Определение групп крови по системе аво

1. Как определить группу крови перекрестным способом?

Для определения группы крови используют стандартные сыворотки групп 0I, AII, BIII двух серий каждой группы и, если нужно, группы ABIV, и стандартные эритроциты групп 0I, AII, BIII.

· Кровь для анализа берут из пальца или мочки уха (при использовании стандартных эритроцитов – кровь из вены 2мл). Кровь центрифугируют или оставляют в покое на 20-30 мин.

· Определение производят на белой пластинке, на верхнюю часть которой наносят слева направо обозначения 0I, AII, BIII.

· Дальше по одной большой капле наносят стандартные сыворотки всех трёх групп под соответствующими названиями. Обычно используют сыворотки двух серий, поэтому всего получается 6 капель сывороток. В учебной е лаборатории – 3 капли сывороток.

· На нижнюю часть наносят по одной капле (с булавочную головку) стандартных эритроцитов (слева направо 0I, AII, BIII).

· Из пробирки с исследуемой кровью, где уже образовалось две фракции (сверху – сыворотка, снизу эритроциты), аккуратно (не взбалтывая эритроциты) берут сначала сыворотку, и по одной большой капле добавляют в капли стандартных эритроцитов на пластинке (соотношение эритроцитов к сыворотке 1:10). Потом со дна пробирки набирают эритроциты и капают (с булавочную головку) их рядом со стандартными сыворотками на пластинке.

· Во всех каплях сыворотку тщательно перемешивают с эритроцитами, пластинку покачивают, затем на 1-2 мин оставляют в покое и снова периодически покачивают. Наблюдение за ходом реакции проводят не менее 5 мин. Агглютинация в каплях со стандартными сыворотками обычно начинается быстро (10-30 сек).

2. Как определить группу крови, используя цоликлоны?

Цоликлоны – это моноклональные антитела, использующиеся в исследовании на группу крови вместо гемагглютинирующих сывороток, которые выделяют в результате слияния мышиных В-лимфоцитов с клетками мышиной миеломы.

· В каждое углубление палитры нанести отдельно по одной большой капле (0,1 мл) цоликлона анти-А и анти-В.

· Рядом с каплями антител нанести по одной маленькой капле (в 10 раз меньше капли антител) исследуемой крови. Тщательно всё перемешать.

· Наблюдать за ходом реакции слегка покачивая палитру в течение не более 2,5 мин.

· Положительный результат – агглютинация. Отрицательный – капля равномерно окрашена в красный цвет (ничего не происходит).

· Агглютинаты видны невооружённым глазом в виде мелких красных агрегатов, быстро сливающихся и образующих крупные хлопья вплоть до одного большого агглютината. Агглютинация наступает обычно в первые 3-5сек.

Трактовка результатов:

· Агглютинации нет ни с цоликлонами анти-А ни с анти-В. Следовательно, исследуемые эритроциты не содержат антигенов А и В, и кровь принадлежит к группе 0(I).

· Агглютинация с цоликлонами анти-А ⟶ есть антиген А ⟶ группа А(II).

·  Агглютинация с цоликлонами анти-В ⟶ есть антиген В ⟶ группа B(III).

· Агглютинация и с анти-А и с анти-В ⟶ есть оба антигена ⟶ группа AB(IV).

 

3. В каких случаях происходит агглютинация эритроцитов?

Агглютинация эритроцитов происходит в случае, если антиген, находящийся на плазматической мембране встречает подходящее ему антитело. Происходит при трансфузионном шоке (переливании несовместимой крови), а также при иммунных реакциях гиперчувствительности II типа (цитотоксический).   

4. К какому классу иммуноглобулинов относятся агглютинины в системе АВО?

Агглютинины – γ-глобулинам (иммуноглобулинам) классов M и G.

5. Назовите группу крови по системе АВО в примере.

Слева вверху – 1 группа;

Справа вверху – 4 группа;

Остальные не понятно, не знаю

 

Билет 6.