Микробиологическая диагностика холеры.

Основной метод диагностики: бактериологический т.к. входит в группу особенно опасных. Исследованию подлежат: фекалии, промывные воды кишечника, рвотные массы, секционный материал тонкого кишечника, желчного пузыря. Вода, пищевые продукты, смывы с овощей и фруктов, смывы с рук персонала, забор материала делается специально-обученным персоналом и специальными методами защиты. Исследования проводится в лабораториях спец. Назначния

1 час: засевания на слективные среды: 1% пептонная вода, щелочной агар, TCBS → термостат 37⁰ – 3-4 часа →пересев на вторую ПВ, ЩА → 2 часа.

Экспресс методы диагностики холеры:

· Исследование материала в реакции иммунофлуоресценции с О₁-холерной сывороткой или О_139-й(первичного или вторичного).

· Постановка реакции аглютинации в препарате висячая капля +

· Иммобилизация холерного вибриона: висячая капля + О₁ сыворотка → прекращение подвижности.

12 часов: учет роста, отвивка подозрительной колонии на косой агар Клиглера, щелочного агара для выделения возбудителя.

12 - 24 часа: рост чистой культуры и идентификация культуры.

Идентификация: окраска по Грамму, изучение подвижности и установления принадлежности к роду по биотестам (оксидаза, ферментация глюкозы, проба на индол, сероводород).

Дифференцировка: возбудителя от холероподобных вибриов по тестам: Реакция агглютинации по 1 и 139 сыворотке, отношение к триаде сахаров Хейберга (арабиноза -, сахароза +, манноза +, у подобных все +), отношение к фагам.

24-36 часов: устанавливается биологический вариант возбудителя (биовар):

 

	Холерный вибрион	Эльтор
Лизабельность	Лизируется с 4 типом Мукерджи	Лизируется фагом Эльтор2
Рост на агаре с полимексином В	Не растет	Растет
Агглютинация эритроцитов курицы	Не аглютинирует	Аглютинирует
Реакция фогес-проскауера	Отрицательная	положительная

Установление серовара с помощью сывороток: inaba, agava.

Серологический метод: определение парных сывороткам больного специфических антител в реакции пассивной гемагглютинации.

Профилактика.

Общаяя: выявление, изоляция, исследование воды, устройство туалетов, сан-просвет работа.

Специфическая: холерная моновакцина – убитая взвесь возбудителей, холерная вакцина+анатоксин – приготовлена из холерогена, холерные бактериофаги (через рот), химиопрофилактика – терациклином, фуразалидолом.

Зооантропонозы.

ЧУМА.

Возбудитель: Y. pestis

Особенности (для всех зооантропонозов):

Источники: природная очаговость, высокопатогенны для животных (суслики, тушканчики, крысы) → источник животное.

Распространение: воздушный, пищевой, контактно бытовой, трансмессивно.

Пути попадания: кожа, слизистые (ЖКТ, глаз), сразу в кровь

Клинические формы: кожная, кожно-бубонная, легочная, кишечная, септическая

Особенности профилактики: ветеринарная профилактика (домашних и диких) включающая комплекс: дезинфекция, дезинсекция, дератизация.

           Свойства Y. Pestis: палочка овоидной формы, биполярноокрашиваемая (центр белый), Г «-», спору не продуцирует, жгутиков не имеет, есть капсула. Растет на простых питательных средах (питательный агар, среда Эндо-Левина) дает колонии с шероховатыми краями, психрофильные микроорганизмы (25-28⁰).

           Факторы патогенности:

• Антифагоцитарные: капсула, М-белок клеточной стенки блокируют фагоциты
• Продукция эндотоксинов (мышиный токсин)
• Выработка бактериоцинов – блокируют обменные процессы
• Продукция пестицинов – это снижает гуморальные факторы защиты (комплемент, белки крови)

Б/Х свойства:

Лактоза                          -

Глюкоза          +

Газ                    -

Сероводород -

Цитрат натрия -

Мочевина       +

Индол              -

Подвижность -

Антигенные свойства: антигены капсулы и клеточной стенки.

Патогенные свойства доказаны более чем на 200 видах животных. Особенно сурки, суслики, мыши, крысы, хомяки, белки.

Экология.

В природных условиях основным резервуаром являются грызуны. Выражена природно-очаговость. В организме грызунов возбудитель быстро размножается, передается трансмессивным путем (через кровососущих насекомых – блоха). Во внешней среде длительно сохраняется, длительно сохрашяется при низких температурах 0 градусов – 6 мес, в замороженном виде до 1 года, в почве до 5 месяцев. Подгибается при кипячении за 1 минуту, действуют сильные концентрации дезинфектантов за 5-10 минут.

