Биологическое исследование материала от крупного рогатого скота

• Вскрытие биопробного животного, зараженного кровью, взятие крови из сердца шприцем в пробирку, помещение про­бирки на 2 часа в термостат, затем на 2 часав холодильник, отделение сывороткы от сгустка.
• Посев лимфатических узлов (парааортального, пахового), печени, селезенки, крови на 2 пробирки с твердой питательной средой (например, эритрит агар) и крови на 2 пробирки бульона Хоттингера.

Примечание: работа в лаборатории экспериментальных животных; посев органов и крови - с помощью стерильных деревянных палочек или петли; по 1 пробирке с посевами органов на плотной питательной среде и по 1 пробирке с посевами в бульоне помещается в СО₂-инкубатор. Инкубирование всех посевов при температуре 37 °С.

Занятие 14.

Биологическое исследование крови больного бруцел­лезом

• Продолжение исследования сыворотки биопробного животного, зараженного кровью больного.
• Исследование сыворотки, взятой накануне от больного живот­ного, в реакции Хеддльсона, Райта и РПГА микро­методом.

Биологическое исследование материала от крупного рогатого скота

• Исследование сыворотки биопробного животного, заражен­ного молоком.
• Исследование сыворотки в реакции Хеддльсона, Райта и РПГА микро­методом.

Лабораторный диагноз бруцеллеза у человека

Биологическое исследование крови больного бруцел­лезом.

• Просмотр посевов лимфатических узлов, органов, крови биопробных животных, зараженных кровью больного на плотных питательных средах. Отбор колоний, подозрительных на рост бруцелл. Приготовление мазков, окрашивание по Граму, просмотр. Постановка реакции агглютинации с трипафлавином.
• Постановка ОРА с бруцеллезной агглютинирующей сывороткой в разведении 1:25. Лабораторный диагноз бруцеллеза у животного

Биологическое исследование материала от крупного рогатого скота. Окончание исследования молока.

• Просмотр посевов лимфатических узлов, органов, крови биопробных животных, зараженных кровью больного на плотных питательных средах. Отбор колоний, подозрительных на рост бруцелл. Приготовление мазков, окрашивание по Граму, просмотр. Постановка реакции агглютинации с трипафлавином.
• Постановка ОРА с бруцеллезной агглютинирующей сывороткой в разведении 1:25.

Примечания:

-выдача окончательного ответа; уничтожение всех посевов от животных;

-заполнение паспорта на выделенные из крови больного и молока животного культуры бруцелл; если из анализов крови больного человека и молока круп­ного рогатого скота бактериологическим методом выделить культуру бруцелл не удалось, то при наличии роста возбудителя от биопробных животных - выделение культуры, идентификация и дифференциация согласно планам занятий 7, 8, 9, 10, 11,12.

 

Экспрессные и ускоренные методы

Учитывая, что бруцеллы относятся к медленно растущим микроорганизмам и окончательный ответ бактериологического и биологического методов исследования можно ожидать только через 3 - 5 недель, были разработаны тесты, основанные на иммунологическом взаимодействии специфического антигена и антител (реакция иммунофлуоресценции - прямой вариант, реакция нейтрализации антител, иммуноферментный анализ, а также молекулярно-биологический метод – ПЦР).

Положительный результат экспрессного исследования позволяет заподозрить наличие Brucella. Отрицательный результат не является основанием для отрицательного ответа по анализу.

Сигнальное исследование на бруцеллез всегда проводится в комплексе с развернутым классическим бактериологическим анализом. После выделения и идентификации культуры, в случае не­обходимости, производят дифференциацию видов бруцелл.

Примечание: учет реакции Райта - через 24 часа; сравнение титра реакции Райта с титром предыдущего исследования.

Занятие 16.