Лабораторная диагностика кампилобактериоза

Для диагностики кампилобактериозов используют микроскопический, бактериологический и серологический методы. Микроскопический метод используется в качестве ориентировочного.

Основной метод диагностики - бактериологический. Материал для посева - испражнения или содержимое прямой кишки, иногда кровь, а также вода, молоко, другие пищевые продукты, смывы с предметов и т. д. Посевы делают на специальные питательные среды, создают микроаэрофильные условия и инкубируют при температуре 37 и 42 °С. После получения типичных колоний культуру идентифицируют по совокупности признаков.

Серологический метод исследования - Реакция агглютинации

 

Возбудитель орнитоза. Характеристика. Диагностика.

Орнитоз, возбудителем которого являет­ся С. psittaci, — зооантропонозная инфекция.

Морфология. Возбудитель имеет овоидную или округлую форму.Встречаются более крупные частицы возбудителя, имеющие неравномерную плотность и состоящие из рассеянных зерен. По методу Романовского—Гимзы они окрашиваются в фиолетовый цвет.

Культуральные свойства. Возбудитель хорошо размножается в культурах тканей, на 7-дневных эмбрионах и в организме белых мышей. В культуре ткани микроорганизм не проявляет специфического цитопатического действия. После 3—4 сут культивирования его обнаруживают по цитоплазматическим тельцам.

Устойчивость. На скорлупе яиц в инкубаторе возбудитель выживает не более 3 дней, в кале птиц сохраняется до 3—4 мес. Возбудитель термолабилен.

Патогенность. В естественных условиях возбудитель вызывает заболевание у голубей, кур, уток, гусей, индеек, фазанов, канареек, попугаев и других птиц. При экспериментальном заражении к возбудителю оказались чувствительными обезьяны, морские свинки, белые мыши и крысы.

С. psittaci - возбудитель орнитоза — острого инфекционного заболевания, которое характеризуется пора­жением легких, нервной системы и паренхиматозных органов (печени, селе­зенки) и интоксикацией.

Зооантропоноз. Источники инфекции – птицы. путь передачи – воздушно- капельный. Возбудитель – через слиз. оболочки дыхат. путей, в эпителий бронхов, альвеол, размножается, воспаление.

Диагностика:Материа­л для исследования - кровь, мокрота больного, сыворотка крови для серологического исследования.
Применяют биологический метод — куль­тивирование хламидий в желточном мешке куриного эмбриона, в культуре клеток. Серологический метод. Применяют РСК, РПГА, ИФА, ис­пользуя парные сыворотки крови больного. Внутрикожная аллергическая проба с орнитином.

Лечение: антибиотики (тетрациклины, макролиды).

 

 

Легионеллез.

Возбудитель инфекции – подвижные грамотрицательные анаэробы рода Legionella.. Бактерии выделяют эндотоксин, а также сильнодействующий экзотоксин. Легионеллы устойчивы в окружающей среде Резервуаром и источником инфекции являются пресноводные водоемы (преимущественно со стоящей водой) и почва. Легионеллы активно размножаются в простейших (к примеру, а при температуре 35-40 °С, защищаясь от воздействия химических дезинфицирующих средств, хлора. Патогенность легионелл обусловлена продукцией двух токсинов (цитотоксин и токсин, летальный для лабораторных мышей), а также наличием ряда белков, липополисахарида и ферментов Легионеллез распространяется по аэрозольному механизму, заражение происходит при вдыхании воздушно-водяной взвеси, содержащей бактерии.

Диагностика. В настоящее время используют три основные группы методов лабораторной диагностики:1. Серологические методы.2. Бактериологические методы.3. Экспресс-методы обнаружения возбудителя и его антигенов.