Pestis (лат) – чума, по английски – plaque, schuy (китайсикй) т.е распространена во всех странах. Известные эпидемии чумы: Густинианова (525 год), чума в Европе, Китае 14 век (в Смоленске выжило 5 человек), чума в Москве 1774 год. Очаги чумы до сих пор регистрируются в индии, Индокитае, Мадагаскаре, в России (Тува, горно-алтайская республика, прикаспийский округ, забайкальский округ), Казахстан. В этих очагах постоянно регистрируются случаи заболевания населения.

Патогенез.

Источник: больные грызуны, блохи, больной человек

Пути передачи: воздушный, пылевой, пищевой, трансмессивный, контактно-бытовой.

Входные ворота: кожа, слизистые

Клинические формы: кожно-бубонная (некроз в лимфатическом узле), легочная форма (первичная, вторичная), септическая (первичная, вторичная)

Летальность: более 60%

Инкубационный период: 4-6 дней

Течение заболевания: начало: острое, лихорадка, интоксикация, мышечная слабость, сильная головная боль, лицо гиперемированна, на коже в месте укуса пятно → папула → везикула → пустула → выход микроорганизмов. При бубонной форме бубон болезнен, гиперемирован, отечен сразу вовлекается несколько узлов → возникает конгломерат. При легочной форме возбудитель выделяется с мокротой. При септической форме на теле сыпь, заканчивается кровотечениями.

Лабораторная диагностика: особо опасная карантинная инфекция → работа в очаге будет проводится только специальным персоналом в специальном снаряжении.

Исследуемый материал – содержимое бубона, мокрота, кровь, трупный материал (человека, грызунов, блох), вода, почва, продукты.

Методы: бактериоскопия, РИФ, иммуноферментный анализ, РНГА, термопреципитация, методы генетической диагностики.

Бактериологический: посев на среды агар, Эндо-Левина, на среды с антибиотиками (для подавления другой микрофлоры), посев на среды с противочумным бактериофагом, на кровяные среды, среды с генциан фиолетом. Посевы инкубируют при температуре 25-28 градусов. На средах дает R и S – формы колоний.

Изучаются морфологические свойства, биохимические свойства. Выделенная культура проверяется в биологической пробе на морских свинках.

Профилактика.

Наблюдение за природными очагами чумы. Продедение дератизации, дезинфекции и десинсекции.

Специфическая профилактика у людей работающих в очагах, противочумных институтах, военных работающих с биологическим оружием – иммунизация живой противочумной вакциной из Е V -штамма, химическая противочумная вакцина, в очагах чумы проводится химиопрофилактика с помощью антибиотика, противочумного иммуноглобулина.

 

СИБИРСКАЯ ЯЗВА

(ANTHRAX)

           Вызывает заболевание – B. anthracis. Зооантропонозное заболевание острой природы при котором на коже человека образуется карбункул в центре которого черная точка (уголек). Заболевание древнее. Этиологию изучали Кох, Пастер, Цинковский. Возбудитель описан в 1849 году Полендером. Заболевание распространено во всех странах, но чаще с развитым скотоводством (крупный и мелкий рогатый скот).

           Животные заражаются пищевым путем с водой, травой в споровой форме. Основная клиническая форма – кишечная, возбудитель выделяется с фекалиями и переходит в спору и сохраняется десятки лет.

Спора устойчива к температурам, дезинфектантам т. о. почва и вода стновится резервуаром.

           Свойства возбудителя: палочки объединенные в цепочку, по морфологии стрептобацила, неподвижен, продуцирует капсулу (в живом организме) и спору (во внешней среде). Грамм +, факультативный анаэроб, хорошо размножается на простых средах, темпратурный оптимум 12 градусов, колонии R-формы. На среде с пенициллинов переходит в L-форму – т.е. не продуцируют клеточную стенку Г- (форма жемчужного ожерелья). Эта способность используется для идентификации.

Антигенные свойства:

• Капсульный антиген белковой природы
• Антигены клеточной стенки – термоустойчивые, можно изучить в реакции термокольципреципитации (р. Аскори) для обнаружения антигена в исследуемом материале, который кипятится, измельчается и исследуется.
• Экзотоксины на них образуются антитоксины.

