Тема 8: «Сбор, хранение и транспортировка материала для микробиологических исследований»

Тема 8: «Сбор, хранение и транспортировка материала для микробиологических исследований»

Студент должен знать:

- меры предосторожности при обращении с биологическим материалом

-правила сбора, хранения, транспортировки биоматериала в микробиологическую лабораторию

Студент должен уметь:

-демонстрировать умения по сбору, хранению, транспортировке биологического материала для микробиологических исследований

-оформлять направления на различные виды микробиологических исследований

План изучения нового материала:

1.Значение своевременного и адекватного взятия материала для микробиологических исследований.

2.Посуда, инструменты и химические реагенты, используемые для сбора материала, их перечень, подготовка к работе, утилизация.

3.  Меры предосторожности при сборе и транспортировке исследуемого материала. Предохранение от контаминации исследуемого материала нормальной микрофлорой.

4. Оформление сопровождающих документов.

 5. Правила взятия, сроки, температурные и другие условия транспортировки материала для бактериологических, микологических, паразитологических и вирусологических исследований, поддерживающие жизнедеятельность возбудителя, предотвращающие избыточный рост сопутствующий микрофлоры и обеспечивающие безопасность людей и окружающей среды. Количество отбираемого материала.

 

«Нет ничего более важного для эффективной деятельности лаборатории, чем качественный образец биологического материала, собранный и транспортированный в соответствии с современными требованиями. Если получение качественных проб не является приоритетом, лаборатория не может способствовать правильному и своевременному диагнозу, и поэтому ее роль в оказании помощи пациенту становится незначительной».

J. Michael Miller. A guide to Specimen Management in Clinical Microbiology. Washington: ASM Press; 1996.

Этапы лабораторного исследования:

1.Преаналитический – это этап подготовки пациента к исследованию, забор биологического материала.

2.Аналитический – это проведение исследований с помощью классических методов исследования (микроскопический, серологический, культуральный, аллергологический) и современных методов (ИФА, ПЦР и другие).

3.Постаналитический – это интерпретация полученных результатов.

Основные регламентирующие нормативы сбора, хранения и транспортировки биоматериала пациента на микробиологические исследования:

МУ 4.2.2039-05 Техника сбора и транспортирования биоматериалов в микробиологические лаборатории.

Приказ МЗ и МП РФ от 19 января 1995 г. № 8 «О развитии и совершенствовании деятельности лабораторий клинической микробиологии (бактериологии) лечебно-профилактических учреждений».

МУК 4.2.735—99 «Паразитологические методы лабораторной диагностики гельминтозов и протозоозов».

Каждую пробу, собранную в жидкую среду, тщательно перемешивают со средой.

 

 

Оформление сопровождающих документов

• наименование, источник и метод получения биологического материала, дату и время взятия, цель и метод исследования;

• ФИО, пол и возраст больного;

 • название учреждения, отделения, номер палаты, номер истории болезни (амбулаторной карты);

• предполагаемый диагноз инфекционной патологии и предшествующую антибактериальную и/или иммунотерапию;

• ФИО и подпись врача, направившего материал для бактериологического исследования;

• при направлении биоматериалов, полученных при вскрытии, указывают отделение, в котором умер больной.

Образец направлений

 

Особенности взятия, условия транспортировки материала для бактериологических, микологических, паразитологических и вирусологических исследований, поддерживающие жизнедеятельность возбудителя, предотвращающие избыточный рост сопутствующий микрофлоры и обеспечивающие безопасность людей и окружающей среды. Количество отбираемого материала.

1.Сбор крови для посева при выделении гемокультур. Применяется при остром сепсисе, менингите, остеомиелите, артрите, острых нелеченных бактериальных пневмониях и пиелонефрите.

Собирают 2 пробы из двух сосудов в течение 1-2 ч подъема температуры тела. Сбор проб крови для посева производят 2 человека у постели больного или в процедурной:

-участок кожи обработать 70 % спиртом дважды, круговыми движениями, начиная от центра;

- при работе с флаконами с двойной средой: стерильным шприцем собрать у взрослых 10 мл крови, у детей - 5 мл; продезинфицировать пробку флакона спиртом; внести кровь во флакон из шприца, предварительно сняв иглу; обжечь горлышко и пробку флакона в пламени спиртовки, закрыть флакон пробкой; осторожно, чтобы не замочить пробку флакона, перемешать его содержимое круговыми движениями.

- при использовании готовых флаконов со средой и реагентами, нейтрализующими антибиотики и разрушающими форменные элементы крови, или без них, разрешенными к применению для этих целей в Российской Федерации в установленном порядке, у взрослых получают 10-30 мл крови, у детей - 0,5-3,0 мл.

2.Сбор ликвора. Применяется при подозрении на менингит.

Сбор ликвора производится в положении пациента «лежа на боку», из субарохноидального пространства между позвонками поясничными позвонками L3-L4, L4-L5 или пояснично-крестовыми L5-S1 в количестве 4,0-5,5 мл. Сбор проб проводят медленным заполнением трех пробирок тремя порциями материала. Используют стерильные пробирки с плотно закрывающимися крышками (одноразовые с пробкой или стеклянные со стерильной резиновой пробкой).

