Методы диагностики грибковых заболеваний

ГРИБКОВЫЕ ЗАБОЛЕВАНИЯ КОЖИ

Учебное пособие

под редакцией профессора С.И. Данилова

 

 

Санкт-Петербург 2005

УДК 616.511: 616-002.828 (-052.63) (06)

Грибковые заболевания кожи. Учебное пособие под ред. проф. СИ. Данилова СПбГМА им. И.И. Мечникова - СПб: 2005. С. 124

В учебном пособии изложен материал по эпидемиологии, этиологии и клиническому течению грибковых заболеваний кожи. Особое внимание уделено характеристике грибов, источникам инфекции и патогенезу развития дерматофитий. В пособии рассмотрены вопросы лабораторной диагностики и современных методов лечения.

Пособие предназначено для студентов медицинских вузов.

Учебное пособие составили сотрудники кафедры дерматовенерологии СПбГМА им. И.И. Мечникова: проф. Данилов С.И.; доценты — Пирятинская В.А., Грибанова Т.В., Смирнова О.Н., Клю-чарева С.В.; Ассистенты - Лалаева А.М., Карякина Л.А., Тернов-ская О.А., Гусева С.Н., Пирятинская А.Б., Петунова Я.Г., Смирнова И.О., Нечаева О.С., Белова Е.А.; доцент кафедры микробиологии Васильев О.Д.

Рецензенты:

Соколовский Е.В., доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой дерматовенерологии с клиникой Санкт-Петербургского государственного медицинского Университета им. И.П. Павлова.

Барбинов В.В., доктор медицинских наук, профессор, заместитель начальника кафедры кожных и венерических болезней Военно-медицинской академии.

Рекомендовано в качестве учебного пособия Ученым Советом СПбГМА им. И.И. Мечникова

© СПбГМА им. И.И. Мечникова, 2005 г

© Кафедра дерматовенерологии, 2005 г

ВВЕДЕНИЕ

 

Актуальность проблемы

Дерматомикозы (грибковые заболевания) составляют большую группу заболеваний кожного покрова и слизистых оболочек, вызываемых внедрением и жизнедеятельностью растительных микроорганизмов - грибов.

Дерматомикозы представляют большой интерес в силу разнообразия не только возбудителей и вызываемой ими клинической картины, но, главным образом, своей склонностью к распространению, обусловленной высокой контагиозностью возбудителей. Грибы принадлежат к классу низших растений, лишенных хлорофилла и не способных ассимилировать углекислоту. Они широко распространены в природе, что объясняется условиями существования их в качестве паразитов, условно-патогенных грибов и сапрофитов. Грибы отнесены к отдельному царству Fungi, или Myceta (грибы), одному из 5 царств эукарион. К царству Fungi относят 4 отдела:

1) Chitridiomyceta, насчитывающий 800 видов, которые не вызывают микозы;

2) Zygomyceta имеют около 1000 видов, которые вызывают му-короз и эндомофтороз;

3) Отдел Ascomymyceta включает 32 тысячи видов, имеющих половую (репродуктивную) стадию жизненного цикла и около 14 тысяч вегетативную (внеполовую) стадию. Гифы аскомицетов имеют двухслойную клеточную оболочку, перегородки, половая стадия представлена аском (мешок или сумка), наполненным спорами. Аскомицеты являются возбудителями большинства микозов;

4) отдел Basidomyceta (базидомицеты) насчитывают около 15 тысяч видов. Имеют половую стадию размножения (споры) и вегетативную. Базидомицеты являются возбудителями криптококкоза, разноцветного лишая и других Malassezia-инфекций, белой пьедры и трихоспонороза.

Под именем дерматомицетов или дерматофитов (от греческих слов derma - кожа, mykes - гриб, phyton - растение) особое место занимают патогенные грибы, принадлежащие к низшим грибам - гифомицетам - нитчатым грибам, характеризующимся ните и спорообразованием; значительная часть дерматомицетов относится к классу Ascomycetes. Общей характерной чертой для дерматомицетов является паразитирование их в коже или ее придатках - волосах, ногтях. Источником заражения грибковыми заболеваниями служат больной человек, а также больные животные. Заражение происходит как путем непосредственного контакта с больными, так и через предметы, находившиеся в соприкосновении с ними и зараженные грибами.

