Омская геморрагическая лихорадка

Омская геморрагическая лихорадка (ОГЛ) — вирусное заболе­вание с природной очаговостью, лихорадкой, геморрагическим синдромом, скоропроходящим поражением почек, ЦНС и лег­ких.

Заболевание вызывает арбовирус из рода Flavivirus (группа В) семейства Togaviridae. Возбудитель относится к мелким вирусам (размер 35-40 нм), содержит РНК, при температуре 4 °С инакти­вируется через 29 дней, а при 56 °С — через 25 мин. В лиофшти- зированном состоянии может сохраняться до 4 лет.

Вирус ОГЛ высокопатогенен для ондатр, белых мышей, водя­ных крыс и кроликов. У обезьян после внутримозгового зараже­ния развивается паралитическое заболевание.

Вирус удается пассировать в клеточных культурах (эмбрионы мышей, хомяка, кур и др.).

Природные очаги ОГЛ были выявлены в степных и лесостеп­ных районах Омской, Новосибирской, Тюменской, Курганской, Оренбургской областей. Резервуаром инфекции в природных очагах являются водяная крыса, рыжая полевка, ондатра, некото­рые водоплавающие млекопитающие и птицы.

Возбудитель переносится в основном иксодовыми клещами Dermatocentorplans и D, marginatus, и, по-видимому, редко кома­рами при кровососании. Кроме того, заражение человека может произойти при контакте с больными животными и даже при употреблении инфицированной воды и пищи. Возбудитель не передается от человека человеку и в этом смысле он является био­логическим тупиком для возбудителя.

Вакцинопрофилактика проводится по строгим эпидемиоло­гическим показаниям взрослым и детям старше 9 мес, направля­ющимся в эндемичные районы.

Специфическая вакцинация людей в эндемичных районах Омской области впервые была проведена в 1948— 1949 г, под руко­водством М.П. Чумакова. Убитую формалином вакцину из мозга инфицированных вирусом белых мышей вводили подкожно в об­ласть лопатки двукратно с интервалом 7—10 дней. Первая доза для детей и подростков до 16 лет составляла 2 мл, вторая — 3 мл, для взрослых — соответственно 3 и 5 мл. Эпидемиологический эффект вакцинации был хорошим. Среди иммунизированных в течение последующих 2 лет заболеваний ОГЛ не отмечено, а в контрольной группе заболеваемость была обычной.

При высоком риске заражения (авария в лаборатории, обна­ружение присосавшегося клеща у жителя эндемичного района) проводится пассивная иммунопрофилактика.

Клебсиеллез

Клебсисллез — группа инфекционных заболеваний, вызывае­мых условно-патогенными микроорганизмами из рода Klebsiella, семейства Enterobacieriaceae. Клебсиеллы обнаруживаются при пневмониях, инфекциях мочеполовой системы, острых желудоч­но-кишечных заболеваниях, различных гнойно-септических ос­ложнениях, менингите, глазных инфекциях, анкилозирующем спондилите, полиартрите, а также при внутрибольничных ин­фекциях. Установлена способность клебсиелл вызывать острый первичный сепсис с высокой летальностью. В настоящее время доказана этиологическая роль клебсиелл в развитии пневмоний с разрушением легочной ткани и образованием абсцессов, гангре­ны легких, эмпиемы плевры, сопровождающейся перикардитом с тяжелой сердечно-сосудистой недостаточностью. Хорошо изве­стна роль клебсиелл при пиелонефрите у детей и взрослых. Ки­шечная инфекция клебсиеллезной этиологии нередко протекает в тяжелой форме. Клебсиеллы могут вызывать как спорадичес­кие случаи, так и эпидемии кишечной инфекции, а также внут­рибольничные заболевания, особенно среди новорожденных.

У человека заболевание чаще вызывают Klebsiella pneumoniae, Klebsiella rhinoscleromatis, Klebsiella ozaenae, Klebsiella oxytoca.

Клебсиеллы образуют эндотоксин, некоторые из них — экзо­токсин. К факторам патогенности также относятся белки на­ружной мембраны, компоненты липополисахаридов О-антиге- на, К-антигены и ряд ферментов (гиалуронидаза, каталаза и ле- тициназа).

Для предупреждения клебсиеллезной инфекции исключи­тельное значение имеет строжайшее соблюдение санитарно-про­тивоэпидемического режима в родильных домах, отделениях для недоношенных, в соматических и инфекционных стационарах.