Из трех пробирок с материалом, полученным при люмбальной пункции, всегда отправляют пробирку с самым мутным содержимым, как правило, это вторая пробирка в процессе сбора пробы.

Ликвор для микробиологического исследования немедленно отправляют в лабораторию на грелке для сохранения температуры 35-37 °С. При отсутствии такой возможности ликвор собирают в емкость с транспортировочной средой и оставляют в холодильнике (при температуре 4-8 °С) до утра, а затем доставляют в лабораторию.

3.Сбор материала при инфекционных конъюктивитах, вызванных гноеродными кокками, вирусами и хламидиями. Большинство проб, получаемых из глаза, собирает врач-офтальмолог.

Отделяемое собирают стерильной стеклянной палочкой или стерильным зондом-тампоном: двумя-тремя движениями проводят по слизистой оболочке нижней переходной складки, с края век; при язве - с роговицы (после обезболивания), при "уголковом конъюнктивите" - с уголков век.

Пробы из каждого глаза собирают отдельными тампонами двумя-тремя круговыми движениями по слизистой.

Материал, взятый палочкой и/или зондом-тампоном, помещают в емкость с транспортировочной средой или в стерильную стеклянную пробирку с жидкой средой. доставляют в лабораторию. Тубсеры с мазками из каждого глаза маркируют соответственно "правый" и "левый" и немедленно отправляют в лабораторию.

Сбор кала на дисбактериоз.

За 3-4 дня до исследования отменить прием слабительных препаратов, касторового и вазелинового масла и прекратить введение ректальных свечей. Кал, полученный после клизмы, а так же после прием бария (при рентгеновском обследовании) для исследования непригоден.

До сбора анализа помочитесь в унитаз, далее путем естественной дефекации в подкладное судно соберите испражнения (следить, чтобы не попала моча). Подкладное судно предварительно обрабатывается любым дезинфицирующим средством, тщательно промывается проточной водой несколько раз и ополаскивается кипятком.

Кал собирается в чистый, одноразовый контейнер с завинчивающейся крышкой и ложечкой или другую стерильную посуду, полученную накануне в лаборатории, где будет проводиться анализ кала на дисбактериоз.

Материал доставляется в лабораторию в течение 2 часов с момента сбора анализа.

Сбор проб из влагалища.

Материал для анализа получают до проведения мануального исследования.

Для сбора пробы используют 2 стерильных зонда-тампона или тубсера. Материал собирают со слизистой заднего свода или с ее патологически измененных участков. Зонд-тампон помещают в стерильную пробирку (тубсер) для доставки в лабораторию. Вторым стерильным зондом-тампоном (тубсером) собирают пробу и готовят мазки на чистом обезжиренном стекле для исключения или подтверждения наличия бактериального вагинита.

Мазки высушивают на воздухе и, поместив в стерильные чашки Петри, доставляют в лабораторию.

14. Сбор проб из цервикального канала. Следует иметь в виду, что из проб цервикального канала, как правило, выделяется существенно меньший спектр микроорганизмов, чем из влагалища, что является следствием различий в составе эпителия и рН этих экониш.

После обнажения шейки матки в зеркалах тщательно очищают шейку от секретов вагины и слизи с помощью ватного тампона, смоченного стерильным физиологическим раствором или стерильной водой. После этого щеточку (стерильный зонд-тампон, зонд-тампон тубсера или зонд-тампон транспортного коллектора со средой) осторожно вводят в цервикальный канал на глубину 1,0—1,5 см, не касаясь стенок влагалища. Вращая любой из перечисленных выше инструментов несколько раз вокруг оси, захватывают материал – клетки, экссудат – по периметру цервикального канала. Переносят материал в стерильные одноразовую или стеклянную пробирки и доставляют в лабораторию.

Для определения наличия гонококков необходимо собрать материал на 3 тампона: из цервикального канала, уретры, ануса. Наилучшие условия для сохранения гонококков с целью их последующего высева обеспечивает использование специальных транспортировочных пробирок со средами с активированным углем (обеспечивают переживание гонококков до 48 ч и более ). Отдельную пробу собирают для определения наличия хламидий: готовят мазки на предметном стекле; материал, собранный зондом-тампоном, помещают в емкости с транспортировочной средой для хламидий.

Сбор пробы из уретры.

Собирают материал через 1 или 2 ч после освобождения мочевого пузыря – мочеиспускания.

Стимулируют образование отделяемого легким массажем уретры через влагалище.

Собирают образовавшееся отделяемое стерильным зондом-тампоном

16. Сбор проб фекалий с помощью ректального тампона. Пробу, собранную с помощью ректального тампона, используют преимущественно для объективизации диагноза и выделения возбудителя гонореи, герпеса, дизентерии и анального носительства пиогенного стрептококка..

Вводят кончик стерильного зонда-тампона на 2,5—3,0 см за анальный сфинктер.

Осторожно вращая тампон вокруг оси, собирают материал с крипт ануса и так же осторожно извлекают тампон.

