Работа 2. Определение содержания лейкоцитов в периферической крови у здорового животного и у животного с острой лучевой болезнью

Работа проводится на двух крысах (или мышах), одна из которых предварительно за 3-5 дней до занятия была подвергнута рентгеновскому облучению в дозе 6 Гр.

Один из методов подсчета лейкоцитов – использование специальных счетных камер. Наибольшее распространение в России получила счетная камера Горяева.

Камера Горяева имеет глубину 0,1 мм, а площадь сетки - 9 мм². Сетка разделена на 225 больших квадратов. Часть больших квадратов – через два на третий – разделена дополнительно на 16 малых квадратов. Объем камеры, соответствующий большому квадрату, равен 1/250 мм³. Перед заполнением счетной камеры необходимо к боковым полям ее плотно притереть покровное стекло. Оно притирается легким нажимом на края стекла большими пальцами правой и левой руки до появления радужных колец (кольца Ньютона). Заполнение камеры производится из меланжера через щель между средней пластинкой и покровным стеклом.

Кровь для анализа берется из предварительно обработанного спиртом и эфиром хвоста лабораторного животного. Из надреза кончика хвоста насасывают кровь с помощью резиновой груши в смеситель для белой крови до метки «0,5». Кончик смесителя тщательно обтирают от следов крови и погружают в сосуд с 3% уксусной кислотой, которую насасывают до метки «11» (кровь при этом разводится в 20 раз). Содержимое меланжера тщательно перемешивают в течение 2-3 мин путем встряхивания. Первые 2 капли жидкости из меланжера удаляются, а затем заполняют счетную камеру Горяева, приложив меланжер с выступающей каплей к краю покровного стекла. Выждав 1-2 мин, чтобы клетки осели на дно камеры, подсчитывают их под микроскопом (окуляр х 15, объектив х 8, при опущенном конденсоре). Лейкоциты сосчитываются в 100 больших квадратах; суммарная цифра делится на 20. Таким образом, определяется общее количество лейкоцитов в Г/л. По результатам работы делается вывод о состоянии животных.

 

Работа 3. Просмотр демонстрационных мазков с патологическими формами лейкоцитов и зарисовка последних

Во время просмотра мазков обращают внимание на морфологию патологических форм лейкоцитов. Зарисовывают следующие патологические формы лейкоцитов:

1. Гиперсегментированные формы нейтрофильных лейкоцитов.

2. Гигантские формы лейкоцитов.

3. Микроформы лейкоцитов.

4. Лейкоциты с токсогенной зернистостью.

5. Явления пикноза, рексиса, фрагментации, лизиса со стороны ядер лейкоцитов.

6. Клетки с вакуолизацией в ядрах и цитоплазме.

При просмотре мазков студенты пользуются консультацией преподавателя, цветными рисунками, слайдами и стендами.

 

                                                                                                            Таблица 1-1

Таблица учета экспериментальных данных

№ животного, день опыта	Масса, г	Состояние животного	Количество лейкоцитов
Контроль 3-й день 5-й день

ТЕСТОВЫЕ ЗАДАНИЯ

1. Х-ЛУЧИ БЫЛИ ОТКРЫТЫ

а) в 1901

б) в 1896

в) в 1895

г) в 1898

д) в 1906

2. Х-ЛУЧИ ОТКРЫТЫ

а) А. Беккерелем

б) А. Иоффе

в) П. Кюри

г) В. Рентгеном

д) М. Складовской-Кюри

3. ЯВЛЕНИЕ ЕСТЕСТВЕННОЙ РАДИОАКТИВНОСТИ ОТКРЫТО

а) П. Кюри

б) Ф. Дессауэром

в) А. Беккерелем

г) Е. Лондоном

д) М. Складовской-Кюри

4. ЯВЛЕНИЕ ЕСТЕСТВЕННОЙ РАДИОАКТИВНОСТИ БЫЛО ОТКРЫТО

а) в 1895

б) в 1896

в) в 1903

г) в 1908

д) в 1912

5. РАДИЙ И ПОЛОНИЙ БЫЛИ ОТКРЫТЫ

а) в 1893

б) в 1898

в) в 1930

г) в 1990

д) в 2000

6. РАДИЙ И ПОЛОНИЙ ОТКРЫТЫ

а) Л. Гальвани

б) А. Вольтом

в) М. и П. Кюри

г) М. Планком

д) Д. Менделеевым

7. ИСКУССТВЕННАЯ РАДИОАКТИВНОСТЬ ОТКРЫТА

а) Г. Альберс-Шонбергом

б) А. Иоффе

в) Э. Резерфордом

г)  И. и Ф. Жолио-Кюри

д) И. Тархановым

8. ЯВЛЕНИЕ ИСКУССТВЕННОЙ РАДИОАКТИВНОСТИ БЫЛО ОТКРЫТО

а) в 1830

б) в 1900

в) в 1922

г) в 1934

д) в 1945

9. ЗАКОН БЕРГОНЬЕ И ТРИБОНДО ГЛАСИТ

а)  наиболее радиочувствительны зрелые клетки

б)  наиболее радиочувствительны редко делящиеся клетки

в) наиболее радиочувствительны менее дифференцированные и активно делящиеся клетки

г)  наиболее радиочувствительны клетки ЦНС

д)  наиболее радиочувствительны клетки костного мозга

Схема 1-1

Радиационная гигиена

Общая (фундаментальная) радиобиология

Радиобиология опухолей

Медицинская радиобиология

Радиационная иммунология

Противолучевая защита и терапия

Космическая радиобиология

Радиационная экология

Радиационная биохимия

Радиационная генетика

Радиационная цитология

Структура радиобиологии как комплексной дисциплины

 

 

Схема 1-2

Радиационная гигиена

Радиобиология опухолей

Связь радиобиологии с другими дисциплинами

 

 

Литература

ОСНОВНАЯ:

1. Кудряшов Ю.Б.  Радиационная биофизика (ионизирующие излучения)/под ред. В.К. Мазурика, М.Ф. Ломанова. М., Физматлит, 2004.

2. Кудряшов Ю.Б., Петров Ю.Ф., Рубин А.Б. Радиационная биофизика: радиочастотные и микроволновые электромагнитные излучения. – М.: ФИЗМАТЛИТ. 2008.

3. Цыб А.Ф., Будагов Р.С., Замулаева И.А. и др.  Радиация и патология. Учебное пособие / Под ред. А.Ф. Цыба. – М.: Высшая школа, 2005.

4. Ярмоненко С.П., Вайнсон А.А. Радиобиология человека и животных. Учебное пособие / Под ред. С.П. Ярмоненко. – М.: Высшая школа, 2004.

ДОПОЛНИТЕЛЬНАЯ:

5. Абрамов М.Г. Гематологический атлас. – М.: Медицина, 1985

6. Гольдберг Е.Д. Справочник по гематологии. – Томск: Изд-во Том. ун-та, 1989.

7. Королюк И.П. 100 лет открытия рентгеновских лучей. – Самара, 1995.

8. Кюри Е. Мария Кюри. – М: Атомиздат, 1976.

9. Уразова О.И., Новицкий В.В. Лабораторная диагностика гематологических синдромов и болезней. Учебное пособие. – Томск: Изд-во Печатная мануфактура, 2008.

 

Занятие 2