Факторы патогенности:

• Капсулообразование
• Продукция экзотоксинов: летальный (вызывает выработку рядов цитокинов – ИЛ1, фактора некроза опухолей), отечный (имеет белки, которые проникают внутрь клетки → блокируют работу клеток).

Патогенез.

Источники: больное животное

Пути передачи: контактный, пылевой, пищевой, трансмессивный

Инкубационный период: 2-3 дня, для пылевого пути несколько недель

Клиническая форма: кожная – сибиреязвенный карбункул, кишечная, легочная, септическая форма

Лабораторная диагностика:

Бактериоскопия – исследование материала карбункула, мокроты больного, в препаратах окрашенных по Грамму

РИФ – для выявления стрептобактерии

Бактериологический: посев материала на простой питательный агар, сывороточный агар, кровяной агар, среды с пенициллином → колонии R-формы, L-формы, реакция термокольципреципитация – для обнарудения антигенов, нахождение факторов патогенности.

Биологическая проба – на кроликах

Серологический метод – обнаружение антигенов в трупном материале методом Асколи

Профилактика.

Ветеринарная профилактика – среди животных, для людей – вакцина СТИ ( живые акапсульные штаммы), применяется накожно, иммунитет на 6 месяцев, вакцина инактивированная сибириязвенная (убитая), создана из токсигенных штаммах, вводится подкожно, курсом - пятикратно, иммунитет на 1 год. Сибириязвеный иммуноглобулин – снят с производства из за аллергических реакций, получен путем иммунизации лошади, использовался как лечебный, профилактический препарат, содержит готовые антитела, экстренная профилактика – антибиотиками (ципрофлоксацин, доксициллин, амоксициллин).

Род Brucella

1. Классификация: аэробные палочки и кокки, роды с неясным систематическим положением, р. Brucella, B. melitensis, B.abortus, B.suis

2. Морфология: Гр-, кокки, не образуют спор, не имеют жгутиков, есть капсула.

3. Тип питания: хемоорганотрофы.

4. Биологические свойства:

а) требовательны к питательным средам

б) размножаются медленно

5. Факторы патогенности и патогенез:

а) инвазивные факторы (капсула, гиалуронидаза)

б) эндотоксин

Проникновение различными путями в организм ® инвазия и проникновение в лимфу и кровь ® разносятся по всему организму ® достигают л. у. (генерализованная лимфоаденопатия), где размножаются и накапливаются, образуют гранулемы в печени и селезенки ® периодическое поступление в кровь.

6. Клинические проявления: инкубационный период от нескольких недель до нескольких месяцев. Выраженная легко переносимая лихорадка, умеренная интоксикация. Лимфатические узлы мягкоэластической консистенции чаще безболезненные. Аппетит у больных снижен, отмечается сухость во рту, жажда, склонность к запорам. Язык умеренно обложен, печень (реже селезенка) увеличена.

7. Иммунитет: стойкий, напряженный ГИО (IgM и IgG) и КИО (в форме ГЗТ)

8. Эпидемиология. Зоонозное заболевание. Источник – домашние животные. ОПЗ – алиментарный. Устойчивы к факторам окружающей среды, высокочувствительны к дезинфектантам, высокой температуре.

9. Профилактика: специфическая: живая вакцина, предупреждение рецидивов: инактивированная вакцина, специфический иммуноглобулин

10. Лечение: антибиотики широкого спектра действия

11. Диагностика:

Материал: кровь, реже грудное молоко, желчь, костный мозг.

а) Бактериологическое исследование.

б) Биопроба: заражение морский свинок или белых мышей. Вскрытие трупов через 20-30 дней после заражения. Мазки-отпечатки из органов по Гр, посевы на среды выделения.

в) Кожно-аллергическая проба по Бюрне для выявления ГЗТ к бруцеллам. Положительна у больных и вакцинированных людей.

Материал: сыворотка крови. Серодиагностика: реакция Райта (развернутая РА), реакция Хедльсона (пластинчатая РА), РСК, опсонофагоцитарная реакция.

 

Род Francisella

1. Классификация: аэробные палочки и кокки, роды с неясным систематическим положением, р. Francisella, в. F. tularensis

2. Морфология: Гр-, кокки, спор не образуют, жгутиков не имеют, есть слабовыраженная капсула.

3. Тип питания: хемоорганотрофы.

4. Биологические свойства:

а) аэробы, требовательны к питательному субстрату

б) ферментируют гл, мальтозу с образованием кислоты и глицерин

5. АГ структура: Vi-АГ и О-АГ.