Характеристика вакцинных препаратов. Наметились различные направления по созданию препаратов для профилактики и лече­ния клебсиеллезов. Одни исследователи предлагали вакцины из К. pneumoniae в качестве специфических иммуностимуляторов, другие стремились создать неспецифические модуляторы для коррекции иммунодефицитного состояния. Последователи пер­вого направления пошли по пути создания клебсиеллезных пре­паратов из цельных клеток, капсульных полисахаридов или ри- босомальпых вакцин. После многолетних испытаний на живот­ных S. Cryz и соавт. (1985,1986) провели исследование налюдях и получили обнадеживающие результаты. Так, на волонтерах была показана безвредность и иммуногенность вакцины из капсульно­го полисахарида К. pneumoniae Kl. После подкожного введения вакцины количество специфических антител класса IgM и IgG увеличивалось в 4 раза.

Значительным препятствием для применения вакцин из кап­сульных антигенов является четкий типоспецифический имму­нитет у привитых. Это усугубляется большим разнообразием се- роваров клебсиелл, из-за чего специфическая активность моно­препаратов имеет ограниченные возможности. Создание полива­лентных вакцин (20—25 сероваров) позволит сформировать им­мунитет против 80% клебсиелл, выделяемых от больных.

Значительное развитие в нашей стране и за рубежом получило другое направление иммунопрофилактики и иммунотерапии — создание неспецифических модуляторов иммунологической ре­активности.

С 1993 г. НИИ вакцин и сывороток им, И.И. Мечникова РАМН выпускает вакцину поликомпонентную из антигенов услов­но-патогенных микроорганизмов сухую для иммунотерапии (ВП-4) воспалительных хронических заболев аний органовдыхания. Поли- компонентная вакцина включает антигенные комплексы, выде­ленные из стафилококка, протея, клебсиеллы пневмонии и ки­шечной палочки К-100 с помощью воздействия гидроксилами- ном или водной экстракцией, стерилизованные фильтрацией и лиофилизированные без стабилизирующих веществ,

Поликомпонентная вакцина вызывает у привитых выработку антител к клебсиелле пневмонии, стафилококку, протею и ки­шечной палочке, стимулирует неспецифическую резистент­ность, повышает устойчивость организма к перечисленным мик­роорганизмам и другим условно-патогенным бактериям.

Препарат предназначен для иммунотерапии больных в возрас­те от 16 до 65 лет с хроническими воспалительными и обструк- тивными заболеваниями, для профилактики обострений и сни­жения тяжести заболевания.

Вакцинотерапию проводят:

• в период ремиссии во время предсезонного увеличения чис­ла воспалительных заболеваний легких (осень, весна);

• при лечении хронических бронхитов в стадии обострения через 7—10 сут после начала традиционной терапии;

■ при лечении бронхиальной астмы (инфекционно-аллерги­ческой и смешанной формы) в период ремиссии на фоне тради­ционной терапии;

для профилактики ОРЗ у лиц, часто болеющих острыми рес­пираторными заболеваниями.

Иммунотерапию проводят детям в возрасте от 3 до 15 лете ин­фекционно-аллергической и смешанной формой бронхиальной астмы в период ремиссии на фоне традиционной терапии, пред­почтительно перед сезонным увеличением числа воспалитель­ных заболеваний легких и ОРЗ.

Взрослым больным поли компонентную вакцину вводят на- зально-подкожным и назально-оральным способом. Метод оп­ределяет врач, проводящий иммунотерапию. Иммунотерапию больным бронхиальной астмой проводит врач-аллерголог.

Препарат вводят назально с помощью пипетки, подкожно — шприцем в область нижнего угла лопатки. При оральном введе­нии дозу вакцины набирают шприцем и переносят в ложку.

В ампулу с поликомпонентной вакциной непосредственно пе­ред вакцинацией вносят 4 мл изотонического раствора натрия хлорида. Содержимое ампулы перемешивают. Время растворе­ния не должно превышать 2 мин. Растворенный препарат пред­ставляет собой желтоватую слабо опалесцирующую жидкость без взвешенных частиц.

Для назального и орального применения содержимое ампулы можно растворить 4 мл кипяченой воды комнатной температуры. Ресуспендированный препарат для назального применения, храня­щийся при температуре 6+2 °С, можно использовать в течение 3 сут.

Если назальное введение больной переносит без значительных реакций (повышение температуры тела не более чем на 0,5 °С) и бронхоспазма, можно переходить на подкожное или оральное введение вакцины. В случае повышения температуры более чем на 0,5 °С, обострения основного заболевания или возникновения побочных реакций введение вакцины прекращают.

