Методы лабораторной диагностики. Материалом для исследования являются раневое отделяемое

Материалом для исследования являются раневое отделяемое, отечная жидкость, кусочки мышечной ткани, перевязочный материал. Рекомендуется брать материал из разных участков очага поражения, особенно из глубоких слоев. При сепсисе исследуемым материалом является кровь.

На первом этапе проводят первичную бактериоскопию: наличие в препаратах крупных грамположительных палочек со спорами, некоторые из которых образуют макрокапсулу позволяет поставить предварительный диагноз (табл. 6).

Исследуемый материал вносят в несколько пробирок со средой Китта-Тароцци, среду Вильсона-Блера (железо-сульфитный агар) и молоком под маслом. Часть пробирок прогревают при 80°С в течение 30 мин для уничтожения неспорообразующих бактерий. Посевы инкубируют в термостате при 37°С. Клостридии растут в глубине среды, в молоке образуют творожистый сгусток. На среде Китта-Тароцци отмечается помутнение и газообразование, а на среде Вильсона-Блера черные колонии в глубине агарового столбика.

Для получения чистой культуры производят пересев на кровяно-сахарный агар и инкубируют в строго анаэробных условиях 3-4 суток. Выросшие колонии пересевают на среду Китта-Тароцци. Идентификацию проводят по биохимическим свойствам.

Для быстрой серологической идентификации токсина С. рerfringens, обладающего лецитиназной активностью проводится лецитиназная проба, основанная на реакции нейтрализации токсина моновалентными сыворотками. Исследуемый материал (раневое отделяемое) помещают в пробирки с раствором лецитина и добавляют антисыворотки. Присутствие лецитиназы выявляется помутнением жидкости в пробирке. При нейтрализации лецитиназной активности токсина соответствующей антисывороткой жидкость остается прозрачной. Для серологической идентификации токсинов также может быть использована биопроба.

Таблица 6. Схема бактериологического метода диагностики газовой гангрены

1 этап	1. Ориентировочная бактериоскопия Окраска по Граму: грам+ крупные палочки с центрально или субтерминально расположенной спорой Окраска по Цилю-Нильсену: споры-красные, вегетативные формы-синие Окраска по Бури-Гинсу: на темном фоне капсулы бактерий в виде бесцветных ободков вокруг красных бактерий 2. Посев исследуемого материала на среду Китта-Тароцци (помутнение и газообразование из-под кусочков печени)
2 этап	1. Посев на чашку Петри с сахарным кровяным агаром с целью получения изолированных колоний 2. Инкубация в анаэробных условиях при 37°С 3-4 суток
	1. Изучение культуральных свойств Сахарно-кровяный агар: C.perfringens — гладкие сероватые колонии с ровными краями и плотным возвышением в центре колонии, окруженные зоной полного или частичного гемолиза C.novyi — сероватые, полупрозрачные шероховатые колонии, окруженные зоной гемолиза C.septicum — сплошной нежный налет, переплетающиеся нити на фоне гемолиза C.hystolyticum — небольшие блестящие колонии с ровными краями и небольшой зоной гемолиза 2. Пересев на среду Китта-Тароцци и сахарно-кровяный столбик с целью выделения чистой культуры
3 этап	Идентификация чистой культуры по: морфологическим и тинкториальным свойствам (грам+ крупные палочки с центрально или субтерминально расположенной спорой) культуральным (строгие анаэробы, см. 2 этап) В глубине сахарно-кровяного столбика колонии имеют вид C.perfringens — комочки ваты (R-формы) или зерен чечевицы (S-формы) C.novyi — нежные хлопья ваты, разрыв среды вследствие продукции газа C.septicum — чечевицеобразные колонии C.hystolyticum — «пушинки» с уплотненным центром биохимической активности   Лактоза Сахароза Манит C.perfringens + + + C.novyi + — - C.septicum — — - C.hystolyticum — — - Тест-системы для изучения биохимической активности Api 20 A определение токсигенности (лецитиназная проба) биопроба: реакция нейтрализации токсина антитоксической сывороткой

Лечение и профилактика

Лечение направлено на нейтрализацию гангренозных токсинов антитоксином; хирургическое удаление некротизированных тканей. Применяют антитоксические сыворотки, антибактериальную химиотерапию и гипербарическую оксигенацию.

При травмах проводится первичная хирургическая обработка раны, соблюдение правил асептики и антисептики при операциях, предупреждение травматизма.

Специфическая профилактика проводится планово и экстренно. Для создания искусственного активного иммунитета применяют секстанатоксин, в состав которого кроме столбнячного и ботулинического (А, В, Е) анатоксинов, входят анатоксины C.perfringens и C.oedematiens.