6. Факторы патогенности и патогенез:

а) адгезивные факторы (капсула и белки КС)

б) эндотоксин (ЛПС) – вызывает общую интоксикацию

Адгезия на кл респираторного и кишечного трактов ® воспалительный процесс, массивное размножение микробов ® проникают в регионарные л. у., вызывая воспаление ® размножение и частичная гибель МБ, выделение эндотоксина. При бактериемии происходит расселение в различные органы и ткани. Возникает множественное увеличение л.у., могут развиваться гранулемы в разных органах (печень, селезенка, легкие).

7. Клинические проявления: инкубационный период 3-7 дней. Заболевание начинается остро или даже внезапно, больные могут нередко указать даже час начала болезни. Температура тела повышается до 38—40°С. В зависимости от клинической формы наблюдаются боли в глазах, боли при глотании, боли за грудиной, боли в области развивающегося бубона. Клинические формы болезни определяются воротами инфекции.

8. Иммунитет: стойкий, ГИО (напряженный), КИО, ГЗТ.

9. Эпидемиология. Зоонозная инфекция. Резервуары – грызуны. ОПЗ – контактное, иногда алиментарно или трансмиссивно. МБ устойчив во внешней среде.

10. Профилактика: живая вакцина Гайского-Эльберта.

11. Лечение: антибиотики широкого спектра действия.

 

тема: Облигатные анаэробы.

Отличаются механизмом обменных процессов т.е. без участия свободного кислорода. Конечным акцептором в дыхательной цепи являются нитраты, сульфаты или органические соединения.

Спорообразующие	Споронеобразующие (17 родов)
Клостридии (грамм – палочки): · C. pefringes · C. septicum  возб. газовой гангрены · C. hovyi · C. Tetani → возб. столбняка · C. Botulinum → возб. ботулизма · C. difficile → возбудитель мембранозного колита у получающих антибиотики Грамм + палочки: · actinomicetas	Грамм – палочки · Bacteroides · Fusobacterium · Porphynomonas · Prevotella Грамм – кокки · Veillonella Грамм + кокки

Род Clostridium.

           Палочки, крупные, спорообразующие – диаметр споры больше диаметра палочки, подвижность +/-, форма веритиноообразная, положение споры имеет дифференциальное значение, капсулы не продуцируют (есть исключение). Растут на средах (безкислородных): Кита-Тороци, Вильсон-Блера, глубокий столбик сахарного агара, кровяной агар в условиях анаэростата.

           Биохимически активны, обладают набором сахаролитических, протеолитических ферментов, разлагают вещества до газа (аммиака, СО₂), масляных кислот.

Экология клостридий.

           В норме входят в состав нормальной микрофлоры ЖКТ животных (особенно жвачных) и человека – переваривают пищу, усиливают перистальтику и одновременно с этим продуцируют токсины, которые тут же разрушаются протеазами соков.

           С фекальными массами выбрасываются в среду и переходят в споровидную форму, и сохраняются там в течении десятков лет. Резервуаром клостридий является почва. Клостридиальная анаэробная инфекция имеет экзогенное происхождение – раневая инфекция. Входными воротами является рана в которой создаются анаэробные благоприятные условия для перехода споровой формы в вегетативную.

СТОЛБНЯК.

Тяжелое, острое инфекционное заболевание, которое имеет одного возбудителя C. tetani и проявляется неврологической симптоматикой.

Характеристика C. tetani

Палочка открыта в 1883 году Монастырским.

Морфологические особенности:

· Подвижность +

· Спора – на периферии

· Форма – ракетки

· Грамм +

· Культивируется – на сахаро-кровяном агаге, Кита-Тороции

· Б/Х – нет сахаролитических ферментов, мало протеолитических ферметов.

Условия для заражения столбняком: рана, роды, аборты (вне медицинских учреждениях), операция, нарушения кровотока в ране, занос палочки в раневую поверхность с почвой, пылью, мед. инструментами, перевязочным материалом, перевязочным, шовным материалом.

Патогенные свойства. Патогенез заболевания.

Продукция экзотоксинов – тетаноспазмина, тетанолизина. Это белок который действует дистанционно - по нервным отросткам через аксоны попадает в ЦНС и подавляет тормозные процессы нейромедиаторов в синапсах → нарушает передачу нервных импульсов → мышечный спазм разных групп мышц. В легких случаях наблюдается сокращение мышц вокруг раны.

Столбняк у новорожденных: болеют много детей в странах где женщины рожают без медицинской помощи и перерезание пуповины делается не стерильными предметами.

