По цитологии, гистологии и эмбриологии 


Мы поможем в написании ваших работ!



ЗНАЕТЕ ЛИ ВЫ?

По цитологии, гистологии и эмбриологии



РАБОЧАЯ ТЕТРАДЬ

ПО ЦИТОЛОГИИ, ГИСТОЛОГИИ И ЭМБРИОЛОГИИ

СТУДЕНТА II КУРСА ВЕТЕРИНАРНОГО ФАКУЛЬТЕТА ГРУППА ________

___________________________________________________________________________

СПЕЦИАЛЬНОСТЬ ВЕТЕРИНАРИЯ

УЧЕБНЫЙ ГОД 2020/2021


ГИСТОЛОГИЧЕСКАЯ ТЕХНИКА

Требования к гистологическому препарату:

- тонкий

- прозрачный

- оптически дифференцированный (цветной)

 

1. Взятие свежего материала (объем 1 см3)

2. Фиксация (сущность – зафиксировать прижизненную структуру белков)

Фиксаторы: 10% забуференный раствор нейтрального формалина; спирты и др.

3. Уплотнение срезов

 - заморозка (уплотнение жидкой угольной кислотой)

 - пропитывание разогретым парафином (t = 570С)

 - пропитывание раствором целлоидина

Материал дегидратировать (обезводить) и обезжирить в спиртах восходящей концентрации, затем пропитать веществом, в котором растворяется парафин (ксилол, толуол, хлороформ и др.), пропустить через смесь органического растворителя (парафин + хлороформ 1: 1), уплотнить парафином.

4. Приготовление срезов на микротоме (толщина срезов 5-8 мкм).

5. Окраска срезов

Красители:

   а) основные: окрашивают преимущественно ядра клеток (например, гематоксилин)

       Структуры, окрашивающиеся основными красителями, называются базофильными.

   б) кислые: окрашивают преимущественно цитоплазму (например, эозин)

       Структуры, окрашивающиеся кислыми красителями, называются оксифильными или ацидофильными.

   в) нейтральные или специальные (например, орсеин окрашивает эластические волокна, судан и осмиевая кислота – жиры, азотнокислое серебро – нервная ткань)

Депарафинировать срез органическим растворителем (ксилол), провести через спирты нисходящей концентрации (наводнить), окрасить красителями, провести через спирты восходящей концентрации (обезводить), просветлить срез в органическом растворителе (ксилол) и заключить в бальзам (смола пихты или канадского кедра), накрыть покровным стеклом.

 


ПРАВИЛА МИКРОСКОПИРОВАНИЯ

1. Установить микроскоп в «Рабочее положение»: объектив малого увеличения располагается на расстоянии примерно 1 см от поверхности предметного столика, перпендикулярно к нему.

2. Настроить освещение, пользуясь вогнутой стороной зеркала (плоскую сторону используют при ярком освещении) или включить встроенный источник освещения.

3. Поместить гистологический препарат на предметный столик и, пользуясь макровинтом, добиться четкого изображения. Перемещая препарат по предметному столику руками, рассмотреть все имеющиеся структуры.

4. При необходимости перейти на большое увеличение, нужно повернуть револьвер с объективами до щелчка и расположить объектив большого увеличения перпендикулярно к поверхности предметного столика. С помощью макровинта добиться появления изображения, а затем, воспользовавшись микровинтом, получить максимально четкое изображение. Рассмотреть имеющиеся структуры.

5. Закончить микроскопирование на малом увеличении, повернув револьвер с объективами до щелчка и установив объектив малого увеличения перпендикулярно к поверхности предметного столика.

6. Снять препарат с предметного столика, поместить его в коробку для гистологических препаратов.

7. Отключить встроенный источник освещения.


ЗАНЯТИЕ 1.

ЗАНЯТИЕ 2.

ТЕМА: «ЦИТОПЛАЗМА. ОРГАНОИДЫ И ВКЛЮЧЕНИЯ».

ОСНОВНЫЕ ЭЛЕМЕНТЫ ЦИТОПЛАЗМЫ КЛЕТКИ

ГИАЛОПЛАЗМА                                                              ОРГАНЕЛЛЫ                                                                                   ВКЛЮЧЕНИЯ

 

 

                                                     ОБЩЕГО НАЗНАЧЕНИЯ                                           СПЕЦИАЛЬНОГО НАЗНАЧЕНИЯ

 

                                    МЕМБРАННЫЕ                    НЕМЕМБРАННЫЕ                  1.

1.                                                                                    1.                                                        2.