Попадая в организм человека или животного с волосами и чешуйками во внешнюю среду, грибы могут проявлять свою жизнедеятельность и вирулентность в течение длительного времени, продолжающегося годами.

Попадание гриба на поверхность кожного покрова приводит к внедрению его в роговой слой. Последнее облегчается при наличии мацерации и микротравмы, а также тем обстоятельством, что роговой слой представляет собой не только благоприятную питательную среду, но и оптимальную среду для паразитарных грибов. Некоторые виды грибов ограничивают свое местопребывание в коже исключительно роговым слоем. Другие же грибы, как например, микроспорум и трихофиты, поражают также и придатки кожи - волосяные фолликулы, волосы и ногти.

По месту локализации внедрившихся грибов и по степени воспалительной реакции различают поверхностные и глубокие (подкожные) дерматомикозы.

Патогенное воздействие грибов не ограничивается исключительно кожным покровом с его придатками. Черногубовым Н.А. и Пелевиной И.О. описаны случаи универсального поражения кожи и желудочно-кишечного тракта грибковой этиологии. Подавляющее большинство грибковых заболеваний обладают высокой степенью заразительности. В эпидемиологическом отношении особое значение имеют трихофития, микроспория, фавус, микозы стоп и кистей, генерализованный микоз и онихомикозы. Наклонность дерматомикозов к широкому распространению, особенно среди детей, делают проблему борьбы с дерматомикозами особенно актуальной.

Возросло значение микозов как внутрибольничной инфекции. Особенно значительна роль микозов в трансплантологии, онкоге-матологии, неонатологии. Например, Candida spp. Вытесняют внугрибольничных возбудителей-бактерий. Группа микозов прочно занимает место в структуре ВИЧ-ассоциированной патологии. Возрастающая значимость микозов заставляет совершенствовать методики их диагностики, лечения, в зависимости от возбудителей и форм инфекции.

1. Краткие исторические сведения о грибковых заболеваниях

 

Грибковые заболевания были известны человечеству очень давно. Академик О.Н. Подвысоцкая различала 3 периода в истории наших знаний о грибковых заболеваниях.

Первый период, так называемый описательный, начинается с глубокой древности (Гиппократ, Цельс) до середины XIX века. Начало изучения микозов в медицине относится к античной эпохе. Молочница была описана Гиппократом и Галеном, фавус (парша) и инфильтративно-нагноительная трихофития - Цельсом, а современное название дерматофитий (tinea) появилось в древнем Риме, когда были открыты первые возбудители грибковых заболеваний. В 1842 г. был описан возбудитель поверхностной трихофитии и микроспории. В 1846 г. - возбудитель разноцветного лишая.

Второй период в истории грибковых заболеваний простирается с половины до конца XIX века, чему способствовало изобретение микроскопа, развитие ботаники, а затем микологии. В этот период были открыты новые виды грибов: в 1839г. - гриб возбудитель фавуса, в 1842г. - поверхностной трихофитии и микроспории, в 1846 г. - возбудители разноцветного лишая, актиномикозы (1892) и бластомикозы (1894). Изучалась и описывалась вызываемая ими клиническая картина, производились поиски наиболее пригодных для роста грибов питательных сред, чем было положено начало изучения возбудителей гриба всех заболеваний в культурах (1899 г., Сабуро). На рубеже XIX-XX вв. были описаны почти все основные микозы человека и их возбудителей. Русский ученый Верюжский один из первых на основании многочисленных посевов грибов на питательных средах доказал, что грибковые заболевания вызываются различными грибами. Труды Верюжского имели исключительное значение для решения вопроса об этиологии грибковых заболеваний и для полного разгрома унитарной теории.

Третий период простирается с конца XIX столетия до настоящего времени. В этот период обращают на себя внимание работы по изучению токсинов грибов и иммунитета, а также серология грибковых заболеваний, вопросы их лечения, изучение которых привело к расширению арсенала лечебных средств.