При недостаточно выраженном эффекте, при отсутствии ре­акции на 4—5-е подкожное введение вакцины (температура не выше 37,5 °С и местная реакция не более 10 см) рекомендуется доводить курс введения вакцины до 8 инъекций дозой 0,2 мл; при оральном введении — до 10 приемов в дозе 4 мл.

При проведении вакцинотерапии не рекомендуется использо­вание других иммуномодуляторов.

При всех методах введения вакцины возможны повышение температуры тела до субфебрильных цифр (37,1—37,6 °С), зало­женность носа, кашель. При подкожном введении возможны также болезненность и гиперемия на месте инъекции диаметром до 50 мм.

Предложенную вакцину можно использовать для иммуниза­ции доноров с целью получения иммунной плазмы, которая бу­дет иметь большое значение при лечении тяжелых форм клебси- еллезов.

В США рекомендована к применению 24-валентная клебсиел- лезная капсульная полисахаридная вакцина, включающая 8-валент- ную псевдомонадную О-полисахаридную конъюгированную с ток­сином А вакцину, как у больных, так и у доноров плазмы.

Для пассивной защиты предложен специфический клебсиел- лезный иммуноглобулин, который рекомендуют применять в со­четании с антибиотиками.

Лайма болезнь

Болезнь Лайма (боррелиоз Лайма, системный клещевой бор- релиоз, хроническая мигрирующая эритема) — природно-очаго­вая трансмиссивная инфекционная болезнь, протекающая с эри­темой, лихорадкой, поражением центральной и периферической нервной системы, сердца и крупных суставов.

Заболевание вызывает грамотрицательная подвижная спиро­хета Borrelia burgdorferi, единственная из патогенных для челове­ка видов боррелий, передаваемых иксодовыми клещами через укус.

Естественным резервуаром боррелий являются мелкие и крупные дикие грызуны, сумчатые, олени, птицы, а также неко­торые домашние животные (кошки, собаки, овцы, крупный ро­гатый скот), выделяющие возбудителя с мочой.

Заражение человека происходит, как правило, летом. Воспри­имчивость людей к боррелиозу высокая, в эндемичных районах серопозитивные лица составляют 40% населения. Болеют обыч­но люди активного возраста, чаще мужчины 20—50 лет, занятые работой в сельской местности, а также туристы и горожане, зани­мающиеся сбором грибов и ягод.

Болезнь Лайма широко распространена в умеренном клима­тическом поясе Европы, Азии и Северной Америки. В России эндемичными считаются обширные регионы — Северо-Запад- ный, Уральский, Западносибирский и Дальневосточный. Эпиде­миология клещевого боррелиоза и клещевого энцефалита очень схожа. По ежегодной заболеваемости болезнь Лайма занимает одно из первых мест среди природно-очаговых инфекций.

Продолжительность инкубационного периода от 2 до 31 дня (в среднем I) дней). Клиническую картину условно разделяют на 3 последовательные стадии. Первая, общеинфекционная, продол­жается от 2 до 40 дней {в среднем 7 дней). Вокруг места присасы­вания клеща возникает кольцевидная эритема, она распространя­ется к периферии. Отмечаются субфебрилитет и симптомы общей интоксикации, увеличение регионарных лимфатических узлов, миалгия, арталгия, радикулит. Проявления болезни чрезвычайно индивидуальны, изменчивы, разнообразны, возможны их реци­дивы. Единственным патогномоничным признаком является кольцевидная эритема (первичная и вторичная) размером от 3—5 до 15—20 см бледно-розового или ярко-красного цвета, центр ко­торой бледнее периферии. В течение нескольких дней эритема распространяется на соседние участки кожи, ее наиболее частая локализация — голова, шея, верхняя часть грудной клетки. В зоне эритемы отмечаются инфильтрация кожи и гиперестезия.

На второй стадии, от 2-й до 21-й недели, чаще в4-5-ю неделю болезни, возникают поражения преимущественно нервной сис­темы и (или) сердца; серозный менингит, неврит черепных (чаще лицевого) нервов и радикулоневрит; миокардит, часто с наруше­нием предсердно-желудочковой проводимости, перикардит.

В третьей стадии, продолжающейся от нескольких месяцев до 10 лет и более, развиваются моноартрит (чаще коленных суста­вов) и полиартрит, а также хронический энцефалит и энцефало­миелит, деменция. У детей возможны задержка психического развития и ряд других симптомов, связанных с органическим по­ражением головного мозга. К поздним проявлениям болезни Лайма относят также хронический атрофический акродерматит и доброкачественный лимфаденоз кожи.

Для профилактики боррелиоза Лайма используют неспецифические методы (ношение защитной одежды в природных очагах, удаление клещей и др.), активные методы находятся в стадии раз­работки.