Помещают тампон в стерильную одноразовую пробирку (тубсер) или в транспортировочную емкость с агаризованной средой без угля или в стерильную стеклянную пробирку; используют транспортировочные емкости со средами для сохранения вирусов или стерильную пробирку с забуференным физиологическим раствором с глицерином.

Передают материал в лабораторию.

Сбор кала.

Кал собирается после естественной дефекации из судна (горшка) при помощи ложечки стерильного контейнера. При наличии в испражнениях патологических примесей: слизь, кровь, хлопья, гной – включают их в отбираемую пробу.

Если фекалии жидкие, контейнер заполняют не более чем на 1/3 объема для предохранения от разбрызгивания материала при вскрытии емкости в лаборатории. Если фекалии оформленные, плотные – помещают в контейнер 3—4 ложечки (1,5—2,0 г).

Пробы фекалий, в зависимости от наличия клинических симптомов, направляют в лабораторию на одно из исследований, перечисленных ниже.

 «На облигатные кишечные патогены » (на «дизгруппу») – проводят с целью обнаружения общепринятых патогенов: сальмонелл, шигелл, иерсиний, энтеропатогенных, токсигенных и геморрагических E. сoli. При этом, материал собирают и направляют в лабораторию на тампоне, вмонтированном в стерильную одноразовую или стеклянную пробирку с забуференным физиологическим раствором с глицерином, или на тубсерах, помещенных в специальные среды с активированным углем или без него.

 «На флору» – проводят с целью выделения как патогенных, так и условно-патогенных микроорганизмов, включая бифидо- и лактобактерии, качественным методом. При этом, материал собирают и доставляют в лабораторию в специальных одноразовых стерильных контейнерах с ложечкой или специально смонтированных стерильных стеклянных емкостях.

 «На простейшие» – проводят с целью выявления цист и вегетативных форм простейших, способных вызвать поражение слизистых желудочно-кишечного тракта (Giardia lamblia, Entamoeba hystolitica, Criptosporidium parvum, Balantidium coli, Iodamoela butschilii, Cyclospra spp.) Доставка в лабораторию в теплом виде в течении 20 минут.

 «На вирусы» – предусматривает определение энтеропатогенных вирусов (ротавирусы, энтеровирусы, коронавирусы).

18.. Сбор проб со слизистой ротовой полости проводят утром натощак до приема пищи после утреннего туалета, при котором необходимо почистить зубы пастой без бактерицидных или бактериостатических добавок (фтор, дезинфицирующий набор трав), затем прополоскать рот теплой кипяченой водой.

Сухим стерильным зондом-тампоном, извлеченным из стерильной одноразовой (тубсера) или стеклянной пробирки, тщательно и достаточно жестко обтирают слизистые щек, языка, основания языка, десен, зонд-тампон помещают в пробирку и отправляют в лабораторию. Можно использовать зонд-тампон из транспортировочных емкостей со средами с активированным углем или без него, особенно, если нельзя срочно доставить пробу в лабораторию.

Тема 8: «Сбор, хранение и транспортировка материала для микробиологических исследований»

Студент должен знать:

- меры предосторожности при обращении с биологическим материалом

-правила сбора, хранения, транспортировки биоматериала в микробиологическую лабораторию

Студент должен уметь:

-демонстрировать умения по сбору, хранению, транспортировке биологического материала для микробиологических исследований

-оформлять направления на различные виды микробиологических исследований

План изучения нового материала:

1.Значение своевременного и адекватного взятия материала для микробиологических исследований.

2.Посуда, инструменты и химические реагенты, используемые для сбора материала, их перечень, подготовка к работе, утилизация.

3.  Меры предосторожности при сборе и транспортировке исследуемого материала. Предохранение от контаминации исследуемого материала нормальной микрофлорой.

4. Оформление сопровождающих документов.

 5. Правила взятия, сроки, температурные и другие условия транспортировки материала для бактериологических, микологических, паразитологических и вирусологических исследований, поддерживающие жизнедеятельность возбудителя, предотвращающие избыточный рост сопутствующий микрофлоры и обеспечивающие безопасность людей и окружающей среды. Количество отбираемого материала.

 

«Нет ничего более важного для эффективной деятельности лаборатории, чем качественный образец биологического материала, собранный и транспортированный в соответствии с современными требованиями. Если получение качественных проб не является приоритетом, лаборатория не может способствовать правильному и своевременному диагнозу, и поэтому ее роль в оказании помощи пациенту становится незначительной».

J. Michael Miller. A guide to Specimen Management in Clinical Microbiology. Washington: ASM Press; 1996.

Этапы лабораторного исследования:

1.Преаналитический – это этап подготовки пациента к исследованию, забор биологического материала.

2.Аналитический – это проведение исследований с помощью классических методов исследования (микроскопический, серологический, культуральный, аллергологический) и современных методов (ИФА, ПЦР и другие).

3.Постаналитический – это интерпретация полученных результатов.

Основные регламентирующие нормативы сбора, хранения и транспортировки биоматериала пациента на микробиологические исследования: