Заглавная страница Избранные статьи Случайная статья Познавательные статьи Новые добавления Обратная связь КАТЕГОРИИ: АрхеологияБиология Генетика География Информатика История Логика Маркетинг Математика Менеджмент Механика Педагогика Религия Социология Технологии Физика Философия Финансы Химия Экология ТОП 10 на сайте Приготовление дезинфицирующих растворов различной концентрацииТехника нижней прямой подачи мяча. Франко-прусская война (причины и последствия) Организация работы процедурного кабинета Смысловое и механическое запоминание, их место и роль в усвоении знаний Коммуникативные барьеры и пути их преодоления Обработка изделий медицинского назначения многократного применения Образцы текста публицистического стиля Четыре типа изменения баланса Задачи с ответами для Всероссийской олимпиады по праву Мы поможем в написании ваших работ! ЗНАЕТЕ ЛИ ВЫ?
Влияние общества на человека
Приготовление дезинфицирующих растворов различной концентрации Практические работы по географии для 6 класса Организация работы процедурного кабинета Изменения в неживой природе осенью Уборка процедурного кабинета Сольфеджио. Все правила по сольфеджио Балочные системы. Определение реакций опор и моментов защемления |
Безотлагательная необходимость в долгосрочных глобальных стратегиях здравоохранения
Очевидно, что существует безотлагательная необходимость в эффективных глобальных стратегиях здравоохранения, выходящих за рамки борьбы с текущей пандемией. Эти долгосрочные и глобальные стратегии здравоохранения должны соответствовать следующим критериям: 1. Эффективность против текущей пандемии. 2. Эффективность укрепления иммунной системы населения мира с целью предотвращения будущих пандемий, в том числе вызванных еще неизвестными инфекционными агентами. 3. Безопасность и доступность, чтобы люди во всем мире могли этим воспользоваться; это особенно важно, поскольку любая глобальная стратегия борьбы с пандемией может быть успешной только в том случае, если она работает в интересах самых бедных членов человечества. Обоснование нашего исследования На протяжении многих лет мы успешно тестировали определенные питательные микроэлементы как естественные ингибиторы вирусных инфекций и определили общие биологические цели для этих природных соединений - независимо от конкретных типов вирусов. Наши результаты показали, что витамин С, особенно в сочетании с другими природными соединениями, такими как лизин, экстракт зеленого чая, кверцетин и другие питательные микроэлементы, может влиять на ключевые механизмы, связанные с инфицированием вирусом гриппа человека H1N1 (Jariwalla 2007), птичьим гриппом H5N1 (Deryabin 2008), птичий грипп H9N2 in vitro и in vivo (Barbour 2009), а также ВИЧ (Jariwalla 2010). Эти питательные микроэлементы были эффективны в подавлении вирусной инфекционности, размножения, распространения и могли защитить инфицированные ткани от повреждений, связанных с инфекцией. Более того, эти природные компоненты обладают большей эффективностью в защите, например, клеток, инфицированных вирусом птичьего гриппа, чем противовирусные препараты, такие как Тамифлю и Амантадин (Дерябин, 2008). Мы применили эти знания к текущей пандемии и исследовали эффективность питательных микроэлементов в подавлении клеточной экспрессии рецепторов ACE2, используемых коронавирусом для проникновения в клетки, в эпителиальных клетках легких и эндотелиальных клетках сосудов. Реактивы Все реагенты были предоставлены Sigma / Millipore, если не указано иное. Клеточные культуры Эпителиальные клетки малых дыхательных путей человека (SAEC, закупленные у АТСС) культивировали в среде для роста эпителиальных клеток дыхательных путей (АТСС) в пластиковых колбах при 37 o C и 5% CO 2. Для эксперимента SAEC, пассажи 5-7, помещали на покрытые коллагеном 96-луночные пластиковые планшеты (Corning) в 100 мкл ростовой среды и выращивали до конфлюэнтного слоя в течение 4-7 дней.
Эндотелиальные клетки аорты человека (HAEC, приобретенные у Lonza) культивировали в среде для выращивания EGM-2 (Lonza) в пластиковых колбах при 37 o C и 5% CO 2. Для эксперимента клетки через 5-7 пассажей высевали на покрытые коллагеном 96-луночные пластиковые планшеты (Corning) в 100 мкл среды EGM-2 и выращивали до конфлюэнтного слоя в течение 3-5 дней. Клеточные добавки Используемая комбинация питательных микроэлементов была разработана в Исследовательском институте доктора Рата (Сан-Хосе, Калифорния). Смесь, растворенная в 0,1 н. HCl согласно протоколу Фармакопеи США (USP 2040), была обозначена как исходный раствор. Для экспериментов в клетки добавляли указанные дозы добавок в 100 мкл / лунку среды для роста клеток в течение 3-7 дней. Рабочие концентрации добавок были выражены в миллионных долях исходной концентрации на мл (mpsc / мл). Питательный состав и дозировки, использованные в экспериментах, представлены в таблице 1. Воспалительный процесс в клетках SAEC был вызван совместной инкубацией с 10 нг / мл человеческого TNF-альфа или 100 нг / мл человеческого интерлейкина 6 (Sigma). Анализ ACE-2 ELISA Лунки культурального планшета дважды промывали забуференным фосфатом физиологическим раствором (PBS) и фиксировали раствором 3% формальдегид / 0,5% Triton X100 / PBS в течение 1 часа при 4 ° C, затем промывали четыре раза PBS. Добавляли 200 мкл 1% бычьего сывороточного альбумина БСА (Sigma) в PBS и инкубировали планшет при 4 ° C в течение ночи. Кроличьи поликлональные антитела против ACE-2 (Sigma) добавляли к 100 мкл 1% BSA / PBS в течение 1,5 ч инкубации при комнатной температуре (RT). После трех циклов промывки 0,1% BSA / PBS в лунки добавляли 100 мкл антител против IgG кролика, конъюгированных с пероксидазой хрена (HRP, Sigma), в течение 1 часа при комнатной температуре. После трех циклов отмывки 0,1% BSA / PBS сохраняющуюся активность HRP определяли путем инкубации со 100 мкл раствора субстрата TMB (Sigma) в течение 20 мин при комнатной температуре с последующим добавлением 50 мкл 1 н. H 2 SO 4. и измерение оптической плотности при 450 нм с помощью микропланшетного ридера (Molecular Devices). Результаты выражены в процентах от экспериментального контроля без добавления добавки (среднее +/- SD, n = 6). Среднее значение неспецифического контроля (лунки, инкубированные без антител против ACE2) (n = 6) вычитали из значений всех образцов.
Таблица 1. Состав и концентрация микронутриентов. Полученные результаты
|
||||||
Последнее изменение этой страницы: 2021-04-04; просмотров: 68; Нарушение авторского права страницы; Мы поможем в написании вашей работы! infopedia.su Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав. Обратная связь - 3.141.244.153 (0.006 с.) |