Дифференцировка aureus от epidermiyis , saprophyticus

	aureus	epidermiyis	saprophyticus
Плазмокоагулаза	+	-	-
Гемотоксин (токсинообразование)	+	-	-
Ферментация манита в анаэробных условиях	+	-	+
Лецитиназа и другие факторы патогенности	+	-	-
Продукция пигментов	золотистый	бурый	белый
Патогенность (ДНК-аза, фибринолизин, гиалуронидаза)	+	-	-
Отношение к нововиоцину (а/б)	S	S	R

Основные заболевания вызывающиеся стафилококками:

Ø Поражение кожи и клетчатки: фурункулы, карбункулы, пиодермия, флегмона

Ø Поражение слизистых оболочек: синуситы, фронтиты, бронхиты, пневмонии, отиты, циститы, холециститы

Ø Пищевые токсикоинфекции: связаны со штаммами стафилококков продуцирующих энтеротоксин

Ø Остеомиелиты, менингиты

Ø Стафилококковые бактериемии, стафилококковый сепсис, эндокардиты

Ø Раневая инфекция, послеоперационная инфекция

Группы риска:

Ø Ослабленные больные

Ø Младенцы (пупочный сепсис, пиодермия, симптом ошпаренной кожи – эритема, пузырьковые высыпания)

Ø Новорожденные

Ø Синдром токсического шока у женщин (температура, головные боли, сыпь)

Принципы лабораторной диагностики:

Бактериоскопия – информативен когда материал в норме стерилен (ликвор, крови, костный мозг)

Бактериологический – материал (гной, мокрота, моча, кровь) посев жидкого материала на сахарный бульон, комбинированную среду 1:10, инкубация в термостате в течении 7-10 дней с пересевом и просматриванием замутилась ли среда. Не жидкий материал на твердые элективные (ЖСА, кровяной агар, солевой бульон, солевой агар), рост в течении суток, колонии типичные для стафилококков, пигментированные на ЖСА положительная лецитиназа, на кровяном агаре – гемолиз+, отсеивание этой колонии на простой, косой агар. Идентификация культуры с помощью морфологии, реакции плазмокоогуляции, форментации манита в анаэробных условиях, патогенности. Выделенную культуру подвергают фаготипированию (необходимо эпидемиологам для установления источника) и чувствительность к антибиотикам (к β-лактанным не чувствительны).

Фаготипы золотистого стафилококка включают 23 типа и разделен на 4 группы. Культуру засевают на агар газонным методом, чашку переворачиваем и делим по секторам и в сектора капают фаги, на каждый ряд по одному типу фагов. После инкубации наблюдается литическое действие фага на культуру.

Иммунитета перенесенное заболевание не оставляет.

Основные источники инфекции: бактерионосители постоянные или транзиторные. Наиболее опазыние с наличием 10 миллионов в 1 мл материала. Больные, медрицинский работник выступает в роли переносчика, инструментарии, постели, посуда, катетеры.

Способствуют распространению: нарушение сан. эпид режима в ЛПУ

Специфическая профилактика:

Ø Стафилококковый анатоксин – препараты полученные из экзотоксинов путем обезвреживания, лишены токсические свойства, но сохранившие антигенные свойства, служит для создания активного антитоксического иммунитета. Вводится беременным во время беременности, перед операцией, лицам страдающим фурункулезом.

Ø Стафилококковая гипериммунная плазма – плазма полученная от гиперимунизации донорской крови. Препарат лечебный.

Ø Стафилококковый бактериофаг – часто применяют местно, может применятся в комплексе с другими фагами (синегнойный, коли)

Ø Стафилококковая вакцина – чаще аутовакцина – из собственного штамма, имеет стимулирующее воздействие от конкретного больного.

 

Семейство Coccacii

Рода:

Ø Streptococcus

Ø Enterococcus: S. fecalis, fecium, durans

Ø Aeroccocus

Ø Leuconostoc, - этот и далее сапрофиты, портят вино, лекарство

Ø Pediococcus

Ø Lactococcus

Ø Gemtlla

 

Род Streptococcus.

Внутри рода выделяют более 20 видов, главные S. Pyogenus, pneumoniae, agalactiae  имеют значение для медицины. S. salivarius, mutans, mitins – участвуют в стоматологических поражениях (кариес, пародонтит, гингивит). Энтерококки обитают в толстом кишечнике, входят в нормальную флору, могут быть возбудителями ВБИ.

Стрептококки были обнаружены в 1874 году при рожистом воспалении Бильротом. В 1884 году выделены в чистой культуре.

Общие свойства: правильной сферической или вытянутой формы, особенность их расположение в цепочку (длинную) неподвижные, спор не продуцируют, некоторые виды продуцируют постоянно капсулу, факультативные анаэробы, грамм +, каталаза -, растут на средах с глюкозой (сахарный бульон, сахарный агар), но лучше на кровяном агаре.