2.                                                                                    2.                                                    3.

3.                                                                                    3.

4.

5.

 

Органеллы –_____________________________________________________________________________________________________________

_________________________________________________________________________________________________________________________

_________________________________________________________________________________________________________________________

Включения - ____________________________________________________________________________________________________________

________________________________________________________________________________________________________________________

________________________________________________________________________________________________________________________

Виды включений:

1. Трофические

2. Секреторные

3. Экскреторные

4. Пигментные


ОРГАНЕЛЛЫ ЭУКАРИОТИЧЕСКОЙ КЛЕТКИ

ОРГАНЕЛЛЫ СТРОЕНИЕ ФУНКЦИИ

ОРГАНЕЛЛЫ ОБЩЕГО НАЗНАЧЕНИЯ

МЕМБРАННЫЕ:

Эндоплазматическая сеть (ЭПС)   Виды ЭПС: 1. Гранулярная   2. Агранулярная       Синтез белков, их модификация и конденсация, а также их транспорт в другие участки клетки. Синтезируются: 1. Белки для плазматической мембраны 2. Белки и ферменты для экспорта 3. Белки и ферменты лизосом     1. Синтез стероидных гормонов 2. Депо Са2+ 3. Синтез полисахаридов
Аппарат Гольджи (АГ)     1. Модификация секреторного продукта 2. Концентрирование секретированных продуктов 3. Упаковка секреторного продукта – образование секреторных гранул и пузырьков 4. Формирование лизосом
Лизосомы Виды лизосом: 1. 2. 3.       1. Переваривание внутриклеточных компонентов (аутофагия) 2. Переваривание частиц, попавших в клетку (гетерофагия)
Пероксисомы     1. Ферменты синтеза желчных кислот 2. Окисление жирных кислот 3. Инактивация перекиси водорода Наиболее характерны для: 1. 2.
Митохондрии     1. Аэробное окисление глюкозы (цикл Кребса) 2. Транспорт электронов 3. Фосфорилирование макроэргов (АДФ до АТФ) 4. Сопряжение и разобщение процессов окисления и фосфорилирования 5. Контроль внутриклеточной концентрации Са2+ 6. Синтез белков

НЕМЕМБРАННЫЕ:

Рибосомы Виды рибосом: 1. 1.1. 1.2. 2.    
Клеточный центр (центриоли)       Формула:  
Цитоскелет (фибриллярные структуры)        

ЗАНЯТИЕ 3.

СТРУКТУРНЫЕ ЭЛЕМЕНТЫ ЯДРА

СТРУКТУРНЫЕ ЭЛЕМЕНТЫ ЯДРА СТРОЕНИЕ ФУНКЦИИ
Хроматин    
Ядрышко    
Кариоплазма    
Ядерный белковый матрикс    
Ядерная оболочка    

Препарат 1: ДНК и РНК в структуре клеток (поперечный срез спинного мозга) Окраска: метиленовый зеленый-пиронин   1. Скопление рибосом в цитоплазме (РНК) 2. Ядро 2.1. Ядрышко (РНК) 2.2. Хроматин (ДНК) Препарат 2: Структура интерфазного ядра (нервные клетки спинномозгового узла) Окраска: гематоксилин-эозин     1. Цитоплазма 2. Ядро 2.1. Ядерная оболочка 2.2. Ядрышко 2.3. Хроматин 2.4. Кариоплазма Препарат 3: Митоз (клетки корешка лука) Окраска: железный гематоксилин   1. Интерфаза 1.1. Материнская клетка 1.2. Дочерние клетка 2. Митоз 2.1. Профаза 2.2. Метафаза 2.3. Анафаза 2.4. Телофаза

Подпись преподавателя: _______________________________


ЗАНЯТИЕ 4.

ОСНОВНЫЕ ЭТАПЫ ГАМЕТОГЕНЕЗА

Стадии Сперматогенез Овогенез

Размножения

Первичные половые клетки делятся путем МИТОЗА, происходит увеличение их количества.

Сперматогонии. Стадия продолжается в течении всей жизни особи. Овогонии. Стадия заканчивается до рождения в первой половине внутриутробного развития.

Роста

Увеличиваются в размерах, происходит накопление органелл, увеличение объема цитоплазмы, УДВОЕНИЕ НАБОРА ХРОМОСОМ.

Сперматоциты I порядка (2n4c). Овогонии I порядка (2n4c). Эта стадия более выражена. Малый рост (без гормональной стимуляции). Большой рост (гормон –фолликулотропин) – формирование фолликулярной оболочки, накопление питательного материала – лецитина.

