Заглавная страница Избранные статьи Случайная статья Познавательные статьи Новые добавления Обратная связь КАТЕГОРИИ: АрхеологияБиология Генетика География Информатика История Логика Маркетинг Математика Менеджмент Механика Педагогика Религия Социология Технологии Физика Философия Финансы Химия Экология ТОП 10 на сайте Приготовление дезинфицирующих растворов различной концентрацииТехника нижней прямой подачи мяча. Франко-прусская война (причины и последствия) Организация работы процедурного кабинета Смысловое и механическое запоминание, их место и роль в усвоении знаний Коммуникативные барьеры и пути их преодоления Обработка изделий медицинского назначения многократного применения Образцы текста публицистического стиля Четыре типа изменения баланса Задачи с ответами для Всероссийской олимпиады по праву Мы поможем в написании ваших работ! ЗНАЕТЕ ЛИ ВЫ?
Влияние общества на человека
Приготовление дезинфицирующих растворов различной концентрации Практические работы по географии для 6 класса Организация работы процедурного кабинета Изменения в неживой природе осенью Уборка процедурного кабинета Сольфеджио. Все правила по сольфеджио Балочные системы. Определение реакций опор и моментов защемления |
Условия-хранения и культивирования вирусов в лаборатории.
При взятии вируссодержащего патологического материала большое значение имеет правильность выбора материала и его свежесть. Вирусы очень чувствительны к нагреванию и гниению. Поэтому материал нужно брать от свежих трупов (не позже 12 часов после гибели), а еще лучше от забитых клинически больных животных. При выборе материала учитывают тропизм вирусов и клиническое проявление болезни, вид и возраст животного, стадию течения болезни, наличие видимых изменений в органах и тканях и т. д. При жизни животного в качестве вируссодержащего материала может служить: афты и их содержимое (ящур), пустулы (оспа), истечения из носа и глаз (инфекционные заболевания и др.), слизь и смывы со слизистых, моча (чума свиней и др.), фекальные массы (при вирусных энтеритах), кровь и лимфа (при пантропных инфекциях), кусочки органов, взятые биопсией, и т. д. Посмертно кроме указанных материалов можно брать кусочки паренхиматозных и других органов (печень, селезенка, почки, мозг, лимфоузлы и др.). Трупы мелких животных направляют обычно целиком. Берут материал по возможности стерильно с помощью стерильного инструмента и в стерильную посуду. Если лаборатория рядом, материал отправляют неконсервированным и обычно в термосах со льдом. Если же материал нужно транспортировать далеко, то его обычно консервируют и тщательно упаковывают (особенно, если отправляют по почте или самолетом). Кусочки органов консервируют в 50% стерильном глицерине или насыщенном растворе хлористого натра и дополнительно помещают в термос со льдом. Жидкий материал консервируют замораживанием и сохраняют при -20° С (в термосе с сухим льдом). Пересылка материала сопровождается направлением, в котором сообщаются эпизоотологические и клинические данные, картина патологоанатомических изменений. Присланный в лабораторию материал принимают и, по возможности, сразу же начинают исследовать, а, если это невозможно, то материал хранят до исследования в холодильнике при -20° С (в морозилке). Подготовка материала к вирусологическим исследованиям заключается в следующем. После осмотра органов и тканей, если материал был консервирован, их отмывают стерильным физраствором от консерванта. Если труп поступил целый, его осматривают и затем проводят вскрытие, измененные органы тщательно осматривают и извлекают в стерильные баночки или чашки Петри. При бешенстве часто поступает голова трупа, которую также сначала осматривают, а затем вскрывают и извлекают мозг. Жидкий материал проверяют на бактериальную загрязненность микроскопией мазков и посевом на среды (МГ1Б, МПА, среду Китт-Тароцци и среду Сабуро) и при необходимости обрабатывают антибиотиками (пенициллин и стрептомицин по 500-2000 ЕД на мл среды в зависимости от степени загрязненности).
Из кусочков органов готовят суспензию. Для этого из присланных органов и тканей берут небольшие кусочки (1.0-1.5 г) и помещают в стерильную ступку, где после измельчения ножницами тщательно растирают до кашицеобразной массы со стерильным песком или стеклом.!1атем добавляют стерильный физраствор в соотношении 1:10 или 1:5 и получается суспензия. Ее переносят в центрифужные пробирки и туда же вносят вышеуказанные антибиотики в дозе 500-2000 ЕД на 1 мл суспензии. Суспензию в пробирках 2-3 раза замораживают (при -20°-50°С) и отстаивают при комнатной температуре или в термостате при 37° С. При этом происходит дополнительное разрушение клеток и освобождение вируса. Затем пробирки с суспензией центрифугируют 15-20 минут при 3000 оборотов в минуту. Надосадочную жидкость проверяют на стерильность посевом на среды в аэробные и анаэробные условия и затем используют как вируссодержащий материал для заражения лабораторных животных, куриных эмбрионов и культур тканей и для постановки серологических реакций в качестве антигена. Одновременно из исходного патологического материала готовят мазки или мазки-отпечатки, которые исследуют на наличие телец-включений и вируса в клетках после специальной окраски под обычным микроскопом или применяют люминесцентную микроскопию с использованием иммунофлуоресценции (флуоресцирующие антитела). При необходимости можно из органов готовить гистосрезы и исследовать их гистологически (например, при бешенстве).
|
|||||
Последнее изменение этой страницы: 2022-09-03; просмотров: 227; Нарушение авторского права страницы; Мы поможем в написании вашей работы! infopedia.su Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав. Обратная связь - 18.188.152.162 (0.005 с.) |