По характеру роста сделана классификация в 1903 году Штотмюлером:

Ø α-гемолитический – зеленящие, неполный гемолиз, разрушение эритроцитов до образования метгемоглобина

Ø β-гемолитический – дают полный гемолиз, зона вокур прозрачная

Ø γ-гемолитический – негемолитические, визуально гемолиза нет

Основными возбудителями болезней человека являются β-гемолитические, α и γ условно-патогенные, входят в нормальную микрофлору.

Современная классификация по Ленсфид-Грифитсу, построена на основании антигенной структуры стрептококков. Разделены на 17 групп по поверхностному полисахаридному антигену клеточной стенки. Определятся антиген в реакции преципитации и группы называются по буквам А-V. Грифитс внутри группы по белковому антигену который определяется в реакции агглютинации все стрептококки разделил на серологические типы. В настоящее время только в группе А около ста. Группа А: S. Pyogenus, группа В: S. agalactiae; pneumoniae- не входит не в одну из групп. Идентификация идет по сывороткам групповым, типовым это в хороших лабораториях, в просто лабораториях идентифицируют А и D.

Патогенные факторы у стрептококков.

S. Pyogenus (группа А)

Ø Фимбриллярный белок (антифагоцитарное действие, маскирует рецепторы комплемента, может связывать иммуноглобулины, суперантиген).

Ø Капсульное вещество – антифагоцитарное действие, содержит гиалуроновую кислоту, запускает аутоиммунные процессы

Ø Белки ферменты: С_3аС_5а-пептидаза – приводит к разрушению комплемента → воспалительный процесс развивается слабо.

Ø Продукция экзотоксинов – гемотоксин (стрептолизин О – гемолиз эритроцитов, антиген; стрептолизин S – гемолиз на поверхности кровяного агара, без участия кислорода, не является антигеном, на него не вырабатываются антитела, участвует в нарушении проницаемости мембран, ведущий фактор ревматизма), пирогенные (пирогенная реакция – действуют на гипоталамус), эритрогенные (эритемы при скардатине, сыпи, рожа лица) – вызывают активацию Т-лимфоцитов и продукцию большого числа цитокинов (интерлейкин 1, факторнекроза опухоли) вызывают явление токчического шока. Кардиогепатический токсин.

 

Энтеробактерии.

Энтеробактерии.

Семейство: Enterobacteriacae, родов более 30, наиболее значимые: Escherichia, salmonella, shigella, klebsiela, proteus, lersinia – представители этих родов вызывают самостоятельные заболевания (сальмонеллез, шигелез, клебсиелез, мнее значимые рода вызывают как кишечную инфекцию, так и вне кишечную инфекцию. Медицинское значение энтеробактерий:

· Возбудители общих кишечных заболеваний (диарейного синдрома)

· Возбудители внекишечных заболеваний (гнойно-воспалительные, бактериэмии, менингиты, поражение урогенитального тракте, осложнения послеродовые)

· Показатели фекального загрязнения (санитарно-показательные микроорганизмы), показатель коли-титра – минимальный объем вещества в котором содержится определенное количество бактерии семейства энтеробактерии.

Количества видов огромно, только в роде сальмонелла более 2500.

           Общие свойства семейства:

· Все палочки

· Неспорообразующие

· Средних размеров

· Г-

· В мазке находятся хаотично

· Факультативные анаэробы

· Легко культивируются на простых питательных средах

· Капсулу не имеют

· Оксидаза -

· Ферментация глюкозу «+»

· Переводят нитраты в нитриты

· Место обитания – кишечник человека, животного, птиц, насекомых, земноводных

· Выделяются в фекалиями

· В организм попадают через рот водным путем, пищей или контактно-бытовым путем.

Дифференциация родов внутри семейства проводится по набору биохимических тестов и антигенным свойствам и другое:

	Escherichia	Salmonella	Shigella
Лактоза	+	-	-
Глюкоза	+	+	+
Газ	+	-/+	-/-
Н2S	-	+	-
Индол	+	-	-/+
Подвижность	+	+/-	-

Вообще эта галерея может включать до 30-40 тестов. Изучается с помощью индикаторных бумажек или диагностических тест систем. Антигенные свойства изучаются с помощью антигенных сывороток.

           Наиболее важными тестами является: определение подвижности, капсулообразование, тест на сероводород, глюкозу, индол, образование газа, усвоение цитрата натрия, малоната натрия, отношение к мочевине, наличие реакции метилрот, лизина, орнитина, декарбоксилазная активность, разжижение желатины.