Характеристика вакцинных препаратов. За рубежом английской фирмой «ГлаксоСмитКляйн» разработана вакцина против Borrelia burgdorferi, представляющая собой очищенную наружную оболочку поверхностного протеина А (О SpA) возбудителя; в ка­честве адъюванта содержит квасцы.

Вакцина испытана на эффективность и безопасность, для че­го привили несколько групп волонтеров. Вакцину вводили внут­римышечно двукратно с интервалом 30 дней в дозе 10 мкг. У 96% привитых лиц установлено четырехкратное повышение титров специфических антител к возбудителю. В течение 4 мес после за­конченной вакцинации происходило постепенное снижение титров антител — примерно в 7 раз против максимального уров­ня. Однако после введения через 6 мес бустерной дозы вакцины у добровольцев титры антител быстро нарастали, приблизительно до уровня, полученного после первичной вакцинации.

У 75—100% привитых добровольцев через 12—24 ч выявлялась местная реакция в виде болезненности и умеренной припухлос­ти, исчезавших через 72 ч. Общие реакции включали в себя лихо­радку, головную боль, повышенную утомляемость, артралгии, которые исчезали через 1—3 дня.

Интенсивная разработка вакцин против болезни Лайма ведет­ся в США под руководством N1A1D с 1985 г. Был выделен борре- лиозный поверхностный OspA-липопротеин, который можно использовать для создания вакцины.

В настоящее время две компании, входящие в состав NIAID и CDC, проводят широкомасштабные испытания OspA-вакцины в эндемичных районах Нью-Йорка, Новой Англии и Висконсине. Предварительные результаты свидетельствуют о безопасности и достаточной иммуногенности в небольших группах ранее не ин­фицированных людей, проживающих в неэндемичных регионах.

Другие исследования сосредоточены на использовании БЦЖ- вакцины и гонококкового компонента в качестве векторов для OspA-антигена. Безопасность и эффективность этих антиген- доставляющих систем изучается на животных.

Легионеллез

Легионеллез — острое инфекционное заболевание с лихорадкой, поражением легких, нередко желудочно-кишечного тракта и ЦНС.

Чаще бывает пневмоническая форма заболевания (собственно болезнь легионеров), реже оно напоминает острое респиратор­ное заболевание без пневмонии (лихорадка Понтиак).

Возбудитель Legionella pneumophilla является типичным предс­тавителем рода Legionella. Это гр а мотр и цател ь н а я бактерия, дли­ной от 2 до 30—50 мкм и шириной от 0,3 до 0,7 мкм. Выделяют 15 серологических групп. Другие виды легион ел л также могут вызы­вать у человека разные заболевания органов дыхания.

Legionella pneumophilla распространена повсеместно и входит в состав микрофлоры воды естественных и искусственных водое­мов, ирригационных систем. Легионсллы долго сохраняются и размножаются в водной среде, во влажной почве, образуют плен­ки и осадок на различных поверхностях. Местом размножения легионелл могут быть системы водоснабжения и кондициониро­вания воздуха, башни-градирни, душевые установки, ванны для бальнеопроцедур, медицинское оборудование для ингаляций и искусственной вентиляции легких.

Инфекция передается аспирационным путем, факторами пе­редачи могут быть как воздух, так и вода.

Заболеваемость выше летом и осенью, регистрируются спора­дические случаи или эпидемические вспышки. В России зареги­стрированная заболеваемость в 2004 г. составила 0,01 на 100 000 населения.

Для предупреждения легионеллеза применяют обеззаражива­ние воды: хлорирование, кипячение и др. При эпидемическом распространении инфекции приходится отказываться от конди­ционеров и других приборов.

Перспективы вакцинопрофилактики. Активная профилактика пока не используется из-за отсутствия коммерческих вакцин. Перспективными в этом отношении могут оказаться живая и по­лисахаридная вакцины, разрабатываемые в США.

Живая вакцина содержит перекрестно реагирующий невируле­нтный аттенуированный мутант Legionella pneumophilla. При вак­цинации аэрогенным путем у морских свинок вырабатывался высокий титр защитных антител к дикому типу L. pneumophilla, а также сильный клеточно-опосредованный иммунный ответ,

В опыте на морских свинках было показано важное значение видоспецифического О-антигена (главного мембранного белка) и Н-термолабильного антигена, или общего антигена, для выра­ботки клеточного и гуморального иммунитета против Legionella pneumophilla, но для развития протективного иммунитета боль­шее значение имеет поверхностный мембранный О-антиген.