Ведущее место в этот период заняла наша отечественная дерматология, представленная такими учеными как Павлов С.Т., Поспелов А.И., Никольский Н.В., Фридман Е.Ф., Богров С.Л., Черногу-бов Н.А., Картамышев А.И., Боголепов А.А., Подвысоцкая О.Н., Аравийский А.Н., Чубарова А.С., Ариевич A.M., Кашкин П.Н. и др.

Морфология грибов

Грибы являются растительными организмами. Наряду с водорослями они относятся к низшим растениям и отличаются от последних тем, что не содержат хлорофилла и не ассимилируют углерода.

Возбудители патогенных грибов (они изучены под микроскопом) состоят из нитей различной длины и толщины, называемых гифами. Иногда они переплетаются между собой наподобие войлока. Сплетение нитей, или гиф, составляет вегетативное тело гриба и называется мицелием или грибницей. Нити мицелия могут разделяться поперечными перегородками на отдельные членики (клетки), как это наблюдается, например, у грибов - возбудителей трихофитии, в этом случае мицелий называют септированным. В других случаях поперечные перегородки могут отсутствовать -тогда нить мицелия представляется в виде одной разветвляющейся и разросшейся клетки, напоминающей собой полую трубку.

Нити мицелия имеют оболочку, которая состоит из целлюлозы, фунгина, хитиноподобного и кислотоупорного вещества. В оболочке мицелиальной нити заключена грибная протоплазма, состоящая из органических и неорганических веществ. В протоплазме имеются вакуоли и различные включения: жир, гликоген, пигмент, фиброзные образования, кристаллоиды и смолистые вещества. В протоплазме грибов заключены клеточные ядра в виде маленьких округлых образований неодинаковой величины, в которых наблюдаются явления митоза и прямого деления путем перешнуровки ядра. Химический состав грибов отличается большим разнообразием. Сюда входят органические соединения - углеводы, белки, жиры, растительные кислоты (щавелевая, лимонная, уксусная, муравьиная и др.), ароматические соединения, эфирные масла, алкалоиды (муска-рин, эрготин и пр.), глюкозиды, а также неорганические соединения - соли натрия, калия, фосфора, железа, серы и др. Кроме того, в вегетативных телах грибов нередко находятся пигментные вещества сложного химического состава, придающие колониям грибов фиолетовую, красную, золотисто-желтую и другую окраску. Для биохимической активности грибов характерна их способность выделять ферменты, расщепляющие белки и жиры, углеводы.

В зависимости от условий внешней среды, в частности питания, мицелий грибов может иметь разнообразную форму. В одних случаях на протяжении нитей мицелия образуются перетяжки, что делает их похожими на стебли тростника. У некоторых грибов окончания мицелия бывают в виде коротких и толстых ответвлений и напоминают собой канделябры или же образуют переплетения, имеющие сходство с рогами северного оленя. Указанные формы мицелия обнаруживаются, главным образом, в чистых культурах. Мицелий, обнаруживаемый в патогенном материале, представляется более однообразным. В лабораторной диагностике помимо обнаружения мицелия важными являются споры, которые, по определению акад. О.Н. Под-высоцкой и проф. П.Н. Кашкина, представляют собой «комочки сгущенной протоплазмы, заключенные в более плотную и резко конту-рированную, иногда двойную оболочку», т.е. морфологически споры являются образованиями, возникшими в нитях мицелия и отделившимися от них, - это клетки воспроизведения грибов, которые являются в то же время одной из стадий существования грибов и поддержания их биологического рода.

Размножение патогенных грибов происходит посредством спор, которые, будучи более устойчивыми, чем мицелиальные нити, образуются, главным образом, при неблагоприятных условиях для развития жизни грибов. Даже по истечении длительного срока споры, попав в благоприятные условия, могут прорастать и образовывать новый мицелий.

Возбудители грибковых заболеваний; представляют собой организмы, находящиеся в постоянном и тесном общении с внешней средой, ассимилируют вещества, необходимые для их жизни. К числу последних в первую очередь относятся углерод, азот, минеральные соли.

Большое значение для роста и жизнедеятельности грибов имеют белки и углеводы. Размножение углеводов обеспечивает потребность грибов в углероде. Из углеродов наиболее легко усваиваются грибами глюкоза, мальтоза, левулеза и др. Азот грибы усваивают из пептонов и аминокислот, а также из солей аммония. Из неорганических веществ для питания грибов необходимы соли калия, железа, марганца, фосфора и др.

