Химическое исследование мочи

Цель занятия. Овладеть методами определения                  мочи,

ее на белок,   сахар;                                      в моче кетоновые те- ла, кровь,  кровяные  пигменты,     желчные и  желч- ные кислоты.

Материальное обеспечение. Индикаторная бумага,  реактивы для определения белка, альбумоз, сахара, кетоновых

тел, кровяных пигментов,                     желчных пигментов и кислот; пробы мо- дающие   и отрицательные реакции на   са-

хар, кетоновые тела и т. п.

При исследовании химического состава мочи вначале опреде- ляют рН, затем ставят реакции на белок,   сахар, кето- новые кровяные пигменты, миоглобин,  индикан,  желчные пигменты и кислоты.

рН мочи. Его устанавливают с помощью рН-метров или инди- каторной бумаги   Индикатор-

ную бумагу погружают в мочу и, вынув, сравнивают с цветной шкалой, имеющей соответствующие цифровые  обозначения  рН. У здоровых животных реакция мочи зависит от состава кор- мов. У травоядных она слабощелочная или нейтральная, а у пло- тоядных умеренно кислая. У животных кислая моча бывает при болезнях, сопровождающихся лихорадками, голодании, почечной недостаточности, резкощелочная при уроциститах, расса-

сывании экссудатов и транссудатов, после рвоты.

Определение белка. Для установления содержания белка в моче ставят качественные и количественные  пробы.

проб а с с у л ь ф о с а л и ц и л о в о й В  пробирку наливают                мл мочи кислой  реак-

ции и добавляют  капель              раствора сульфосалици- ловой кислоты. При наличии белка образуется помутнение, не исчезающее при подогревании (при содержании альбумоз помут- нение исчезает при    Проба с сульфосалициловой кислотой одна из самых чувствительных.

проб а с  В пробирку берут 1,25 мл прозрачной мочи и  до-

бавляют  5  мл             раствора  сульфосалициловой  кислоты. Через 5 мин определяют оптическую плотность пробы в кюветах с рабочей шириной 5 мм при светофильтре  нм (оранже- вый или красный светофильтр) против контроля.

Методика приготовления контроля следующая. В центрифуж- ную пробирку наливают 1,25 мл испытуемой прозрачной мочи и Добавляют к ней 5 мл     раствора хлористого натрия. Оптическую плотность измеряют при тех же условиях, что и опытной пробы. Из оптической плотности опыта вычитают опти- ческую плотность контроля. Расчет проводят по калибровочному

139

графику, построенному на основании разведения стандартного альбумина в   растворе хлористого натрия с концентра- цией   10, 50 и 100 в 100 мл раствора. Из каждого стандарт- ного разведения берут 1,25 мл и обрабатывают как опытные пробы.

Качественна я проб а с  азотно й  В пробирку с   мл   раствора азотной кислоты осто- рожно по стенке пробирки приливают мочу так, чтобы обе жид- кости не смешивались, а как бы соприкасались. В случае присут- ствия белка в моче на границе между жидкостями появляется белое кольцо (диск), представляющее собою слой белка, коагу- лированного азотной кислотой. Кольцо может появиться также при реакции кислоты с другими составными частями мочи. Так,   моча, содержащая много уратов, образует кольцо, со- стоящее не из белка, а из уратов и расположенное не на границе между мочой и   а в верхнем слое. При легком подогре- вании уратное кольцо исчезает. Присутствие муцина в моче так- же можег сопровождаться появлением кольца при постановке этой реакции, но оно находится значительно выше границы меж- ду мочой и реактивом и отличается рыхлостью.

Появление белка в моче называют   в которой выделяют две группы патологического состояния:  внепочечные   и  почечные   При про- теинуриях белок к моче примешивается по ходу

путей (при уроцистите, уретрите, пиелонефрите, воспалении по- ловых   При почечных протеинуриях белок в мочу попа- дает из почек. Почечные протеинурии бывают функционального и органического происхождения. Функциональные протеинурии появляются  вследствие  нарушения   проницаемости  капилляров почек. Их отмечают у коров в день родов, у  новорожденных  же- ребят в течение первых 3  дн.  жизни.                          Органические  это результат поражения паренхимы почек и увеличения проницаемости капилляров клубочков.   протеинурию наблюдают при гломерулонефритах, нефрозах, застойных явле- ниях, интоксикациях, часто при инфекционных болезнях.  Реналь-

и неренальная протеинурии нередко комбинируются.