Серологические методы получили наибольшее распространение для диагностики легионеллеза в связи с простотой их выполнения и доступностью практических лабораторий. Нарастание диагностических титров к возбудителю легионеллеза в любых двух из трех рекомендуемых серологических реакций с высокой степенью надежности подтверждает диагноз. К недостаткам метода относится ретроспективный характер диагностики в связи с необходимостью отбора 2-й сыворотки на 2 - 3-ю неделю заболевания.Бактериологические методы являются главными для окончательного ответа о наличии вспышки легионеллезной инфекции. Однако применение их на практике требует специальной подготовки персонала. Выделение культуры отдельно или из внешней среды и ее предварительная идентификация занимают не менее 2 - 3 недель.Из высокочувствительных и специфичных методов экспресс-диагностики наибольшее распространение получила прямая иммунофлюоресценция. Однако спектр исследуемого материала тот же, что и при выделении культуры, редко позволяет поставить диагноз в первые дни заболевания. Иммуноферментный метод дает возможность обнаружить легионеллезный антиген в моче больных уже на 3 - 5-й день болезни.Внедрение в практику работы клинических учреждений экспресс-методов позволит значительно ускорить постановку диагноза и своевременно начать этиотропную терапию.

 

Возбудитель буцеллеза

Возбудитель бруцеллеза — бактерии из рода Brucella. Различают два типа бруцелл: Br. Melitensis, Br. bovis.

Морфология. Бруцеллы представляют собой очень мелкие, коккоподобные палочки, неподвижные, спор и капсул не образуют, по Граму красятся отрицательно. При микроскопии мазки-отпечатки из пораженных органов окрашивают по методу Козловского. Бруцеллы приобретают красный цвет, другие бактерии — зеленый.

Культуральные свойства. Бруцеллы хорошо культивируются в аэробных и факультативно-анаэробных условиях на МПА, мясопептонном печеночном бульоне Ферментативные свойства. Бруцеллы биохимически мало активны, не разжижают желатина, не свертывают молока, не вырабатывают индола.

Устойчивость. Возбудитель бруцеллеза сохраняется на холоде в течение нескольких месяцев.Бруцеллы весьма чувствительны к нагреванию.

Диагностика. В лабораториях мясокомбинатов бактериологическое исследование патологического материала на выявление бруцелл не проводят.

Профилактика и лечение. Профилактика бруцеллеза включает комплекс ветеринарных, хозяйственных и санитарно-медицинских мероприятий. Для специфической профилактики используют живую вакцину, приготовленную из авирулентного штамма 19 ВА Br. abortus. Иммунитет после вакцинации сохраняется 1—2 года. Прививки проводят среди работников животноводческих хозяйств и предприятий, перерабатывающих сырье и продукты животноводства, при работе, связанной с возможностью заражения Br. melitensis.

Для лечения применяют сульфаниламидные препараты, стрептомицин, левомицетин и другие антибиотики, вакцино- и физиотерапию.

 

Возбудители трипаносомозов.

Возбудителями трипаносомозов являются трипаносомы (класс жгутиковые). Африканские трипаносомозы вызывают Tripanosoma bruceigambiensi. Американский трипаносомоз (болезнь Чагаса) вызывает Tripanosoma cruzi.

1. Паразит имеет изогнутое тело, сплющенное в одной плоскости, заостренное с обеих сторон. Размеры – 15–40 мкм. Стадии, обитающие в организме человека, имеют 1 жгутик, ундулирующую мембрану и кине-топласт, расположенный у основания жгутика.Обитает в плазме крови, лимфе, лимфатических узлах, спинномозговой жидкости, веществе головного и спинного мозга, серозных жидкостях.Заболевание повсеместно распространено по территории всей Африки.

Трансмиссивное заболевание с природной очаговостью. Возбудитель трипаносомоза развивается со сменой хозяев. Первая часть жизненного цикла проходит в организме переносчика. Африканский трипаносомоз переносится мухами цеце Glossina palpalis. Вторая часть жизненного цикла протекает в организме окончательного хозяина, в качестве которого могут выступать крупный и мелкий рогатый скот, человек, свиньи, собаки

При укусе мухой цеце человека трипаносомы попадают в ее желудок, где размножаются и проходят несколько стадий. Полный цикл развития занимает 20 дней.

Африканский трипаносомоз без лечения может протекать долго (до нескольких лет). У больных наблюдаются прогрессирующая мышечная слабость, истощение, сонливость, депрессия, умственная заторможенность. Возможно самоизлечение, но чаще всего без лечения болезнь заканчивается летально. Трипаносомоз, вызываемый T. b. Rhodesiense, протекает более злокачественно и заканчивается летальным исходом через 6–7 месяцев после заражения.