Клинические формы столбняка: учеловека нисходящий – первыми вовлекаются процессы головы, столбняка, верхних конечностей, затем нижных конечностей. У животных восходящий харакетер.

Лабораторная диагностика.

Бактериологический метод. На исследования берут шовный материал, перевязочный материал, препараты для парентерального введения, образцы почвы. Засевают в анаэробные среды (Кита-Тороции) культивируют в условиях анаэростата 2-3 дня, затем проверяют на стерильность (помутнение, газообразование). Материал от больного берут редко т.к. и так видно что это столбнях, но могут взять кровь, ликвор, содержимое раны. В материале ищут сам возбудитель, а могут искать токсины с помощью биологической пробы на мышах одновремнно водят противостолбнячный анатоксин → мышка выживет, и не вводят анатоксин → мышка умирает.

Профилактика.

Экстренная: проводится в случае травмы, ранений, криминальных абортов. Включает ПХО раны, затем вводится АС-анатоксина (для активной профилактики), введение противостолбнячной сыворотки, противостолбнячного иммуноглобулина (готовые антитоксины – для пассивной иммунизации), проводится избирательно под контролем антитоксического иммунитета - делается с помощью реакции пассивной гемагглютинации у пациента. У взрослых 0,2 мл крови из пальца. Если РПГА + в соотношении 1:20 означает нормальный защитный титр. Если титр снижен, вводят вторые два препарата.

Плановая: обязательная иммунизация всех детей с трех месяцев до 17 лет. У взрослых иммунизируются военнослужащих, работники МЧС, пожарники, шахтеры.

Столбняк управляемая инфекция и заболеть столбняком неприлично. Болеют им только те кто не обращается к врачам.

ГАЗОВАЯ ГАНГРЕНА.

(клостридиальный мионекроз, клостридиальный целлюлит)

ГГ – острое инфекционное заболевание полимикробной природы с тяжелой интоксикацией организма с некрозом ткани и образованием газов в мягких тканях.

Возбудители.

C. pefringes, C. septicum, C. hovyi. Г+ палочки, дифференцируются по положению споры, наличию жгутиков, капсулообразованию, и продукции типоспецифических токсинов. Перекрестного иммунитета нет.

Возбудитель в споровой форме попадает через раны глубокие, тампонированные, сдавлением мягких тканей, осколочные раны, при которых ПХО произведено после 2-х часов после получения.

Факторы патогенности: продукция экзотоксинов (12 штук) – имеют свойство форментов (фосфолипазы, протеазы). Носят названия по буквам греческого алфавита. Главным из них является токсин α – обладает свойством лецитиназы → действует на клеточную мембрану нарушая ее проницаемость. Другие токсины вызывают отек, третье некроз. Действуют местно на ткань. Интоксикация связана с распадом тканей.

Иммунитет.

Носит антитоксический характер (а не на возбудитель).Типоспецифичен, ненапряженный.

Лабораторная диагностика.

Материал: содержимое раны, кусочки пораженных органов и тканей

Метод: бактериоскопия – Г+ палочки, бактериологический: посев среды, биохимические тесты (створаживание молока, колонии черного цвета). Дифференцировка внутри рода по биологической пробе с фильтратом культуры содержащей экзотоксин и антитоксической сывороткой соответствующего возбудителя. Это надо ни сколько для диагноза, сколько для лечения.

Лечение.

Специфическое: срочное введение противогангренозной сыворотки (поли или моновалентной).

Хирургическо е: ведение раны открытым способом, помещение в барокамеру, антибиотики

Профилактика.

Плановая: секста-анатоксин (перфрингинс, септикум, нови, тетанис, ботулинум, дефицилле).

БОТУЛИЗМ.

Пищевая инфекция, факторы передачи – консервированный продукты мясного происхождения, рыбного происхождения, консервированные грибы.

Факторы патогенности: продукция ботулотоксина (самый сильный яд) разовая доза 0,001 мг. Действует исключительно на нервную систему, устойчив к действию пищеварительных ферментов, температуре. Есть 7 вариантов токсина (по буквам латинского алфавита), некоторые устойчивы к пищеварительным ферментам и бактериальным протеазам. Есть штаммы токсина которые разрушаются ферментами. У токсина высокие имуногенные свойства. Активируются трипсином желудочного сока, протеазами пищевых продуктов. Действуют в нервных синапсах где фиксируются и их раздражают. Чаще всего поражают глазодвигательный нерв, языкоглоточный нерв, зрительный нерв → куриная слепота, птоз, анизаккария.