Определение протеоз (альбумоз) в моче. Ставят биуретовую реакцию. К 3 мл подкисленной мочи добавляют около 1 мл на- сыщенного раствора хлористого натрия. Пробу кипятят,  а  затем в горячем виде фильтруют. К фильтрату добавляют   объема концентрированного раствора гидроокиси натрия и несколько ка-   сульфата меди. При положительной реакции по-

лучается красно-фиолетовое окрашивание.

  в моче появляются при гнойных, некротических процессах, в послеродовом периоде, при болезнях, сопровождаю-

усиленным клеточным распадом.

1140

Определение сахара. Пробы мочи для исследования на угле- должны быть свежими. При хранении мочи в  теплом

(не в холодильнике) глюкоза разлагается под действием фер-

бактерий, грибов.

Для определения сахара в моче пользуются пробами Бени- дикта,   экспресс-методом и  др.

Проб а Бенидикта. Реактив Бенидикта готовят следую- щим образом. В мерную колбу емкостью 1 л наливают 700 мл дистиллированной воды, добавляют 173 г цитрата натрия и 100   (или       200 г  ' кристаллического) карбоната  натрия. Смесь нагревают до растворения всех ее компонентов. Отдельно растворяют 17,3 г сульфата меди в 100 мл дистиллированной во- ды. Оба раствора смешивают в мерной колбе и после остывания   объем их доводят дистиллированной водой до 1 л. Реак- тив сохраняется  хорошо.

При постановке реакции в пробирку наливают 5 мл реактива и добавляют   капель мочи. Пробу нагревают 2 мин на пла- мени или 5 мин в кипящей водяной бане. Оставляют пробирку для остывания в течение  мин. При окрашивании содержимо- го пробирки в синий цвет пробу считают отрицательной. При на- личии сахара в моче   0,5 г в 100 мл) появляется зеленая, желтая или красная окраска пробы с соответствующим осадком на дне пробирки. Данная проба относится к полуколичествен- ным. Следует иметь в виду, что при содержании в 100 мл мочи от 0,05 до 0,5 г глюкозы цвет пробы зеленый, от 0,5 до 1 — желтый и           красный.

Проб а                         Реактив Ниляндера  (нитрат  висму- 2 г, сегнетовая    г,  раствор гидроокиси  нат-

  100                            раствор, хорошо сохраняющийся в склянке из темного стекла. При продолжительном хранении ре- актива перед постановкой опыта следует проверять его качество. Для этой цели в пробирку наливают реактив Ниляндера, разбав- ленный в 10 раз водой, и нагревают. Если реактив не испорчен, при кипении жидкость не должна темнеть.

С целью постановки пробы к   мл реактива Ниляндера до-   около 2 мл мочи и нагревают смесь в течение  мин. При положительной реакции смесь мутнеет и приобретает окрас- ку от коричневой до черной. Проба выявляет 0,1 г сахара  в

100 мл мочи. Однако при содержании в моче значительного ко- личества мочевой и салициловой кислот, гемоглобина проба дает ложноположительную реакцию.

 Для экспресс-определения сахара в мо- используют реактивную бумагу

В нормальной  моче  содержится незначительное  количество глюкозы, которое не удается обнаружить обычными качественны- реакциями. Если способность почечных канальцев реабсорби-

ровать глюкозу нарушается, то в  моче  появляется            —

Физиологическая глюкозурия у животных возникает при даче им кормов, богатых углеводами, иногда она появляется в результате испуга, а также при беременности. Патологическая глюкозурия может быть при сахарном диабете, отравлениях жи- вотных соединениями тяжелых металлов, хлоралгидратом, пидаром и другими токсическими веществами, при дистрофии пе- чени, различных воспалительных процессах в головном и спин- ном мозге.

Определение кетоновых тел. Для их обнаружения применяют пробу Лестраде, которую выполняют с реактивом следующего состава: нитропруссид    г,  сульфат 20  г, карбонат натрия (безводный) — 20 г. Указанные вещества тща- тельно растирают в фарфоровой ступке, смешивают и хранят ре- актив в темной, хорошо закупоренной стеклянной  банке.

