Заглавная страница Избранные статьи Случайная статья Познавательные статьи Новые добавления Обратная связь КАТЕГОРИИ: АрхеологияБиология Генетика География Информатика История Логика Маркетинг Математика Менеджмент Механика Педагогика Религия Социология Технологии Физика Философия Финансы Химия Экология ТОП 10 на сайте Приготовление дезинфицирующих растворов различной концентрацииТехника нижней прямой подачи мяча. Франко-прусская война (причины и последствия) Организация работы процедурного кабинета Смысловое и механическое запоминание, их место и роль в усвоении знаний Коммуникативные барьеры и пути их преодоления Обработка изделий медицинского назначения многократного применения Образцы текста публицистического стиля Четыре типа изменения баланса Задачи с ответами для Всероссийской олимпиады по праву Мы поможем в написании ваших работ! ЗНАЕТЕ ЛИ ВЫ?
Влияние общества на человека
Приготовление дезинфицирующих растворов различной концентрации Практические работы по географии для 6 класса Организация работы процедурного кабинета Изменения в неживой природе осенью Уборка процедурного кабинета Сольфеджио. Все правила по сольфеджио Балочные системы. Определение реакций опор и моментов защемления |
Опыт «Конъюгация 2»: передача плазмидного признака рези-стентности к тетрациклину ( R Т c ).
Донор: E.сoli M 17 Lac + Sm s (R Тc). Реципиент: S.flexneri- Lac - Sm r Tc s Рекомбинант:? (назовите его и укажите генетическую характеристику по указанным маркерам). К 5 мл суточной бульонной культуры реципиента добавьте 0,5 мл суточной бульонной культуры донора (густота 5х108 м.т./мл). Смесь поместите в термостат на 30-40 минут, после чего сделайте высев 0,1 мл на селективную среду Эндо со стрептомицином и тетрациклином. Контроли: 1) посев донора и реципиента на среду Эндо со стрептомицином; 2) посев донора и реципиента на среду Эндо с тетрациклином; 3) посев донора и реципиента на среду Эндо со стрептомицином и тетрациклином. Произведите учет результатов через 18-24 часа. Зарисуйте результаты эксперимента. Чьи колонии выросли из конъюгационной смеси на среде Эндо+Тс+Sm? Рассчитайте частоту передачи признака тетрациклино- резистентности по выше приведенной формуле (см. задание к опыту № 1).
3. Опыт по трансдукции: передача триптофанового признака (t гр+) у сальмонелл трансдуцирующим фагом Р 22. Донор; S. typhimurium trp + (лизогенный штамм по фагу Р 22) Реципиент: S. typhimurium trp - Трансдуцирующий фаг: Р 22 Рекомбинант:? (назовите) Пояснение: штамм донора является прототрофом по триптофану, т. е. сам синтезирует эту аминокислоту, имея в составе генома гены tгр+, кодирующие этот синтез. Геном этих бактерий также содержит профаг фага Р 22. Его локус в хромосоме клетки рядом с tгр+-генами. При индуцировании лизогенных клеток (УФ) фаг выходит из интегрированного состояния, захватывая trp-гены. При инфицировании новых клеток вирион фага передает эти гены, осуществляя специфическую трансдукцию. В качестве реципиента взят ауксотрофный по триптофану штамм, который не способен синтезировать этой аминокислоты и нуждается в ее присутствии в питательной среде для своего роста. При постановке опыта лизогенный штамм донора обрабатывают УФ лучами, центрифугируют со скоростью 103 об./мин в течение 30 минут. Надосадочную жидкость (содержащую индуцированный трансдуцирующий фаг) используют в дальнейшей работе. Центрифугат не содержит клетки донора. К 3 мл суточной бульонной культуры реципиента (густота 5х108 м.т./мл) добавьте 1 мл полученного центрифугата. Смесь помещают в термостат на 30-60 минут, после чего делают высев 0,1 мл на минимальную среду, не содержащую триптофана.
Контроли: 1) посев донора на минимальную среду; 2) посев реципиента на минимальную среду; 3) посев реципиента на среду с триптофаном; 4) посев центрифугата на минимальную среду; 5) посев центрифугата на среду с триптофаном. Все посевы помещают в термостат. Учет результатов через 18-24 часа. Зарисуйте результаты эксперимента. Чьи колонии выросли на минимальной среде из трансдуцирующей смеси в опыте? Почему? Рассчитайте частоту трансдукции триптофанового признака по известной Вам формуле.
4. Опыт по трансформации: передача капсульного признака (caps +). Донор: изолированная ДНК штамма К. pneumoniae (caps+ ) Реципиент: штамм Е. coli caps - Рекомбинант:? (назовите и укажите генетическую характеристику по указанному признаку) В опыте произведен посев штамма реципиента на среду Эндо с добавлением ДНК донора. Контроли: 1) посев штамма донора на среду Эндо; 2) посев штамма реципиента на среду Эндо. Посевы помещены в термостат на 24 часа. Учтите результаты. Обратите внимание, что колонии донорского штамма на Эндо лактозопозитивны (красного цвета), слизистой консистенции, а колонии реципиента лактозопозитивны, обычной мягкой консистенции. Оцените характер роста на среде Эндо с добавлением ДНК донора. Найдите колонии рекомбинанта. Как они выглядят? Зарисуйте схему постановки опыта. Опишите колонии донора, реципиента и рекомбинанта. Промикроскопируйте готовые мазки из колоний донора, реципиента, рекомбинанта, окрашенные по методу Бурри-Гинса на выявление капсулы. Зарисуйте результаты.
|
|||||
Последнее изменение этой страницы: 2021-05-11; просмотров: 77; Нарушение авторского права страницы; Мы поможем в написании вашей работы! infopedia.su Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав. Обратная связь - 3.144.25.74 (0.004 с.) |