Полисахаридная вакцина состоит из видоспецифического О-антигена Legionella pneumophilla, который представляет собой очищенный поверхностный (мембранный) белок.

В настоящее время обе вакцины изучаются и проходят пред- клинические испытания.на животных.

Листериоз

Листериоз — острое инфекционное заболевание с лихорад­кой, интоксикацией и полиморфной клинической симптомати­кой. Преимущественно поражаются лимфоидные органы, пе­чень, селезенка, ДНС, развивается мононуклеарная реакция пе­риферической крови.

Возбудитель болезни Listeria monocytogenes принадлежит к ро­ду Listeria, морфологически представляет собой мелкие полимо­рфные палочки, грамположительные, подвижные, имеющие один или несколько жгутиков; спор и капсул не образуют,

Листерии имеют соматический О-антиген, связанный с кле­точной стенкой, и жгутиковый Н-антиген. Известны 7 сероваров и ряд подтипов, наиболее часто встречаются серовары 1 и 4Ь, По­казано, что листерии попадают в лимфоузлы, однако они не размножаются в макрофагах, с лимфой попадают в кровяное рус­ло и с кровью заносятся в паренхиматозные органы, в которых размножаются. В местах поражения образуется милиарный узе­лок с некрозом в центре. Интоксикация происходит за счет про­дуцирования мембран ото кс и на с гемолитической активностью. Другие токсины у листерий пока не известны,

Листериоз широко распространен среди людей в виде субкли- нических и клинически выраженных форм, чаще со спорадичес­кой заболеваемостью. В России зарегистрированная заболевае­мость листериозом в 2003 г. составила 0,04 на 100 000 населения, среди детей — 0,1 на 100 000 детского населения.

Листериоз относится к зоонозным заболеваниям с природной очаговостью. Л истер и и широко распространены в почве, где происходит их интенсивное размножение и накопление весной и осенью. Почва служит источником возбудителя для животных, получающих инфекцию через воду и корма, загрязненные поч­вой. Согласно данным ВОЗ, заражение человека листериозом происходит преимущественно алиментарным путем через зара­женные продукты питания без участия животных в цикле переда­чи. Возбудитель обнаруживается в молоке, мясе, овощах, в морс­ких продуктах. Листерии могут размножаться в продуктах, храня­щихся в холодильниках. Человек может заразиться листериозом и любым другим путем: контактным, аэрогенным, трансмиссив­ным, вертикальным, интранатальным, половым, В человеческой популяции носительство листерии составляет в среднем 2,1%. Человек может быть бессимптомным носителем возбудителя, пе­реносить латентную, стертую или клинически выраженную фор­му инфекции. Listeria monocytogenes можно выделить у людей из фекалий, мочи, спинномозговой жидкости, околоплодных вод и различных секретов.

Максимум заболеваемости листериозом приходится на весну и лето. Восприимчивость к листериям всеобщая, но для развития заболевания имеют значение факторы, снижающие иммунный статус макроорганизма. Наибольшему риску заболевания листе­риозом подвергаются беременные, плод и новорожденные. Врожденный листериоз генерализованный, он протекает, как сепсис.

Неспецифическая профилактика л истериоза сводится к обще­гигиеническим, противоэпидемическим и санитарно-просвети- тельным мероприятиям. Все беременные с неблагополучным акушерским анамнезом подлежат обследованию на листериоз с последующим лечением антибактериальными препаратами в случае обнаружения листерий.

Перспективы вакцинопрофилактики. В настоящее время прово­дятся интенсивные исследования по разработке вакцины. Пока­зано, что защита против листериозной инфекции обусловлена Т- клеточно-опосредованными реакциями иммунитета, вырабаты­ваемыми на О-антиген Listeria monocytogenes (белок, входящий в состав клетки бактерии),

У мышей, зараженных Listeria monocytogenes, были идентифи­цированы 9 аминокислотных остатков (от 91 по 99) листериоли- зина-О-белка. В дальнейшем этот эпитоп был синтезирован как мини-ген и выражен в рекомбинантной вакцине (W-list). Пока­зано, что иммунизация мышей рекомбинантной вакциной (W- list), несущей только 9 аминокислот бактериального патогена, может вызывать у мышей специфическую цитотоксичность Т-лимфоцитов, способную обеспечить защиту против Listeria monocytogenes.

Малярия

Малярия — длительно протекающая инфекционная болезнь с периодическими приступами лихорадки, увеличением печени, селезенки и прогрессирующей анемией.

Ежегодно малярией в мире инфицируется 300 млн человек, из которых 120 млн нуждаются в медицинской помощи, а 1,1 млн умирают.