При постановке пробы на белую бумагу или плитку насыпа- ют небольшое количество сухого порошка, который увлажняют  каплями мочи. При наличии кетоновых тел реактив окраши- вается от розового до темно-фиолетового цвета. Окрашивание может наступить через  мин.

В моче здоровых животных содержится мало кетоновых тел, и они не улавливаются пробой Лестраде. Положительная реак- ция на кетоновые тела в моче (кетонурия) встречается при

зе коров, кетонурии суягных овец, листериозе, продолжительных желудочно-кишечных расстройствах.

Определение крови и кровяных пигментов. Эритроциты в све- жей моче легко обнаружить под микроскопом. Кровяные пигмен- ты (гемоглобин и его        метгемоглобин, сульфгемогло- бин,   а также миоглобин выявляют с помощью спе- циальных  проб.

Бензидинова я             К 2 мл   раствора  пере- киси  водорода  добавляют           капель  свежеприготовленного насыщенного раствора бензидина в ледяной уксусной кислоте, размешивают и к смеси по каплям добавляют мочу. Окрашива- ние смеси вначале в   а затем в синий цвет указывает на содержание в моче кровяных пигментов.

Моча здоровых животных дает отрицательную реакцию на кровяные пигменты. Положительная реакция может быть в ре- зультате появления в моче крови, гемоглобина, а также миогло- бина.

Нахождение крови в моче называют гематурией, которую ре- гистрируют при нефритах, нефрозонефритах, инфарктах почек, мочекаменной болезни, цистите, С-гиповитаминозе, распаде опу- - холей в мочевой системе.

Появление гемоглобина в  моче  именуют  Она развивается у больных животных при гемоглобинемиях как.

142

болезней, острых отравлений, ожо- гов, протекающих инфекционных болезней.

реакци я дл я определени я м и о-

в             5 мл испытуемой мочи прибавляют 2,8 г кристаллического сульфата аммония, после чего смесь фильтру- ют. Если фильтрат имеет красно-коричневый цвет, это значит, что в моче имеется миоглобин, а если  фильтрат не                                          при- сутствует гемоглобин.

Определение индикана. В моче здоровых животных индикан содержится в незначительном количестве. Повышенное выделе-

,ние индикана с мочой называют    Наблюдают ее при интенсивном гниении белковых веществ в кишечнике (непро- ходимость кишечника,                          а также при уси- распаде белков в  организме                                   опухоли и др.).

Индикан в моче выявляют с помощью пробы Обермайера.

В пробирку наливают 6 мл мочи и 6 мл раствора хлорного железа   г хлорного железа растворяют в 100 мл кон- центрированной соляной кислоты). Через 5 мин добавляют

2 мл хлороформа, после чего содержимое пробирки встряхива- ют. При наличии индикана хлороформ в нижней  части пробирки В нормальной моче билирубин содержится в малых  количе-

ства индикана.

Определение желчных пигментов и кислот. Из желчных пиг- ментов в моче могут присутствовать билирубин и

тела.

Проб а    билируби н по    В  пробирку берут   мл исследуемой мочи и наслаивают  водный раствор йода (1 г кристаллического йода, 2 г калия йодида и 30 мл дистилли- рованной воды) или  спиртовой раствор йода. При поло- жительной реакции на границе между слоями жидкостей ляется зеленое кольцо.

В нормальной моче билирубин содержится в малых количе- ствах, не определяемых существующими реакциями. При обна- ружении билирубина в моче  говорят  о (при  ме- ханической и  паренхиматозной

Проб а н а

тел а по Богомолову. В химический стаканчик берут

15 мл мочи и добавляют      мл насыщенного раствора сульфа- та меди. В случае помутнения пробы в нее вносят несколько ка- пель концентрированной соляной кислоты до просветления. Че- рез 5 мин к содержимому стаканчика добавляют                   мл хлоро- форма и взбалтывают. При наличии                                     тел слой хлороформа окрашивается от розово-красного до медно-красного цвета.

С мочой здоровых животных выводится незначительное коли- чество уробилиногеновых тел, которые при стоянии мочи перехо-

дят в                      тела. Повышенное количество тел называют

билинурию отмечают при гемолизе                     в кровяном рус- ле, напрамер при болезнях, отравлениях ге- молитическими ядами, болезнях печени и кишечника. Полное от- сутствие   тел указывает на механическую

туху.

Количество желчных кислот в моче значительно увеличивает- ся при механической и паренхиматозной желтухах.