Клинические формы: гастроэнтеритическая, нервно-паралитическая, неврологическая.

Лабораторная диагностика: обнаружение токсина в материале от больного (промывные воды желудка, крвоь) и пищевых консервированных продуктов в биологической пробе на мышах с помощью нейстрализации токсина.

Лечение: введение антиботулитической сыворотки

Профилактика: правильное консервирование пищевых продуктов.

Неклостридиальная анаэробная инфекция.

Вызывается представителями следующих родов:

Вид	Рода
Bacteroides	B. fragilis B. urealyticus
Porphyromonas	P. gingivalis P. endontales
Prevotella	P. melaninogenica
Fusobacterium	F. haerophorum

Носит эндогенный характер т.к. все представители входят в сосав нормальной микрофлоры тела человека (обитают в ЖКТ, ротовая полость).

Условия для возникновения инфекций:

· Нарушение целостности слизистых оболочек и такней, при этом микробы из мест естественного обитания переходят в ткани

· Нарушение кровоснабжения тканей → при синдроме сдавливания

· Раковая опухоль, прорастание ее → повреждение оболочек

· Диабет

· Имунодефицитные состояние

· Химиотерапия (цитостатики)

· Лечение гормонами

· Облучение

· Дизбактериоз

Клинические особенности.

1. Носит гнойновоспалительный характер и проявляется в виде абсцессов, инфильтратов

2. располагается вблизи мест естественного обитания возбудителей

3. Гнилостный характер поражение, омертвение тканей. Гнилостный запах экссудата → продукции большого количества летучих жирных кислот

4. Экссудат окрашен в черный, красный цвет

5. Газообразование

6. Тяжелое состояние больного, не видно очага инфекции

7. Инфекция должна лечится особыми антибиотиками (пенициллинами не лечится)

Лабораторная диагностика.

Бактериологический – очень трудный, дорогой, трудоемкий результат через 7-14 дней. Забор материала берут методом аспирации или пункцией соблюдая правило – материал не должен соприкасаться с кислородом воздуха. Питательные среды – сложного состава сывороточные, кровяные среды + факторы роста + витамины + адсорбенты. Культивируют в анаэростатах в присутствии повышенного содержания СО₂, при температуре 37. Выросшая колония пигментирована (черный, серый), флюорисцируют, морфологическая идентификация не информативна (палочки, полиморфные, спору не образуют), исключение Fusobacterium – веретено. Основной метод – культуральные ососбенности: B. fragilis культивируются в присутвиии 40% желчи, в средах с антибиотиками (канамицин) растут B. Fragilis, а B. urealyticus не растут в среде с ванкомицином. По отношению к углеводам B. Fragilis – сбраживают углеводы с образованием жирных кислот, B. Urealyticus не сбраживают углеводы. Антигенные свойства изучить с помощью диагностических сувороток невозможно – их нет.

Лечение.

Химиотерапевтические препараты относящиеся к груме метранидазола или препараты нитроимидазольного ряда, из антибиотиков клиндомицин. Улучшение микроциркуляции тканей, создание аэробных условий, оксигенация раны.

Профилактика.

Специфической нет.

тема: Коринобактерии, общая характеристика. Возбудитель дифтерии.

Род Corynobacterum, отдельного семейства нет, порядок: Actinomecitales. Внутри рода видов более 20. Виды имеющие наиболее медицинское значение: C. Diphteriae, pseudodiphteriae, haemiliticum, xerosis, pseudotubercullosis, ulcerens и т.д.

Общая характеристика.

Палочковидные, имеют утолщение на одном или обоих концах неподвижные, имеют микрокапсулу, в клеточной стенке имеют специфические липиды (кориномиколовая кислота), кислотонейстойчивые. Широко распространены в окружающей среде. Существуют виды которые обитают на теле человека, входят в состав нормальной микрофлоры (кожа, носоглотка), животных, растений.

Среди коринобакетрий есть патогенные – дифтерия, условнопатогенные – язвенное поражение (ulcerens), конъюнкивиты (xerosis), циститы, сапрофитические.

 

C. Diphteriae

Возбудитель дифтерии – острого инфекционного заболевания, которое проявляется глубокой интоксикацией организма, свзанной с дифтерийным токсином и фиброзным воспалением в месте нахожденийния возбудителя. Название болезни от греческого diphtera – пленка. Возбудитель открыт Клебсом в дифтерийнфх пленках. Леффлер в 1884 году вывел в чистой культуре (BL – бактерия леффлера). Ру в 1888 году обнаружил экзотоксин и предложил питательную среду для культивирования. Беринг в 1892 году получил антитоксическую сыворотку от больных и предложил для лечения (получил Нобелевскую премию). Рамон в 1923 году разработал метод получения дифтерийного анатоксина.