Усвоение питательных веществ грибами связано с их ферментативной деятельностью. Большинство патогенных грибов способно вырабатывать ферменты, разрушающие тканевые элементы. Из них особое значение имеют протеолитические ферменты, в частности, диастаза, переводящая белки в пептоны, также липаза, эмульгирующая и омыляющая жиры. Липаза играет также существенную роль в патогенезе развития дерматомикозов, растворяя кожный жир и облегчая проникновение грибов в кожу. Реакция среды также имеет значение для роста и развития грибов. Еще Верюжский в своих работах показал, что колонии грибов лучше всего растут при слабокислой реакции среды. Однако границы кислотности среды, в которой могут расти грибы, колеблются в довольно широких пределах. Жизненный цикл грибов состоит из двух фаз или стадий: половой (репродуктивной) и бесполой (вегетативной). Половая стадия жизненного цикла грибов называется телеоморфой, бесполая - анамор-фой. Другим вариантом роста является почкование, когда происходит отделение дочерней клетки от материнской. В репродуктивной фазе тело гриба имеет сложное строение и состоит из дифференцированных клеток, имеющих специальные репродуктивные органы. Среди них выделяют структуры переживания, позволяющие переносить неблагополучные условия. Грибы размножаются при помощи спор. Споры образуются в результате простого митоза и мейоза. В первом случае тип спорообразования и стадия развития гриба называются бесполыми, а сами бесполые споры - конидиями. Во втором случае тип размножения называется половым, а само имя «споры» чаще применяется именно к половым спорам. Для многих плесневых грибов характерно наличие особых органов конидиогенеза (бесполого размножения). Отпочковывающиеся дочерние клетки дрожжевых грибов называют бластоконидиями.

Устойчивость грибов

Можно считать, что температурные границы роста грибов колеблются между 15° и 50° выше нуля. Наиболее благоприятной температурой для роста грибов является температура 25-30° выше нуля.

По данным A.M. Ариевича, П.Н. Кашкина и др. авторов солнечный свет задерживает рост дерматофитов, так ежедневное в течение одного часа освещение грибов солнцем ведет к гибели грибов, как в культурах, так и в патологическом материале.

Резистентность дерматомицетов в отношении химических веществ довольно высока. Известно, что после 10-минутного воздействия формалина (2%), двууглекислой соды (10%), карболовой кислоты (2,5 %), при воздействии в течение нескольких секунд раствором хлорной извести (0,5 %) наблюдается гибель грибов. Столь же эффективное действие оказывает настойка йода (10%), анилиновые краски - фукорцин, метил-виолет, бриллиантовая зелень (1-2 %), салициловая и бензойная кислота (1 %).

В патологическом материале, особенно в волосах, грибы могут сохранять свою жизнеспособность в течение длительного времени. Академик О.Н. Подвысоцкая указывает, что грибы в волосах сохраняют свои патологические свойства в течение одного года, а в ногтевых пластинках и чешуйках - от 4 недель до полугода. Встречаются отдельные указания на жизнеспособность патогенных грибов в течение 3-8 лет (Иткин, Малышев).

Как показывают исследования, жизнеспособность грибов объясняется наличием спор, устойчивых к внешним воздействиям, в то время как мицелии оказывается погибшим. Эта устойчивость спор в патологическом материале является чрезвычайно важным ' эпидемиологическим фактором. Существующее деление грибов на сапрофитов и условно-патогенных грибов представляется крайне условным. Поэтому следует выделить важные патогенетические факторы, способствующие переходу этих грибов в патогенное или, можно сказать, паразитарное состояние:

а) гипоавитаминозы,

б) эндокринопатии, особенно сахарный диабет,

в) дисбактериоз и другие заболевания желудочно-кишечного тракта,

г) состояние иммунодефицита, в частности ВИЧ-инфекция.

Дерматофитозы

Микозы кожи, вызванные мицелиальными и дрожжеподобными грибами, называются дерматомикозы.

Микозы ногтей, вызванные мицелиальными и дрожжеподобными грибами, называются онихомикозы.