Возбудитель — малярийный плазмодий, относится к типу простейших, классу споровиков, семейству плазмодид, роду плазмодиев.

С клинической точки зрения малярию подразделяют на две основные формы. Более опасна тропическая или злокачествен­ная (трехдневная), вызываемая Plasmodium falciparum. Более доброкачественная малярия, вызываемая Plasmodium vivax (доб­рокачественная трехдневная), Plasmodium ovale (подобная

3- дневной) и Plasmodium malaria (четырехдневная), может реци­дивировать, а тропическая малярия обычно не возобновляется после лечения (за исключением лекарственно-устойчивых форм).

Заражение человека происходит при укусе комара, в момент ко­торого в кровь попадает одна из промежуточных стадий развития плазмодий — спорозоиты. С током крови они попадают в гепато- циты и тканевые макрофаги, где происходит бесполое развитие паразита с образованием мерозоитов (экзоэритроцитарная шизо­гония). При трехдневной малярии она продолжается около 8 сут, при тропической — 6 сут, при четырехдневной — 15 сут. После за­вершения цикла тканевого развития мерозоиты выходят в кровь и попадают в эритроциты, начинается эритроцитарный цикл разви­тия возбудителя — эритроцитарная шизогония. Он завершается разрывом эритроцитов, в результате чего высвобождаются под­вижные паразиты, которые из плазмы крови внедряются в другие эритроциты. Такой цикл может повторяться несколько раз. Про­должительность одного эритроцитарного цикла при трехдневной и тропической малярии около 2 сут, а при четырехдневной — 3 сут. После 3—4 эритроцитарных циклов в крови человека появляются женские и мужские половые клетки (гаметоциты), дальнейшее развитие которых возможно только в желудке комара, куда они по­падают с кровью больного и где происходят их оплодотворение и образование из гаметоцитов гамет (половой цикл). Конечной фор­мой полового цикла являются спорозоиты, которые проникают в гемолимфу комара, а затем в его слюнные железы. С этого момен­та комар становится заразным для человека.

Неспецифические методы профилактики остаются основны­ми в борьбе с малярией. Они предполагают уничтожение кома­ров и лечение больных и паразитоносителей. Важнейшее место занимает химиопрофилактика.

Для специфической профилактики разрабатываются вакци­ны, содержащие антигены разных форм малярийного плазмодия.

Известны следующие антигены, имеющие отношение к конструированию вакцины: большой поверхностный белок спо- розоита, вокругспорозоитный белок (CSP) и его главный повто­ряющийся эпитоп Aasn-Aala-Aasn-Рго (NANP).

NANP был первичным кандидатом для создания вакцины. Структуры возбудителя, узнаваемые защитными антителами (например NANP) или Т-лимфоцитами, можно назвать «протек- топами» («protectopes»).

NANP имеется во всех последовательностях P. falciparum, поэ­тому он в виде синтетического пептида или рекомбинантного протеина был использован для создания вакцины.

На первичном этапе были созданы синтетический пептид, состоявший из NANP, конъюгированного со столбнячным анатоксином (ТТ), и рекомбинантная вакцина, содержащая эпито­пы NANP, NVDP и первые 32 аминокислоты, кодируемые геном резистентности к тетрациклину.

Холерный токсин был использован в качестве вектора. Изуча­ли рекомбинантный белок, состоящий из 32 аминокислот, коди­руемых тетрациклин-устоичивым геном, и 81 аминокислоту из неструктурного белка вируса гриппа A (R32NS1 81). В 1991 г. бы­ла проанализирована эффективность синтетического белка, со­держащего протеин 5.1, белок Plasmodium falciparum, связанный с NANP, Иммунный ответ был примерно такой же, как при ис­пользовании тетрациклин-устойчивого гена R32 tet, то есть мало­эффективным. Это же касается и использования синтетического белка, содержащего протеин 5.1, связанный с NAN Р.

При применении рекомбинантного белка NANP, связанного с вектором, в качестве которого выступала 42-аминокислотная последовательность из pre-S региона HBsAg и 226-аминокислот- ная последовательность HBsAg (R16HBsAg), число серопозитив­ных лиц было больше, но бустер-эффект оказался низок.

Рекомбинантная вакцина, представленная почти полным CS- протеином, продуцированным в клетках насекомых с использо­ванием вектора-бакуловируса, оказалась полностью неиммуно- генной.

Проводятся исследования вакцины, содержащей 2 рекомби­нантных белка — полный белок CSP и 85% поверхностного анти- гена- мерозоита-2.