Вид	Биовары	Продукция токсина
C. Diphteriae	Gravis	+/-
	Mitis	+/-
	Intermtdius	+/-
	belfenti	-

Токсинообразование у возбудителя кодируется специфическим геном, который находится в составе плазмиды умеренного фага, а не в составе геном клетки → не является постоянным. Если культура лизогенная (в составе есть фаг) → токсигенная.

Морфологические особенности.

Палочки, Г+, располагаются под углом друг к другу, имеют зерна волютина по концам → для выяления зерен волютина красят по методу Нейсера (зерна черные, палочки желтые), простой метиленовой синькой (зерна красные, палочки синие).

Культуральные свойства.

Факультативные анаэробы. Среды – на простых не растет. Группы сред:

· Сывороточные: среда Ру, среда Леффлера – рост коринобактерий опережает все другие бактерии.

· Среды с теллуритом (элективная) – ингибирует рот других микробов – кровяно-теллуритовые среда Клауберга, шоколадный агар (агар + гемолизированные эритроциты) gravis дает R коллонии, mitis – дает гладкие среды

· Среди с добавлением цистиина – среда Тинсдаля

Микроорганизмы растут в присутствии пептонов (не целого белка), аминопептонов с обязательными добавками факторов роста (соли железа, цинка, витамины). 

Биохимические свойства.

Сахароза –

Мальтоза +

Глюкоза +

Крахмал +

Уреаза –

Цистиназа +

Сероводород +

Индол –

Факторы патогенности.

Продукция дифтерийного гистотоксина – оказывает ядовитое действие на многие типы тканей – специфически блокирует синтез белка в различных клетках особенно тех органов которые интенсивно снабжаются кровью (ССС, миокард, ПНС, ЦНС, почки, надпочечники) является истинным экзотоксин – имуногенный белок, термолябильны, высокотоксичный из гистотоксина можно получить анатоксин с помощью обработки 0,4% формалином при температе 40 в течении 4-х недель, теряет ядовитые действия, но сохраняет имуногенные свойства. Действие токсина обусловлено 2-мя фракциями А и Б. Фракция А – истинный токсин, способна проникать внутрь клетки и инактивировать фактор элонгации 2, который ответственен за удлинение полипептидной цепи на рибосомах, действует только внутри клетки → не может нейтрализоваться дифтерийной сывороткой → эффект действует на ранних стадиях (первые 3 дня). Фракция Б участвует в фиксации токсина на рецепторах клетки и выполняет трансмембранную фнкцию, сама токсином не является. На многослойном эпителии гистотоксин вызывает дифтеритическую (фибринозную) форму воспаления, которая проявляется в виде образования пленки из фибрина. Пленка плотно срастается с подлежащими тканями. На однослойном и циллиндричском эпителии вызывает крупозное воспаление.

Поверхносные структуры бактериальной клетки липидной и белковой природы – помагает прилипать к ткани и поэтому они называются факторами слияния.

Ферменты адгезии и инвазии – нейроамидаза, гиалуронидаза

Токсионообразование – гемотоксин, дермотоксин, некротоксин, нейротоксин.

Патогенез дифтерии.

Источник: больной человек, бактерионоситель токсигенных штаммов.

Пути передачи: воздушно-капельный, контактно-бытовой, сохраняется 15-20 суток, в аэрозольном виде до 6 месяцев, в воде в течении недели, пищевой, водный

Входные ворота: слизистые зева, носа, глаз, половых органов, раневая поверхность.

Инкубационный период: 2-10 дней (продукция токсинов → фибринозное воспаление у входных ворот → сужение дыхательный путей → одышка)

Клинические формы: дифтерия зева - локализованная, распространенная, токсическая (отек от шеи до ключиц). Дифтерия гортани (круп) – стеноз, асфиксия.

Осложнение: миокардиты, невриты, нефроз

Лабараторная диагностика.

Основной метод: бактериологический.