 

Род Escherichia

           Внутри рода эшерихия 7 видов: Coli, helmani, pulntris, fergusoni, blatae. Общие свойства: такие же как у всех энетробактерий, дополнительно:

• подвижность +,
• лактоза +,
• глюкоза +
• индол +,
• газ +
• сероводород –
• реакция метилрот +
• цитрат натрия –
• Ф/П –

Питательные среды для изучения, выделении и дифференциации: среды с лактозой, глюкозой, полиуглеводные с добавлением соли – среда Эндо, Клиглера (агар, лактоза, глюкоза, железо лимоннокислое, тиосульфат натрия, индикатор – феноловый красный в кислой среде желтый), Альгиницкого.

На этих средах изучают лактозный признак, отношение к глюкозе, тест на сероводород, выделение газа. На среде Эндо эшерихии растут разным цветом (синим, красным). На среде Клиглера – желтеет (лактоза +), и железо не дает черный цвет у основания (сероводород -).

Антигенные свойства разнообразны: внутри вида различают более 170 О-антигены, они являются групповыми, Н-антиген типоспецифический его вариантов 57, К-антигенов около 90. поэтому внутри вида E. Coli можно выделить большое количество сероваров. При лабораторной диагностике надо не только опрелить не только вид но и серовар. Установление Н-антигена проводится в реакции аглютинации, О-антиген с живими культурами.

Факторы патогенности:

· Фактор адгезии и колонизации: фимбрии, ворсинки, белок наружной мембраны интимин. За счет этих факторов происходит прикрепление к клеткам и их колонизация. Эти факторы кодируются плазмидными генами. Изучают эти факторы с помощью способности адгезироваться на клеточных культурах ткани.

· Факторы инвазии: с момощью них проникают внутрь клетки, размножаются и вызываю гибель. Эти факторы белки наружной мембраны, кодируются плазмидными генами.

· Продукция экзотоксинов: энтеротоксин – обеспечивает избирательное действие на слизистую кишечника, стимулируют гиперсекрецию клетками жидкости, выход солей, с этим связано нарушение водно-солевого баланса. Другие токсины способны разрушить клетки эндотелия, капилляров и клетки слизистой кишечника, вызывают сыпь, диарею. Кодируется генами умеренного фага.

· Продукция эндотоксинов: по химической природе липополисахарид клеточной стенки. Вызывает эндотоксический шок, оказывает действие при разрушении клетки Coli антибиотиками, макрофагами. С этими токсинами связывают повышение температуры.

Многие факторы патогенности кодируется плазмидами – Col-плазмида, F – плазмида, R-плазмидами. E. Coli входят в состав нормальной микрофлоры, но в них может проникнуть плазмида и они становятся возбудителями.

В зависимости от превалирования какого-то конкретного фактора E. Coli может быть:

Энтеротоксигенные (ЕТЕС) – главный фактор патогенности продукция токиснов, включают серогруппы О₆, О₈… заболевание сопровождается нарушением водно-солевого обмена и вызывают холероподобные заболевания, локализация тонкий кишечник, болеют дети и взрослые.

Энтероинвазивные (Е I ЕС) О_{124, 44}. локализуется в толстом кишечнике, передается пищевым путем, напоминает дизентерию, болеют дети и взрослые

Энтеропатогенные (адгезии) (ЕРЕС) О_{55, 111} поражает только детей первого года жизни. Адгезируются на ворсинках и нарушают функцию всасывания. Локализуются в толстом кишечнике, путь заражения пищевой, молочные смеси.

Энтерогемморагические (EHEC) О_{157, 145}. Вызывают эшерихиозы с гемолитическим синдромом из за токсина действующего на кишечник и эпителий почечных клубочков. Источник заражения КРС, МРС, путь заражения пищевой. Вспышки связаны с употреблением фарша, молочных продуктов, болеют дети и взрослые. Характерно тяжелое течение.

Лабораторная диагностика: бактериологический – посев материала (фекалии, толстый и тонкий кишечник) с целью выделения чистой культуры на среду Эндо → изучение лактоза+ колоний (красный) на второй день, она аглютинируется с поливалентными сыворотками (О_{111, 155}) → колония дающая положительную реакцию на стекле отвивается на среду Клиглера и биохимическую галерею для родовой идентификации → изучают морфологию, биохимию до рода, вида, серовара.

Иммунитет после перенесенного заболевания ненапряженный, видо специфичен имеет значение местный иммунитет, плазматические клетки кишечника продуцируют IgA, которые содержатся в слизи. Защитное значение имеет флора и биоценоз кишечника.

Лечение: антибиотики, препараты из микробов антагонистов

Профилактика: специфическая неразработана

Внекишечные эшерихиозы.