Диагностика. Диагноз устанавливается на основе эпидемиологических, анамнестических, клинических и лабораторных данных. Решающим в диагностике является обнаружение трипаносом в пунктатах лимфатических узлов, цереброспинальной жидкости, костного мозга, а также в периферической крови в лихорадочный период болезни. Используются иммунологические методы диагностики, из которых наиболее чувствительна реакция связывания комплемента.

1. Tripanosoma cruzi – возбудитель американского трипаносомоза (болезни Чагаса). Для возбудителя характерна способность к внутри-клеточному обитанию. Размножаются только в клетках миокарда, нейроглии и мышц (в виде безжгутиковых форм), но не в крови.

Переносчики – триатомовые клопы. В их теле три-паносомы размножаются. После укуса клопы испражняются, возбудитель в стадии инвазионности попадают с фекалиями в ранку. При этой болезни характерны миокардиты, кровоизлияния в мозговые оболочки, их воспаление.

Диагностика. Диагноз устанавливается на основании различных данных и подтверждается выделением трипаносомы из крови, спинно-мозговой жидкости, пунктатов лимфатических узлов, селезенки, костного мозга и других органов. Проводят биологическую пробу на морских свинках. Применяются серологические реакции чаще всего РСК. Используется внутрикожная аллергическая проба, а также некоторые другие реакции.

Возбудитель амебиаза

 

Амебиаз — инфекционная болезнь, вызываемая Entamoeba histolytica, сопровождающаяся язвенным поражением толстой кишки; возможно образование абсцессов в различных органах; протекает хронически.

 

Морфология и культивирование. Возбудитель существует в двух стадиях развития: вегетативной и цистной. Вегетативная стадия имеет несколько форм (тканевая, большая вегетативная, просвет-ная и предцистная). Циста имеет овальную форму и диаметр 9—14 мкм; образуется из вегетативных форм в кишечнике. Инфицирование происходит при попадании цист воз­будителя в кишечник, где из них образуются кишечные вегета­тивные формы.

 

Резистентность. Вне организма быстро (через 30 мин) поги­бают тканевая и просветная формы возбудителя. Цисты устой­чивы в окружающей среде, сохраняясь в фекалиях и воде при температуре 20 °С в течение месяца. В продуктах питания, на овощах и фруктах цисты сохраняются в течение нескольких дней.

 

Эпидемиология. Амебиаз — антропонозное заболевание. Источ­ником инвазии является человек. Механизм передачи — фекал но-оральный. Заражение происходит при занесении цист с про­дуктами питания, особенно овощами и фруктами, реже — с водой, через предметы домашнего обихода. Распространению цист способствуют мухи и тараканы.

 

Патогенез и клиническая картина. Цисты, попавшие в кишеч­ник, и образовавшиеся просветныо формы амеб могут обитать в нем, не вызывая заболевания. При снижении резистентности организма амебы внедряются в стенку кишечника и размножа­ются. Развивается кишечный амебиаз. Этому процессу способству­ют некоторые представители микрофлоры кишечника. Поража­ются с образованием язв верхний отдел толстой кишки, иног­да — прямая кишка. Отмечается частый жидкий стул. В испраж­нениях обнаруживают гнойные элементы и слизь. Может проис­ходить перфорация кишечной стенки с развитием гнойного пе­ритонита. Амебы с током крови могут попадать в печень, лег­кие, головной мозг — развивается внекишечный амебиаз. Воз­можно появление кожного амебиаза, развивающегося как резуль­тат вторичного процесса. На коже перианальной области, про­межности и ягодиц образуются эрозии и малоболезненные язвы.

 

Иммунитет. При амебиазе иммунитет нестойкий.

 

Микробиологическая диагностика. Основным методом являет­ся микроскопическое исследование испражнений больного, со­держимого абсцессов внутренних органов. Мазки окрашивают ра­створом Люголя и гематоксилином. Серологические исследова­ния (РНГА, РСК и др.) при амебиазе бывают часто положи­тельными.

 

 

Возбудитель трихомониаза.