Созревания

Происходит МЕЙОЗ, включающий два деления, в результате которых образуются четыре гаплоидных клетки.

Сператоциты II порядка (2 шт.) (1n2c)     Сперматиды (4) (1n1c) Овогония II порядка и направительное тельце (1n2c)   Яйцеклетка и три направительных тельца (1n1c)  
Формирования Образование из округлой сперматиды сперматозоида. отсутствует

ЗАНЯТИЕ 5.

ТЕМА: «ИТОГОВОЕ № 1».

 

ТРЕБОВАНИЯ К ЗАНЯТИЮ:

РАБОЧАЯ ТЕТРАДЬ

ПО ЦИТОЛОГИИ, ГИСТОЛОГИИ И ЭМБРИОЛОГИИ

СТУДЕНТА II КУРСА ВЕТЕРИНАРНОГО ФАКУЛЬТЕТА ГРУППА ________

___________________________________________________________________________

СПЕЦИАЛЬНОСТЬ ВЕТЕРИНАРИЯ

УЧЕБНЫЙ ГОД 2020/2021


ГИСТОЛОГИЧЕСКАЯ ТЕХНИКА

Требования к гистологическому препарату:

- тонкий

- прозрачный

- оптически дифференцированный (цветной)

 

1. Взятие свежего материала (объем 1 см3)

2. Фиксация (сущность – зафиксировать прижизненную структуру белков)

Фиксаторы: 10% забуференный раствор нейтрального формалина; спирты и др.

3. Уплотнение срезов

 - заморозка (уплотнение жидкой угольной кислотой)

 - пропитывание разогретым парафином (t = 570С)

 - пропитывание раствором целлоидина

Материал дегидратировать (обезводить) и обезжирить в спиртах восходящей концентрации, затем пропитать веществом, в котором растворяется парафин (ксилол, толуол, хлороформ и др.), пропустить через смесь органического растворителя (парафин + хлороформ 1: 1), уплотнить парафином.

4. Приготовление срезов на микротоме (толщина срезов 5-8 мкм).

5. Окраска срезов

Красители:

   а) основные: окрашивают преимущественно ядра клеток (например, гематоксилин)

       Структуры, окрашивающиеся основными красителями, называются базофильными.

   б) кислые: окрашивают преимущественно цитоплазму (например, эозин)

       Структуры, окрашивающиеся кислыми красителями, называются оксифильными или ацидофильными.

   в) нейтральные или специальные (например, орсеин окрашивает эластические волокна, судан и осмиевая кислота – жиры, азотнокислое серебро – нервная ткань)

Депарафинировать срез органическим растворителем (ксилол), провести через спирты нисходящей концентрации (наводнить), окрасить красителями, провести через спирты восходящей концентрации (обезводить), просветлить срез в органическом растворителе (ксилол) и заключить в бальзам (смола пихты или канадского кедра), накрыть покровным стеклом.

 


ПРАВИЛА МИКРОСКОПИРОВАНИЯ

1. Установить микроскоп в «Рабочее положение»: объектив малого увеличения располагается на расстоянии примерно 1 см от поверхности предметного столика, перпендикулярно к нему.

2. Настроить освещение, пользуясь вогнутой стороной зеркала (плоскую сторону используют при ярком освещении) или включить встроенный источник освещения.

3. Поместить гистологический препарат на предметный столик и, пользуясь макровинтом, добиться четкого изображения. Перемещая препарат по предметному столику руками, рассмотреть все имеющиеся структуры.

4. При необходимости перейти на большое увеличение, нужно повернуть револьвер с объективами до щелчка и расположить объектив большого увеличения перпендикулярно к поверхности предметного столика. С помощью макровинта добиться появления изображения, а затем, воспользовавшись микровинтом, получить максимально четкое изображение. Рассмотреть имеющиеся структуры.

5. Закончить микроскопирование на малом увеличении, повернув револьвер с объективами до щелчка и установив объектив малого увеличения перпендикулярно к поверхности предметного столика.

6. Снять препарат с предметного столика, поместить его в коробку для гистологических препаратов.

7. Отключить встроенный источник освещения.


ЗАНЯТИЕ 1.



Поделиться:


Читайте также:




Последнее изменение этой страницы: 2021-04-13; просмотров: 71; Нарушение авторского права страницы; Мы поможем в написании вашей работы!

infopedia.su Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав. Обратная связь - 18.219.14.63 (0.026 с.)