Возбудители гепатитов B, C и Д .

ГЕПАТИТ В

Таксономия	Семейство: Hepandaviridae Род: Orthohepandavirus
Характеристика	ДНК-содержащий вирус. Кольцевая ДНК содержит 3200 нуклеодитов и способна принимать линейную форму. ДНК состоит из двух нитей, отличающихся по длине. «+» нить короче, чем «-«   нить. Помимо геномной ДНК в середине вириона находится вирусная ДНК-полимераза, она не обладает вирусными свойствами. Геном заключен в капсидЮ состоящий из 180 капсомеров. Он имеет сферическую форму и икосаэдрический тип симметрии. Снаружи есть суперкапсид. Кроме ДНК-полимеразы вирионы содержат протеинкиназу. Существует 3 типа вирионов: 1) Сферические частицы диаметром 40-47 нм с двойной оболочкой (частицы Дейна). 2) Сферические частицы диаметром в 20 нм, не содержат вирусных днк и не являются инфекционными. 3) Трубочки диаметром в 20 нм, содержат только липидную оболочку и антиген HBsAg
Культуральные свойства	Не культиви­руется на куриных эмбрионах, не облада­ет гемолитической и гемагглютинирующей активностью. ВГВ культивируется только в культуре клеток
Антигенная структура	Содержит 3 внутренних (HBeAg, HBcAG, HDsAg) и 1 поверхностный(HBsAg). Блюмбергом в 1964 году был обнаружен поверхностный антиген HBsAg в сыворотке крови аборигена, поэтому его назвали «австралийский» антиген. Он представляет собой гликопротеин с липидный компонентом и двумя полипептидными фрагментами. Один из них обеспечивает адсорбцию вируса на клетках печени, а другой обладает мутагенными свойствами. HBsAg существует в 3 вариантах:
Эпидемиология	Вирусный гепатит В-антропонозная инфекция. Источник инфекции-люди с острыми и хроническими формами гепатита и вирусоносители. Пути передачи- половой, контактно-бытовой, трансфузионный, вертикальный(во время беременности и родов. Механизм передачи-контактный. Группы риска-наркоманы, пациенты с переливанием крови, мед.работники, дети от больных гепатитом родителей. Вирус находится во всех биологических жидкостях. Входные ворота-поврежденная кожа, слизистые. Выдерживает многократное замораживание, кипячение. Губительное действие на возбудителя гепатита В оказывают перекись водорода, формалин, фенол
Патогенез	Инкубационный период: 30-180 дней. Вирусы появляются в крови за 2-8 недель до проявления клинических признаков и циркулируют в ней в течение всего острого периода, остаются в ней и при хронической форме и при выздоровлении. Периоды заболевания: 1) Инкубационный 2) Дожелтушный(головокружения, кровотечения из носа, тошнота, боли в суставах, лихорадка). 3) Желтушный(диспептический синдром, желтуха, зуд, высыпания. Моча становится темной, кал-бесцветный. Печень болезнена, увеличена.(1 месяц и более). Массовое разрушение гепатоцитов может вызвать кому. 4) Реконвалисцентный(состояние улучшается. Вирусы поражают гепатоциты, там происходит воспаление, потом цирроз печени, может возникнуть гепатокарцинома.
Иммунитет	Клеточный, пожизненный
Лечение и профилактика	Этиотропная терапия. ВАКЦИНЫ:генно-инженерные, инактивированные, депонированные, моно- и поли-вакцины. Эти вакцины получены методом генной инженерии: в геном дрожжевых клеток включён дрожжей ген субъединицы S, отвечающий за синтез HBs-антигена. Клетки синтезируют не вирион, а именно этот антиген. Потом иъ адсорбируют на гидроокиси алюминия-«ЭНДЖЕРИКС-В» В России вакцинацию проводят детям в первые 12ч после рождения, потом в 1 мес, 6 и 12 мес с последующей ревакцинацией в 7 лет. +люди, у который родственники больны гепатитом В а так же группы риска.
Диагностика	Материал исследования: кровь, биоптат печени. 1) Экспресс-диагностика 1.) Иммунохимические исследования: РНГА, ИФА,РИА-ищут вирусоспецифические антигены в крови. На разных стадиях заболевания и разных формах инфекции присутствуют разные антигены вируса.  Через 3-5 недель после заражения в сыворотке крови обнаруживают поверхностный HBsAg антиген- это указывает на острую или хроническую инфекцию. HBeAg-показатель активной репродукции вируса. HBsAg ищут с помощью реакции встречной иммунизации в геле: сыворотку крови больного вносят в периферические лунки агаровой пластинки, в центральную лунку вносят стандартную сыворотку анти- HBs, которую получили от переболевших гепатитом В. учет реакции ставят через 2-3 дня по появлению дуг преципитации между лунками. Помимо реакции встречной иммунизации в геле для выявления HBsAg используют РНГА. Для этого берут эритроцитарный антительный диагностикум(эритроциты, нагруженные гиперимунным анти- HBs-иммуноглобулином. Чувствительность этой рекции во много раз выше реакции иммунизации в геле. ИФА: на поверхности твердой фазы(полимера) адсорбируют анти- HBs-антитела из стандартной сыворотки. Используют лунки микротитрационных панелей. Во второ этапе в отмытые лунки вносят исследуемую сыворотку больного. При наличии HBs-антигена он связывается фикксированными на твердой фазе антителами. На третьем этапе добавляют анти- HBs-антитела, несущие ферментную метку в виде пероксидазы. Для выявления связанных антигеном меченых антител в отмытые лунки добавляют субстрат-пероксид водорода и хролюген, который при присутствии кислорода окрашивается в желто-коричневый цвет. По степени окраски оценивают интенсивность связывания меченых антител. Степень пропорциональная количеству HBs-антигена в исследуемой сыворотке. 2.) Молекулярно-биологические исследования: ПЦР и ДНК-зонды-ищут вирусные ДНК. 2) Серодиагностика. Ищут антитела с помощью РНГА, ИФА,РИА. Например, ищут антитела HBe. Для этого необходим соответствующий эритроцитный диагностикум(эритроциты, нагруженные стандартным HBe-антигеном. Реакцию ставят с парными сыворотками. В реакции ИФА на поверхности твердой фазы адсорбируютстандартный HBe-антиге, на втором этапе вносят сыворотку в десятикратных разведения, инкубируют, отмывают и добавляют меченую антиглобулиновую сыворотку.