В Латинской Америке и Танзании проводятся полевые испыта­ния синтетической вакцины, содержащей мерозоитные белки 83, 55, и 35 кД и последовательность NANP, носящую название SPfi66.

Кроме повторяющихся последовательностей CSP, привлекает внимание и другая область CSP — регион II, Этот регион консер­вативен у различных видов Plasmodium. In vitro антитела против региона II подавляют инвазию спорозоитов P. berghe't в клетки ге- патоцеллюлярной карциномы.

Другой кандидат — спорозоитный поверхностный протеин

2 (SSP2). В исследовании на мышах показано, что перенесенные к ним цитотоксические Т-клетки против SSP2 оказывают про- тективное действие.

Пептиды из специфического антигена печеночной стадии-1 (LSA-1) являются мишенью для цитотоксических лимфоцитов и могут быть выделены у HLA-B53+ — лиц из эндемичных по ма­лярии очагов, резистентных к тяжелой малярии.

Кандидат для вакцины против кровяной стадии плазмодия — поверхностный протеин мерозоита-1 (MSP1). Входящий в него полипептид 19 кД ингибирует in vitro инвазию мерозоитов в эрит­роциты мыши и человека.

Исследуются также белки из половых стадий плазмодиев. Это антигены 48/45 кД и 25 кД. Предполагается, что антитела к ним могут блокировать трансмиссию возбудителя.

За последние годы проводили испытания вакцин против ма­лярии на ограниченных контингентах людей. Испытания с облу­ченными спорозоитами в 1970-х годах обеспечили добровольцам очень хорошую защиту против малярии. У сформировавших про- тективный иммунитет вырабатывались антитела против спорозо- итов, включая повторный регион циркумспорозоитного (CS) протеина, и антитела против антигенов, экспрессируемых пече­ночной стадией паразита. В ответ на введение рекомбинантного CS-протеин а наблюдались Т-клеточная пролиферация, цитоток­сичность и продукция цитокинов.

В исследованиях на животных CS-синтетические пептидные и рекомбинантные вакцины обусловливали иммунный ответ при введении их с мощными адъювантами. Ранние исследова­ния с основанными на CS синтетическими пептидными и ре­комбинантными вакцинами показали, что хотя протективный иммунитет развивался у большинства подопытных животных, он был невысоким. Считают, что при наличии мощных адъю­вантов, безопасных для человека, удастся достигнуть большей иммуногенности вакцин.

В 1990-е годы проводились исследования с вакцинами против малярии с использованием различных адъювантов. Однако до­биться высокого и длительного протективного иммунитета в большинстве случаев не удалось. В начале 1997 г. исследователи из Walter Reed Army Institute of Research сообщили, что новая ком­бинированная вакцина, основанная на рекомбинантном CS- протеине и HBsAg, обеспечивает достаточно высокий уровень иммунитета. До полевых испытаний этой вакцины потребуется еще много работы.

Другим многообещающим подходом является идентификация специфических регионов CS-протеина, которые стимулируют иммунный ответ, и встраивание этих регионов в синтетическую структуру, называемую множественным антигенным пептидом (МАР). Несколько исследовательских групп в настоящее время изучают различные МАР на предмет создания вакцин. МАР, ос­нованные на структурах CS-протеина, вызывают выработку вы­соких титров антител у животных и дают бустерный эффект в случаях уже существующего специфического иммунитета. Пер­вая фаза клинических испытаний основанной на CS МАР-вак- цины против P. falciparum проводится в университетах Нью-Йор- ка и Мериленда (США).

Генетические факторы могут ограничивать иммунный ответ на вакцину Это важно в практическом отношении, так как если потенциально способные ответить выработкой антител лица не будут в достаточной степени представлены в испытаниях, то вак­цина-кандидат может быть ошибочно отвергнута как неиммуно- генная. В современных испытаниях вакцин проводится предва­рительный скрининг добровольцев на гены, обусловливающие нормальный иммунитет.

В последние годы внимание исследователей направлено на неповторяющисся домены CS-пол и пептида. Генетически кон­сервативный регион в этих доменах вовлечен в процесс прикреп­ления паразита к клеткам печени. Генно-инженерный CS-поли- пептид с удаленным повторяющимся регионом был инкорпори­рован в липосомы и в настоящий момент проходит клиническую оценку в качестве вакцины-кандидата.

Хотя усилия по созданию вакцин в прошлом были сфокусиро­ваны на аспектах гуморального иммунитета, в настоящее время возрастает число исследований роли Т-клеточного иммунитета. В дополнение к выработке антител и формированию иммунной памяти Т-клетки обусловливают цитотоксический иммунитет и индуцируют выработку цитокинов, таких, как гамма-интерферон.

