Лд. 25. 04. 20. Зейналиева Э. Н. Клиника. 1-1б. Практика № 7. Определение белка в моче количественными методами

ЛД.25.04.20.ЗЕЙНАЛИЕВА Э.Н.Клиника.1-1Б. практика № 7. Определение белка в моче количественными методами

Государственное автономное образовательное учреждение

среднего профессионального образования Республики Крым

«Евпаторийский медицинский колледж»

План занятия (практическое) № 7

Тема занятия: Определение белка в моче количественными методами

Дисциплина: МДК 01.01Теория и практика лабораторных общеклинических исследований

Специальность: 31.02.03 Лабораторная диагностика

Цели занятия:

· Изучить количественные методы определения белка в моче. 

 

План занятия:

1. Записать алгоритмы определения белка в моче в дневник (Приложение 1)

2. Составить схемы по алгоритмам определения белка

3. Ответить на вопросы (Приложение 2)

Задание на дом

Подготовка по темам «лекция 1-8 и п/з № 1-4

- Составление вопросников с ответами по темам лекций 7,8

- Составление схем по химическому исследованию мочи, видам протеинурий, качественным методам определения белка в моче.                                           - подготовить сообщение на тему  «Виды исследований в КДЛ»

Преподаватель оценивает работу студентов, корректирует ошибки, отвечает на вопросы студентов

 

Преподаватель высшей категории _____________к.б.н Зейналиева Э.Н.

Приложение 1

Алгоритм 1. Унифицированный метод Брандберга–Робертса–Стольникова

Принцип метода. В основу положена кольцевая проба Геллера, заключающаяся в том, что при добавлении к моче азотной кислоты на границе сред (кислота—моча) при наличии белка происходит его коагуляция, и появляется белое кольцо.

Реактивы: 30% раствор азотной кислоты (HNO₃) (d = 1,2) или реактив Ларионовой: 20–30 г натрия хлорида (NaCl) растворяют при нагревании в 100 мл дистиллированной воды, остужают, фильтруют; к 99 мл фильтрата приливают 1 мл концентрированной HNO₃.

Ход определения. В пробирку наливают 1–2 мл 30% раствора HNO₃ или реактива Ларионовой и осторожно по стенке наслаивают столько же профильтрованной мочи.

Оценка результатов. Появление на границе двух жидкостей между 2-й и 3-й минутами тонкого белого кольца указывает на наличие белка в концентрации примерно 0,033 г/л. При появлении кольца раньше 2 мин после наслаивания мочу следует развести дистиллированной водой и провести повторное исследование с разведенной мочой. Степень разведения мочи подбирают в зависимости от вида кольца, его ширины, компактности и времени появления. При нитевидном кольце, появившемся ранее 2 мин, мочу разводят в 2 раза, при широком — в 4 раза, при компактном — в 8 раз и т. д. Концентрацию белка вычисляют, умножив степень разведения на 0,033 г/л.

Примечание. Белое кольцо может образовываться при наличии больших количеств уратов; в отличие от белкового, оно появляется немного выше границы двух жидкостей и растворяется при легком нагревании

Приготовление разведений для построения калибровочного графика

№ пробирки	Стандартный раствор, мл	0,9% NaCl, мл	Концентрация белка, г/л
1	0,05	9,95	0,05
2	0,1	9,9	0,1
3	0,2	9,8	0,2
4	0,5	9,5	0,5
5	1,0	9,0	1,0

Из каждого полученного разведенного раствора берут по 1,25 мл и обрабатывают, как опытные пробы.

Примечание. Прямолинейная зависимость величины экстинкции и концентрации белка сохраняется до 1 г/л. При более высоких концентрациях белка пробу следует разводить и учитывать разведение при расчете.

При наличии в моче веществ, содержащих йод, могут быть получены ложноположительные результаты. Поэтому тест нельзя использовать у больных, принимающих препараты йода или прошедших исследование с применением йодсодержащих рентгено-контрастных соединений. Ложноположительные реакции при проведении исследования могут быть вызваны приемом сульфаниламидных лекарственных средств, больших доз пенициллина и при высоких концентрациях в моче мочевой кислоты.

Приложение 2

Что значит протеинурии?

Назовите норму белка в моче?

Назовите причины физиологической потеинурии?

Принцип биуретовой реакции на белок

ЛД.25.04.20.ЗЕЙНАЛИЕВА Э.Н.Клиника.1-1Б. практика № 7. Определение белка в моче количественными методами

Государственное автономное образовательное учреждение

среднего профессионального образования Республики Крым

«Евпаторийский медицинский колледж»

План занятия (практическое) № 7

Тема занятия: Определение белка в моче количественными методами

Дисциплина: МДК 01.01Теория и практика лабораторных общеклинических исследований