприятия для предупреждения инфицирования реципиента.

Ответ.

3. Да.

4. Риск связан с тем, что исследование донора на ВИЧ, гепатиты и сифилис могут быть проведены в серонегативный период.

5. Консервация крови и ее компонентов на 6 месяцев и использование ее после повторного обследования донора (через 6 месяцев). Аутодонорство (создание банка крови). Использование ПЦР-диагностики для проверки донорской крови.

 

Задача № 4.

Больной обратился в ЛПУ с клиническими проявлениями опоясывающего лишая. Из анамнеза известно, что в детстве больной переболел ветрянкой. Данные заболевания вызывает вирус ветряной оспы-опоясывающего лишая, относящийся к ДНК-содержащим вирусам сем. Herpesviridae.

1. Назовите, что лежит в основе данного явления?

2. Укажите факторы риска развития такого заболевания.

3. Меры профилактики. Препараты, используемые для специфической профилактики.

4. Препараты для этиотропной терапии опоясывающего лишая.

Ответ:

1. Опоясывающий лишай (Herpes zoster) (син. — опоясывающий герпес) - заболевание вирусной природы, характеризующееся односторонними герпетиформными высыпаниями на коже с сильным болевым синдромом. Возбудитель — вирус ветряной оспы (Varicella zoster) семейства герпесвирусов, при первой встрече с организмом (чаще в молодом возрасте) вызывает типичную ветряную оспу, затем вирус переходит в латентное состояние, персистируя в нервных клетках задних рогов спинного мозга, черепных нервах или ганглиях автономной нервной системы, реже — в клетках нейроглии, и не вызывает каких-либо симптомов. Спустя десятилетия после первичного попадания вируса в организм происходит его активизация с выходом из нервных клеток и продвижением вдоль по их аксонам. Достигнув окончания нерва, вирус вызывает инфекционный процесс кожи того региона, который иннервируется данным нервом.

2. Активизация инфекции наступает при снижении иммунологической резистентности организма. Наиболее частые причины начала заболевания:

· Прием препаратов, снижающих иммунитет

· Хронические стрессы и изнуряющие работы

· Онкологические заболевания (лимфорганулематоз, злокачественные опухоли);

· Последствия лучевой терапии;

· Больные ВИЧ-инфекцией в стадии перехода в СПИД

· Пересадка органов и костного мозга

3. Методом специфической профилактики ветряной оспы, следовательно, и опоясывающего лишая является вакцинация.

Вакцинация производится по следующей схеме:

· дети в возрасте 12 месяцев — 13 лет: 1 доза вакцины (0,5 мл) однократно;

· лица старше 13 лет: 1 доза (0,5 мл) двукратно с интервалом введения 6-10 недель;

· экстренная профилактика: 1 доза (0,5 мл) в течение первых 96 часов после контакта (предпочтительно в течение первых 72 часов).

На территории Российской Федерации первая вакцина для профилактики ветряной оспы — «Варилрикс» - живая, аттенуированная вакцина (GlaxoSmithKline Biologicals S.A.), была зарегистрирована в 2008 г., а с 2009 г. вакцинация стала широко применяться в рамках региональных программ иммунизации.

Неспецифическая профилактика: изоляция на дому. Изоляция прекращается через 5 дней после последнего высыпания. Для детей, посещающих организованные детские коллективы, существует предусмотренный инструкцией порядок допуска в детские учреждения. Дезинфекция ввиду нестойкости вируса не проводится, достаточно частого проветривания и влажной уборки помещения.

4.Этиотропная терапия опоясывающего лишая включает:

· противовирусные препараты: ацикловир, фамцикловир, валацикловир, пенцикловир, рибавирин, тромантадин.

· Иммуномодуляторы с противовирусной активностью, индукторы интерферона.

· Препараты интерферонов: альфа1, бета, гамама.

· Растительные иммуномодуляторы: миртоплекс (миртовая эссенция), панавир (очищенный экстракт побегов Solanum tuberosum)

Автор: Хохлова О.Е.

 

Задача № 5.

Заболеваемость парентеральными гепатитами и ВИЧ – инфекцией в РФ находится на высоком уровне.

1. Чем можно объяснить сложившуюся ситуацию?

2. В чем состоят трудности создания вакцин против ВИЧ-инфекции, гепатита В.

Ответ.

1. ВИЧ – нет вакцины. Способ передачи (исключая наркоманов и ятрогенный путь) – естественный половой. Хроническое длительное течение – источник инфекции.

Гепатит В – высокая устойчивость к факторам окружающей среды, чрезвычайно низкая инфицирующая доза, высокий процент инфицирования населения. Передача возбудителя половым путем. Хронизация процесса – 5-10% - источники инфекции.

2. ВИЧ – высокая антигенная изменчивость возбудителя.

Гепатит В – трудность культивирования возбудителя гепатита В in vitro. Возможно культивирование вируса в клетках гепатокарциномы, но взаимодействие вируса с клеткой происходит по интегративному типу.

Редакция: Хохлова О.Е.

 

Задача № 6.

Сотрудник крупного фармацевтического предприятия, участвующий в изготовлении стерильных лекарственных средств, утром в области губ и щек почувствовал зуд и жжение и обнаружил несколько пузырьков, заполненных прозрачной жидкостью. В целом общее самочувствие нормальное, температура не повышена.

1. Укажите возможную этиологию данного заболевания.

2. Может ли данный сотрудник продолжить выполнять свои профессиональные обязанности? Обоснуйте.

Ответ.

1. Заболевание вызвано вирусом простого герпеса.

2. Данный сотрудник не может быть допущен к изготовлению лекарственных средств, т.к. это может привести к их контаминации. Это оговорено в нормативных документах, регламентирующих изготовление лекарственных средств. До момента выздоровления фармацевтический работник должен быть переведен на другую работу, не связанную с риском контаминации лекарственных средств.

Автор: Хохлова О.Е.