ГЕПАТИТ D

Выделен в ядрах гепатоцитов у больных с хроническим гепатитом В.

Его называют «дельта-вирус», имеет сферическую форму диаметром 37-38 нм. РНК-содержащий вирус. Собственный капсид у него отсутствует и при формировании вириона он использует поверхностные белки от гепатита В.

Вирус гепатита Д встречается только у лиц, инфицированных вирусом гепатита В. их сочетание утяжеляет течение гепатита и провоцирует осложнения в виде дистрофии и цирроза печени.

Диагностика:

1) Экспресс-методы: ПЦР, ДНК-зонды.-ищут вирусную РНК.

2) ИФА, РИА. Ищут антитела в крови. В остром периоде заболевания антитела присутствуют в низком титре или в комплексе с антигеном, поэтому выявление не всегда удается.

ГЕПАТИТ С

Таксономия	Се­мейство: Flaviviridae Род Hepacivirus
Морфология	Вирус сферической форму, РНК-содержащий(9500-10000 нуктеотидов), окружен нуклеокапсидом. Тип симметрии- кубический. Липидный капсид с гликопротеиновыми шипами, содержазими гемаглтинины. Вирус имеет фермены: протеаза, геликаза. Вирус гепатита С очень изменчив, он легко «ускользает» от иммунной системы, что приводит к образованию «квази» штаммов. Выделяют 6 генотипов.
Диагностика	1) Серодиагностика –обнаруживают антитела с помощью ИФА. 2) ПЦР – ищут специфическую РНК.
Лечение и профилактика	Симптоматическое лечение, введение противовирусных средства, препараты интерферона. специфическая профилактика отсутствует.