Микозы кожи и её кератин-содержащих придатков, вызванные дерматофитами, называются дерматофитозы или дерматофитии

Дерматомикозы и онихомикозы, кроме дерматофитов, могут быть вызваны следующими грибами:

• Дерматомикозы

1. Candida spp.

2. Fusarium moniliforme

3. Trichosporon beigelii

4. Hendersonula toruloidea

• Онихомикозы

1. Scopulariopsis brevicaulis

2. Acremonium sp.

3. Aspergillus flavus, A. fumigatus, A. glaucus, A. teereus, A. versicolor

4. Fusarium oxysporum

5. Geotrichum candidum

6. Candida albicans

7. Hendersonula toruloidea

8. Cephalosporium sp.

Дерматофитозы (английские синонимы «tinea» или «ringworm») - это наиболее распространенные поверхностные микозы человека и животных, при которых поражаются кератиновые ткани кожи, волосы и ногти. Они вызываются группой родственных мицелиаль-ных кератинофильных грибов, имеющих общее название «дермато-фиты» и способных использовать кератин в качестве источника питания. К этой группе относят около 100 грибов, большинство из которых является почвенными кератинофильными грибами, но только 42 вида признано достоверно существующими и действительно связаны с микозами человека. Из них 11 видов наиболее распространены как возбудители дерматофитозов. Предполагается, что в процессе эволюции почвенные грибы адаптировались к определенным хозяевам и постепенно сформировали существующие группы антропо, зоо- и геофильных дерматофитов.

Несовершенные формы дерматофитов подразделяются на 3 рода:

1. Род Epidermophyton - продуцирует только макроконидии при отсутствии микроконидий. Включает 2 вида, один из которых патогенен для человека.

2. Род Microsporam - продуцирует микроконидии и шорехова-тые макроконидии. Описано 19 видов, из которых 9 вызывают инфекции людей и животных.

3. Род Trichophyton - продуцирует гладкостенные макроконидии и микроконидии. Включает 22 вида, преимущественно вызывающих инфекции человека и животных. Совершенные формы относят к роду Arthroderma гимноасковых.

Около 60% всех выделенных от людей видов составляет Т. rubrum, около 25 % Т. mentagrophytes, около 10 % - Т. verruco-sum и Т. tonsurans. Все остальные виды: Е. fioccosum, M. andonini, М. canis и другие - вызывает 1 %-5 % всех дерматофитозов.

Дерматофитозы

Источники инфекции и эпидемиология

Дерматофиты - единственная группа реально контагиозных грибов, т.е. способных передаваться от одних живых источников (люди, животные) к другим.

Превалирующие виды дерматофитов, вызывающие микозы кожи, различаются на различных территориях.

По естественному резервуару обитания и источнику инфекции для людей дерматофиты подразделяются на:

1. антропофильные, которые встречаются почти исключительно у людей, вызывают преимущественно мягкие, хронические инфекции;

2. зоофильные характерны для домашних и диких животных и птиц. У людей вызывают островоспалительные и быстро заканчивающиеся инфекции;

3. геофильные дерматофиты, имеющие своим резервуаром почву, вызывают островоспалительные ограниченные инфекции, как правило, спонтанно излечивающиеся.

Таблица 1

Патогенез дерматофитозов

Дерматофиты колонизируют кератиновые ткани и в ответ на их клетки и метаболиты возникает воспалительная реакция организма на уровне кожи. Поражения являются преимущественно кожными вследствие неспособности дерматофитов инвазировать глубокие ткани и органы. Лишь в редких случаях вовлекаются подкожные ткани (керион, гранулёма Майокки) или возникает генерализованная системная инфекция, вызванная дерматофитами.

In vitro дерматофиты повреждают кератин сочетанием ферментативного переваривания протеиназами (кератиназами) и механического давления.

In vivo их активность проявляется в зоне дифференциации на вновь синтезированном кератине. В течение инкубационного периода гифы прорастают в stratum corneum кожи и затем в волосяной фолликул и в стержень волоса, поражая новые фолликулы.

Для поддержания инфекции рост гриба координируется со скоростью продукции кератина. Инфекционный процесс останавливается и излечение начинается, когда вновь синтезирующийся здоровый кератин удаляет гифы гриба из кератинизированной зоны.