Трихомоноз — одно из наиболее распространённых заболеваний мочеполового тракта,специфический воспалительный процесс в урогенитальном тракте.

Возбудитель мочеполового трихомоноза — одноклеточное простейшее влагалищная трихомонада (Trichomonas vaginalis).

Трихомонады — эукариоты класса жгутиконосцев.Различают три формы Trichomonas vaginalis: грушевидную, амёбовидную, почкующуюся. Трихомонады быстро теряют жизнеспособность в окружающей среде; размножаются путем деления; подвижные; оптимальная среда обитания — кислая. В организме человека паразитируют 3 вида трихомонад: кишечная; ротовая и урогенитальная (влагалищная).

В естественных условиях урогенитальные трихомонады обитают только в мочеполовом тракте человека и не поражают животных. Форма клетки трихомонады вариабельна: чаще грушевидная, реже овальная или веретенообразная. Длина тела влагалищной трихомонады находится в пределах от 5 до 30 мкм. Характерно наличие цитоплазмы, ядра и жгутиков — органоидов движения. Трихомонады — факультативные анаэробы, оптимальная для роста температура — 37 °С. Культивируются на питательных средах в присутствии других микроорганизмов. Вне человеческого организма трихомонады быстро теряют жизнеспособность. Мочеиспускательный канал может поражаться как у мужчин, так и у женщин.

При остром трихомонозе имеются все признаки воспаления. Процесс течёт достаточно бурно: ухудшается общее состояние, сон, появляются обильные выделения из влагалища с неприятным запахом, сильный зуд наружных половых органов, может быть учащённое и болезненное мочеиспускание, иногда возникают боли внизу живота. Инкубационный период трихомоноза в среднем равен 5–15 дням. При осмотре в зеркалах обнаруживают воспалительные изменения слизистой влагалища, особенно шейки матки и влагалищных сводов

Диагностика. Диагноз трихомоноза устанавливают на основании клинической картины и после обнаружения трихомонад в исследуемом материале. Для лабораторной диагностики трихомоноза у женщин мазки на исследование берут из влагалища, уретры и прямой кишки.

Диагностика трихомоноза:

1. Микроскопия нативного мазка (окраска по Романов-скому—Гимзе).
2. Исследование нативных препаратов методом фазово-контрастной микроскопии.
3. Культуральная диагностика.
4. Иммуноферментный анализ (ИФА).
5. Реакция иммунофлюоресценции (РИФ).
6. Полимеразная цепная реакция (ПЦР).

100. Патогенные грибы.

ГРИБЫ ПАТОГЕННЫЕ — возбудители поверхностных и глубоких микозов животных и человека.

В царстве эукариот грибы выделены в отдельный таксон – Mycota, который подразделяется на два отдела – грибы-слизевики Myxomycota и настоящие грибы Eumycota.

Отдел Eumycota подразделяется на 7 классов, согласно присущим им анаморфным (бесполым) и телеоморфным (половым) стадиям развития:

1. Chytridiomycetes

2. Hyphochytridiomycetes

3. Oomycetes

4. Zygomycetes

5. Ascomycetes

6. Basidiomycetes

7. Deuteromycetes.

Первые четыре класса составляют группу низших грибов, остальные три класса относятся к высшим грибам.Большинство патогенных грибов имеют септированные гифы и размножаются вегетативно, а также бесполым путем с помощью конидий (экзоспор).

Основные свойства

Грибы чаще размножаются с помощью спор. В благоприятных условиях спора прорастает, образуя ростковую трубку, которая удлиняется и превращается в гифу. У высших грибов в гифе возникают септы, низшие грибы септ не имеют. Продолжая расти и развиваться, гифы переплетаются и образуют мицелий.
Грибы выращивают на питательных средах Сабуро, Чапека-Докса, жидком сусле или сусло-агаре на которых они, после длительного (несколько дней) культивирования, образуют разнообразные колонии.
Клеточная стенка грибов представлена микрофибриллярным матриксом углеводной природы.Грибы образуют различные ферменты, некоторые из них, в частности гидролазы, являются факторами патогенности.
Все грибы чрезвычайно устойчивы к химическим и физическим воздействиям.