Материал: двумя стерильными тампонами из зева и носа

Первичный посев: среда Клауберга, сывороточные среды

Идентификация:

· По морфологии: форма, зерна волютина

· По б/х свойствам: глюкоза, сахароза, цистиназа, уреаза …

Определение токсигенности: реакция преципитации в агаре, геле с помощью антитоксической противодифтерийной сывороткой, ИФА, на клеточной культуре тканей, ПЦР (полимеразная цепная реакция)

Лечение и профилактика: см. календарь прививок, методичка

 

тема: Микобактерии. Общая характеристика. Возбудители туберкулеза, туберкулез, лабораторная диагностика, профилактика. Микобактерии лепры, лабораторная диагностика.

Классификация.

Порядок: Actinimicetalis

Семейство: Micobacteriacae, Actinomicetae, Streptomicetae

Род: Micobacterium

Вид: M. tuberculosis, M. bovis, M. africanus (возбудители туберкулеза человека), M, leprae (возбудители лепры у человека) (более 160).

Другие микобактерии: не туберкулезные микобактерии (НТМБ) – xenopi, ulcerens, micoti, folturitum, avium (вызывают микобактериозы – кожи, с/о, суставов, лимфотических узлов), smegmatis (сапрофит).

Экология.

Широко распространены в окружающей среде – почве, среде, растениях. Есть высокопатогенные, условнопатогенные, сапрофиты.

Особенности микобактерий.

Особый химический состав микобактерий: много липидов, жиров, воска, жирных кислот (миколовая, фтиоидная, туберкулиностеариновая).

Биосвойства микобактерий:

· Устойчивость к кислотам, щелочам, спиртам

· Трудно окрашиваются обычными красителями, красятся концентрированными красками с подогреванием

· Методы выявления – окраска по Циль-Нильсону

· Высокорезистентны в окружающей среде (в мокроте до нескольких недель)

· Особые патогенные свойства: нет адгезинов, истинных токсинов, ферментов патогенности. Сами компоненты клеточной стенки и цитоплазмы (миколовая, фтиоидная кислота, фракции липидов) оказывают токсическое действие на ткани и ткань образует специфическую гранулему. Главный фактор гликолипид или «корд-фактор», который является токсическим с помощью этого фактора микобактерии присоединяются к ткани и связывается с ней, защищаются от фагоцитоза, блокирует процессы окислительного фосфолирирования в митохондриях. КФ прежде всего поражает макрофаги т.к. в нем не переваривается. Микобактерии вызывают ответную реакцию иммунной системы в виде ГЗТ.

Классификация микобактерий по Району.

По патогенности:

· Патогенные

· Условно-патогенные

· Сапрофитические

По скорости роста:

· Быстрорастущие (колонии до 7 дня) – smegmatis и еще 17

· Медленнорастущие (через 2 и более недели до 6 месяцев) - M. tuberculosis, M. bovis, M. Africanus и еще 17

· Не растущие - M, leprae (культивируется только на броненосцах)

По способности к образованию пигментов:

· Фотохромогенные (на свету)

· Скотохромогенные (на свету и в темноте)

По способности к синтезу никотиновой кислоты:

· Положительные - M. tuberculosis

· Отрицательные - M. Bovis

Возбудители туберкулеза.

M. tuberculosis открыт Кохом в 1882 году. Носит название ВК – бактерия Коха.

Морфологические свойства.

Прямые или изогнутые палочки, M. Bovis – толстенькие короткие, M. Avium – длинные цепочкой. Напоминают мицелий гриба. Спор -, капсулы нет, жгутиков нет. Морфологически изменчив под действием лекарств – может переходить в кокковые формы. Кислото, щелоче – устойчивы. Хорошо красится флюорохромными красителями ауронином, родомином → можно обнаружить с помощью прямой флюоресценции.

Культуральные свойства.

Аэробы, факультативные анаэробы, размножаются медленно – скорость деления 14-18 часов → колонии мы увидим через несколько недель.

Питательные среды:

· глицериновые, картофельно-глицериновые

· яичные среды (Левейнштейна-Иенсена) + железо, фосфор, сера, факторы роста (биотин, никотиновая кислота, незаминимые аминокислоты)

· синтетические, полусинтетические

Характер роста: единичные колонии, морщинистые, пигментированные, крошатся, трещат при прокаливании

Резистентность: быстро вырабатывается ко многим препаратам благодаря R-плазмиде. Устойчивость есть первичная (у микобактерий выделенных от больных которые никогда не лечились), вторичная (формируется в процессе лечения и составляет).

Патогенез. Клиника.

Источник инфекции: больные БК⁺ - открытой формы (очаг поражения дренируется черед дыхательные пути и выделяется с мокротой, больные животные (коровы, козы, овцы)