Виды рода Trichoplyton поражают кожу, волосы и ногти.

Виды рода Microsporum поражают волосы, кожу и очень редко ногти.

Виды Epidermophyton поражают кожу и ногти, но не волосы.

Предрасполагают к инфекции: наследственные факторы, нарушения микроциркуляции, повышенная температура, влажность.

Заболевания начинаются с локального воспаления в месте первичного внедрения гриба. Воспалительные изменения наиболее выражены на периферической границе очагов.

Клинические проявления заболеваний классифицируются в зависимости от анатомической локализации.

Ниже мы приводим таблицу (Табл. 2).

Таблица 2

КАНДИДОЗ

Синонимы: Кандидамикоз, соормикоз, поверхностный бластомикоз.

Грибковое заболевание кожи, слизистых оболочек и внутренних органов, вызываемое грибами рода кандида. Заболевание было известно врачам еще в древности (stomata aphtoides, aphta infantis). Впервые описано Б. Лангенбеком в 1839 г., грибы в тканях обнаружил в 1843 г. Berg, а в 1923 г. Berkhout выделил среди дрожжеподоб-ных организмов род Candida. Заболевание встречается во всех странах мира, но наиболее распространено в тропиках и субтропиках.

Этиология

Возбудители: Candida albicans, реже другие виды - Candida tropicalis, Candida pseudotropicalis и др. В роду Candida описано более 100 видов грибов.

Грибы этого рода относят к условно-патогенным микроорганизмам; в качестве сапрофитов они широко распространены в природе, обнаруживаются на коже, слизистых оболочках и в кале почти у пятой части здоровых людей. Грибы этого рода ассоциируют с нормальной микрофлорой кожи (до 20 %) и кишечника (до 0,05 %) у человека. Источником инфицирования может быть больной кандидозом человек (поцелуй, половой контакт, посуда, инфицирование новорожденных при прохождении в инфицированных родовых путях). Инфицированию способствуют влажный климат, мацерация эпидермиса, ручная обработка овощей, фруктов, ягод в консервном и кондитерском производстве, нарушения правил гигиены в яслях. Эндогенный путь инфицирования связан с активацией кандидозной флоры, имеющейся в организме в микробных ассоциациях (развитие вторичного кандидоза при пневмониях, туберкулезе, неоплазмах и т. д.).

К патогенетическим факторам относят иммунодефицитное состояние, эндокринопатии, гиповитаминозы, обменные нарушения, хронические болезни, применение антибиотиков широкого спектра действия, цитостатиков, лучевое воздействие и действие других средств, снижающих естественную резистентность организма.

К роду Candida (Candida) относятся бесспоровые дрожжи, у которых псевдомицелий может быть хорошо развитым, рудиментарным или вовсе отсутствовать. Некоторые виды формируют истинный мицелий. Грибы рода Candida не образуют каротиноидных пигментов, что отличает эти грибы от Rhodotorula, и не формируют капсул, характерных для криптококков. Кроме хламидоспор, являющихся признаком одного вида (C.albicans), эти грибы не образуют других видов спор - аско-, баллисто-, телио- или артроспор.

Дрожжевая фаза Candida представлена одноклеточными организмами относительно крупных размеров - 1,5-8x1,5-14 мкм, овальной, округлой или овально-вытянутой формы. Они сравнительно быстро растут на плотных и в жидких питательных средах, лучше с добавлением углеводов.

Оптимальная температура роста 25-28°С; патогенные для человека и животных виды растут при 37°С, маргинальные температурные точки - 5-40°С. Оптимум рН - 5,8-6,5, но грибы способны расти при более кислой реакции среды (рН 2,5-3,0). Размножение грибов осуществляется мультиполярным почкованием, по биохимическим свойствам они являются факультативными анаэробами.

Клеточная стенка грибов состоит из 5-7 слоев.

При инвазии тканей дрожжевые клетки частично трансформируются в мицелиальную (нитчатую) фазу. Клеточная стенка мицелия состоит из 3 слоев и в значительной степени уступает по толщине аналогичной структуре дрожжевой фазы. Мицелиальная форма гриба имеет общую клеточную стенку и поперечные перегородки, что позволяет данную структуру отнести к истинному мицелию. Характерным для обеих фаз роста является преобладание в составе клеточной стенки прозрачных слоев над электронно-плотными.