           Не через рот, фекально-оральный механизм не работает. Пути операционные раны, травмы, бактериэмия попадают бактерии через инструменты, грязные руки, предметы обихода. Могут носить госпитальный характер. Клинически проявляются разнообразно в зависимости от локализации (гнойные воспаления, гемморагический синдром). Диагностика: см. выше. Автогенные серовары О1, О2, О4, О75 (уропатагенные) О1, О2, О18, О25 (бактериэмия) О6, О7 (менингиты). Распространение вызвано нарушением санитарно-гигиенического режима.

 

Род Salmonella.

           Открыт в 1885 году Сальмоном возбудитель – сальмонеллеза. В 1880 Эбер открыл возбудителя брюшного тифа. 1885 Шотмюллер – паратифа.

           В роду сальмонелл выделяется более 2500 сероваров. Современная классификация сальмонелл:

• S. Enterica 6 подвидов, поражают человека и теплокровных
• S. Bongori поражают холоднокровных

Внутри каждого подвида отделяют О-подгруппы (50 групп), которые обозначены латинскими буквами и цифрами. Типоспецифический Н-антиген, по нему устанавливают серовар (1367). Серовары называются: энтеритидис, сурис, инфантика. Названия могут быть географические, по клиническим проявлениям. Современная классификация предложена Кауфманом-Уайтом.

Вид	Серогруппа	серотип	«О»-антиген (групповой)	«Н»-антиген (типовой)
S. enterica	А	S. paratyphi A	O2
	B	S. parathyphi B S. typhimurium S. heideberg S. derby	O4
	C	S. parathyphi C S. cholerae suis	O6
	D	S. typhi S. anteridis	O9

Медицинское значение сальмонелл.

S. paratyphi A, В, С – возбудители брюшного тифа и паратифов. S. typhi – исключительно патогенна только для человека, А, В, С – патогенная и для человека и для животных. Остальные сальмонеллы вызывают заболевания домашних животных, птицы, грызунов, кошек. Свои названия сальмонеллы получают либо географически, либо по симптомам, а также от животных у которых встречается (S. Typhimurium – мышиный тиф). Все другие сальмонеллы выступают как возбудители токсикоинфекций или госпитальных сальмонеллезов. Сальмонеллы высоко патогенны для животных и представляют большую ветеринарную проблему.

Общая характеристика сальмонелл.

Палочки, Г -, мелкие, подвижные, спор не продуцируют, капсулы не имеют. Метаболизм в большей степени бродильный, ферментирует в анаэробных условиях углеводы. Растут при температуре +8 - +40 градусов, оптимальная температура +5. Растут на простых питательных средах, для их дифференцировки используют среды с углеводами: Эндо, Клиглера, Алькиницкого, элективные среды ЖБ, Раппопрт, висмут сульфид агар (колонии черного цвета в следствии продукции Н₂S).

В биохимическом отношении высоко активны, биохимическая галерея используется для родовой идентификации и подвидовой идентифткации.

Для рода:

• Глюкоза +
• Газ -/+
• Лактоза –
• Цитрат симонсона +
• Индол –
• Уреаза –
• Сероводород +
• Лизиндекарбоксилазная активность +
• Подвижность +

Факторы патогенности связаны с островками патогенности (SPI) – генами в хромосомах и плазмидными генами.

SPI 1 – факторы инвазии контролируют проникновение сальмонелл в эпителиальную клетку, апоптоз

SPI 2 - контролируют выживание сальмонелл внутри макрофагов, в связи с белками клеточной стенки.

SPI 3 – обеспечивают продукцию эндотоксинов, цитотоксинов

Плазмидные гены: устойчивость сальмонелл к бактерицидному свойству крови.

В общем есть факторы адгезии, колонизации – пили (на пейеровых бляшках, эпителии кишечника), факторы инвазии – обеспечивают внутриклеточный паразитизм, факторы продукции токсинов, факторы устойчивости.

Экология сальмонелл.

           Естественный резервуар организм животных, птиц. Человек только для S. typhi, S. parathyphi B. В окружающую среду попадают с калом, мочой и длительно сохраняются в окружающей среде.

В водоемах как во люду, так и в обычной воде около 4-6 месяцев, в морской воде до 1 месяца, в почве 9 месяцев, пыль в комнатах до 1,5 лет, в пищеых продуктах до 4 месяцев, в замороженном мясе более 1 года, в яйцах, яичном порошке 13 месяцев, на обощах до 2 месяцев, на бумаге до 1 года.

Сальмонеллами поражены до 20% домашних животных, гуси и утки 50%, кошки 10%, грызуны 40%.

Сальмонеллы чувствительны к высокой температуре, кипячению, дезинфектантам.

Эта устойчивость делает среду обитания накопителем. Основной путь передачи – пищевой (продукты животного происхождения). Затем водный (питьевая вода, хозяйственная вода. И контактно-бытовой. Госпитальные сальмонеллезы могут передаваться воздушно-капельным путем и медицинские инструменты.