 

 

ВИЧ-инфекция

Вирус иммунодефицита человека вызывает ВИЧ-инфекцию, заканчивающуюся развитием синдрома приобретенного иммунного дефицита.

Возбудитель ВИЧ-инфекции — лимфотропный вирус, относящийся к семейству Retroviridae роду Lentivirus.

Морфологические свойства: РНК-содержащий вирус. Вирусная частица сферической формы Оболочка состоит из двойного слоя липидов, пронизанного гликопротеинами. Липидная оболочка происходит из плазматической мембраны клетки хозяина, в которой репродуцируется вирус. Гликопротеиновая молекула состоит из 2 субъединиц, находящихся на поверхности вириона и пронизывающих его липидную оболочку.

Сердцевина вируса конусовидной формы, состоит из капсидных белков, ряда матриксных белков и белков протеазы. Геном образует две нити РНК, для осуществления процесса репродукции ВИЧ имеет обратную транскриптазу, или ревертазу.

Геном вируса состоит из 3 основных структурных генов и 7 регуляторных и функциональных генов. Функциональные гены выполняют регуляторные функции и обеспечивают осуществление процессов репродукции и участие вируса в инфекционном процессе.

Вирус поражает в основном Т- и В-лимфоциты, некоторые клетки моноцитарного ряда (макрофаги, лейкоциты), клетки нервной системы. Культуральные свойства: на культуре клеток Т-лимфоцитов и моноцитов человека (в присутствии ИЛ-2). Антигенная структура: 2 типа вируса — ВИЧ-1 и ВИЧ-2 ВИЧ-1, имеет более 10 генотипов (субтипов): А, В, С, D, E, F…, отличающихся между собой по аминокислотному составу белков.

ВИЧ-1 делят на 3 группы: М, N, О. Большинство изолятов относится к группе М, в которой выделяют 10 подтипов: А, В, С, D, F-l, F-2, G, Н, I, К. Устойчивость: Чувствителен к физическим и химическим факторам, гибнет в при нагревании. Вирус может длительно сохраняться в высушенном состоянии, в высохшей крови.

Факторы патогенности, патогенез: Вирус прикрепляется к лимфоциту, проникает в клетку и репродуцирует в лимфоците. В результате размножения ВИЧ в лимфоците последние разрушаются или теряют свои функциональные свойства. В результате размножения вируса в различных клетках происходит накопление его в органах и тканях, и он обнаруживается в крови, лимфе, слюне, моче, поте, каловых массах.

При ВИЧ-инфекции снижается число Т-4-лимфоцитов, нарушается функция В-лимфоцитов, подавляется функция естественных киллеров и ответ на антигены снижается и нарушается продукция комплемента, лимфокинов и других факторов, регулирующих иммунные функции (ИЛ), в результате чего наступает дисфункция иммунной системы.

Клиника: поражается дыхательная система (пневмония, бронхиты); ЦНС (абсцессы, менингиты); ЖКТ (диареи), возникают злокачественные новообразования (опухоли внутренних органов).

ВИЧ-инфекция протекает в несколько стадий: 1) инкубационный период, составляющий в среднем 2—4 недели; 2) стадия первичных проявлений, характеризующаяся вначале острой лихорадкой, диареей; завершается стадия бессимптомной фазой и персистенцией вируса, восстановлением самочувствия, однако в крови определяются ВИЧ-антитела, 3) стадия вторичных заболеваний, проявляющихся поражением дыхательной, нервной системы. Завешается ВИЧ-инфекция последней, 4-й терминальной стадией- СПИДом.