CS-сенсибилизированные клоны Т-клеток были выделены из клеток лиц, вакцинированных аттенуированными паразитами.

Эти Т-клетки могут быть полезными в дальнейших исследовани­ях по развитию иммунного ответа. Эпитопы С S-полипептида, опознаваемые Т-хелперами так же, как и цитотоксически ми Т- лимфоцитами (CTL), были идентифицированы и встроены в ре­комбинантные вакцины-кандидаты против P. falciparum. Для идентификации новых компонентов вакцин-кандидатов иссле­дователи начали использовать реверсивную иммуногенетику. Идентифицирован пептидный компонент белка печеночной ста- дии P. falciparum, который эффективно распознается цитотокси- ческими Т-клетками людей, резистентных к малярии.

Несколько вакцин-кандидатов против кровяной стадии P. fal­ciparum проходят предклинические испытания. В исследованиях на обезьянах Aotus вакцины-кандидаты, основанные на С-терми- нальных фрагментах (массой 42 кДа и 19 кДа) большого, мерозо- итного поверхностного протеина (MSP-I), вызывали выработку иммунитета. В Baylor College of Medicine (США) проводится пер­вая фаза клинических исследований вакцины-кандидата, осно­ванного на фрагменте MSP-1 массой 19 кДа.

Почти 10 лет назад в Колумбии были проведены исследования вакцины против кровяной стадии Plasmodium falciparum. Удалось отложить или подавить начало болезни. Вакцина была эффек­тивна в 40% случаев. Подобные результаты получены в несколь­ких африканских исследованиях, но работа проводилась в райо­нах с невысокой заболеваемостью малярией.

Были идентифицированы антигены половых стадий возбуди­телей малярии, способные вызывать иммунитет против транс- миссионно-блокирующей активности. На основе одного из них (масса 25кДа) создана дрожжевая рекомбинантная вакцина, на которую у животных вырабатывался иммунитет. В настоящее время такая вакцина против P. falciparum, адсорбированная на гидроокиси алюминия, проходит первую фазу клинических ис­пытаний.

В настоящее время проводится активный поиск современных мощных и безопасных адъювантов и векторов, включая вирусные векторы.

Наиболее перспективным подходом к созданию вакцин про­тив малярии может оказаться создание вакцин на основании ДНК. Эти вакцины вызывают и гуморальный, и клеточный ответ. Однако в этой области не накоплен достаточный опыт. В Иссле­довательском институте ВМФ США проводится первая фаза ис­пытаний ДНК-вакцины, основанной на CS.

Парагрипп

Парагрипп — острая респираторная вирусная инфекция с умерено выраженными явлениями интоксикации и поражением слизистых оболочек верхних (ринит, фарингит) и средних дыха­тельных путей (ларингит, ларинготрахеит). Наиболее частым клиническим появлением парагриппа у детей раннего возраста служит синдром крупа.

Парагрипп распространен повсеместно и в межэпидемичес- ком по гриппу периоде остается самой частой причиной острого респираторного заболевания у детей. Парагрипп часто вызывает эпидемические вспышки, особенно в детских учреждениях зи­мой. Спорадические случаи заболевания регистрируются в тече­ние всего года с подъемом осенью и зимой. В общей структуре вирусных заболеваний дыхательной системы на долю парагриппа приходится от 10 до 30%.

Возбудителем инфекции является РНК-содержащий Para­myxovirus (PfV), подразделяющийся на 5 серологических типов: PIV-1, PIV-2, PIV-3, PIV-4 и PIV-5, С патологией дыхательных путей связаны 4 первых серотипа вируса.

Источником инфекции является только человек с клинически выраженными и стертыми формами болезни. Заражение проис­ходит воздушно-капельным путем.

Дети первых месяцев жизни маловосприимчивы к парагриппу из-за пассивного трансплацентарного иммунитета. Приобретен­ный иммунитет типоспецифичен и нестоек, в связи с чем дети переболевают парагриппом несколько раз.

Для профилактики парагриппозной инфекции имеет значе­ние своевременная изоляция. Специфическая профилактика на­ходится в стадии разработки.

Перспективы вакцинопрофилактики. Исследования ведутся в основном в США и посвящены созданию следующих препара­тов:

аттенуированная холодовая Р1У-3-вакцина;

• очищенная субъединичная (химическая) вакцина, содержа­щая РЖР-протеин;

• бычья аттенуированная вакцина;

• микроинкапсулированная вакцина (животная модель);

• живая рекомбинантная вакцина, содержащая Ь^Р-протеин (животная модель).