Исходы взаимодействия вирусов с клеткой хозяина

1. Продуктивный процесс -репликация (продукция) вирусов. Приводит к гибели (лизису) клеток. Цитопатический эффект является результатом интенсивного размножения и формирования большого количества вирусных частиц (характерный результат продуктивного процесса), вызванного вирусами с высокой цитопатогенностью. Цитопатический эффект действия на клеточные культуры для многих вирусов носит узнаваемый специфический характер;

2. Интегративный процесс -интеграция вирусного генома с геномом клетки хозяина (вирогения). Это особый вариант продуктивного процесса по типу стабильного взаимодействия. Вирус реплицируется вместе с геномом клетки хозяина и может длительно находиться в латентном состоянии. Встраиваться в ДНК - геном хозяина могут только ДНК- вирусы (принцип “ДНК - в ДНК”). Единственные РНК - вирусы, способные интегрироваться в геном клетки хозяина - ретровирусы, имеют для этого специальный механизм. Синтез ДНК провируса на основе геномной РНК с помощью фермента обратной транскриптазы (ревертазы) с последующим встраиванием ДНК в геном хозяина.

3. Абортивный процесс -клетки освобождаются от вируса, не вызывая появление дочерней популяции. При инфицировании дефектным вирусом, для репликации которого нужен вирус- помощник, самостоятельная репликация этих вирусов невозможна. Например, вирус дельта (D) гепатита может реплицироваться только при наличии вируса гепатита B, его HВs – антигена. При инфицировании вирусом генетически нечувствительных к нему клеток или при заражении чувствительных клеток вирусом в неблагоприятных условиях.

Вирусологический метод. Культивирование вирусов

Лабораторные методы диагностики вирусных инфекций включают вирусоскопию, выделение и идентификацию возбудителя (вирусологический метод), обнаружение и определение титра противовирусных антител (серологический метод), обнаружение антигенов вируса в исследуемом материале (РИФ, РНИФ, ИФА), обнаружение генетического материала вирусов (ПЦР) (табл. 35).

Таблица 35. Методы диагностики вирусных инфекций

1. Вирусоскопический метод
а) световая микроскопия	применяется для обнаружения крупных вирусов (оспы) в окраске по Морозову и внутриклеточных вирусных включений в окраске по Туревичу и Муромцеву
б) электронная микроскопия	дает возможность изучить ультраструктуру вириона
е) метод иммунной элек­тронной микроскопии в основе этого метода лежит взаимодействие антител с вирусами при смешивании вируссодержащего материала со специфической сыворот­кой	в результате реакции образуется микропре­ципитаты, состоящие из вирусных частиц, покрытых своеобраз­ным «венчиком»
г) иммунофлюоресцентный метод (прямой и не­прямой) с использованием флюоресцирующих сывороток	при положительной реакции в люминес­центном микроскопе наблюдается специ­фическое свечение. Применяется для экспресс-диагностики.
2. Вирусологический метод Этот метод основан на культивировании виру­сов с использованием культур клеток или куриных эмбрионов и их последующей индикации и идентификации.
Индикацию вирусов осуществляют 1. по характеру специфичес­ких поражений оболочек и тела эмбриона 2. по феномену гемагглютинации 3. по цитопатическому действию вируса (ЦПД) 4. по образованию в клет­ках включений 5. по образованию бляшек 6. по феномену гемадсорбции 7. по «цветной» реакции	Для сероидентификации вирусовиспользуют материал от больного (смыв из носоглотки), аллантоисную или амниотическую жидкость заражённого кури­ного эмбриона, культуру клеток и ставят реакции: а) торможения (задержки) гемагглютинации (РТГА) б) торможения (задержки) гемадсорбции (РТГАд) в) связывания комплемен­та (РСК) г) нейтрализации (РН) д) ИФА Для генетической идентификации – ПЦР, МГ
3. Серологический метод
Применяется для обнаруже­ния в сыворотке крова боль­ного специфических проти­вовирусных антител в реакциях (РТГА, РСК, ИФА и др)	определяют титр антител в парных сыворотках в этих реакциях используются антиге­ны вирусов (диагностикумы)
4. Биологический метод
Основан на использовании чувствительных лабораторных животных	применяют для культивирования, индикации и идентификации вирусов, изучение клинических симптомов и патоморфологических изменений

Вирусологический метод направлен на выделение и идентификацию вируса и является «золотым стандартом» в диагностике вирусных инфекций. Вирусы являются облигатными внутриклеточными паразитами, в связи с этим, вирусологический метод имеет ряд принципиальных особенностей. Схема вирусологического метода включает ряд последовательных этапов: 1) забор, транспорт и подготовка исследуемого материала, 2) культивирование, 3) индикация и 4) идентификация вирусов (табл. 36).

При заборе материала для исследований необходимо отбирать образцы с учетом локализации первичной репликации и ритма циркуляции возбудителя. Образцы следует доставлять в лабораторию незамедлительно, при относительно кратковременной транспортировке (не более 5 суток) образцы сохраняют на льду, при более длительной – при tºC -50ºC.

Таблица 36. Схема вирусологического метода