Псевдомицелий образуется в результате незавершенного почкования: сформировавшаяся дочерняя клетка сохраняет связь с материнской за счет узкого перешейка наружных слоев клеточной стенки.

Этиологическое значение для человека и животных имеют лишь некоторые виды Candida.

Характеристика отдельных видов Candida:

1. С. albicans на плотной среде образует выпуклые колонии белого или кремового цвета сметанообразной консистенции: дрожжевые клетки овальной или удлиненно-овальной формы размером 2,9-7,2x2,9-14,4 мкм, филаментируют неравномерно, скопления дрожжевых клеток (гломерулы) сильно преломляют свет и имеют почти черную окраску. Преобладает шаровидный тип роста, причем гломерулы из-за тесного прилегания друг к другу в процессе роста деформируют свою первоначальную шарообразную форму. По периферии нитей встречается тип Candida, может выявляться и крыловидный тип.

По мере истощения в среде глюкозы (через 4-7 суток) или на специальных средах (рисовый агар) на терминальных нитях псевдомицелия образуются хламидоспоры - двуконтурные образования с зернистым содержимым. В месте прикрепления хламидоспоры иногда образуется утолщение - протохламидоспора. Диаметр хламидоспор почти в 2 раза превосходит поперечник несущей клетки.

Для целей эпиданализа может представлять интерес типовая идентификация C.albicans. Фенотипические различия сводятся к следующим признакам: С. stellatoidea полностью идентична C.albicans (филаментация, хламидоспоры, RB-эффект), отличаясь лишь отсутствием ассимиляции сахарозы и галактозы; C.claussenii филаментируют по типу Микокандида и не дает RB-эффекта; С.longeronii не формирует хламидоспор. C.albicans резко доминирует среди разных видов Candida, выявляемых как у больных, так и миконосителей.

2. С. tropicalis образует кремовые, белые или серые колонии, гладкие или складчатые. Дрожжевые клетки овоидной формы размером 4,3-7,2x5,8-10,8 мкм. Псевдомицелий обильный, состоящий из длинных разветвленных нитей. Преобладающий тип роста - Микоторулоидес, встречается тип Кандида и редко - шаровидный.

3. С. krusei. Колонии плоские, белого или матового цвета, вуалеобразные, с неровными краями, мягкой консистенции. На жидкой среде образуется нежная пленка и высокое пристеночное кольцо. Дрожжевые клетки овальной, удлиненной или цилиндрической формы размером 2,2-5,6x4,3-15,2 мкм, расположение одиночное или в виде цепочки. Обильный псевдомицелий быстро и равномерно образуется вдоль штрихового посева. Преобладает тип роста Микокандида, но встречаются типы Микоторулоидес и Кандида.

4. С. kefyr (C.pseudotropicalis). Колонии от кремового цвета до желтоватого, мягкой консистенции, поверхность гладкая или тонкосетчатая. Дрожжевые клетки овоидной формы размерами 2,5— 9x5-15 мкм. Интенсивность филаментации варьирует у разных штаммов, преобладающий тип роста - Микокандида.

5. С. pa rapsilosis. Колонии от кремовой до желтой окраски, мягкие, у большинства штаммов гладкие, у некоторых - частично или полностью складчатые. Дрожжевые клетки овальные, эллипсоидные или вытянутые, размеры 2,9-4,3x3,6-7,2 мкм. Преобладающий тип роста Микокандида. C.parapsilosis - частый возбудитель онихомикоза.

6. С. guilliermondiu Колонии желто-кремового цвета, с гладкой блестящей поверхностью, мягкой консистенции. Встречаются варианты с матовой поверхностью и исчерченностью. Дрожжевые клетки сравнительно мелкие (2-4,5x2,5—7 мкм), чаще овоидной, реже цилиндрической формы. Степень развития псеводомицелия варьирует у разных штаммов. В терминальных участках преобладает тип Кандида, образующиеся по ходу нитей гломерулы имеют шаровидную форму, иногда напоминают гроздь винограда. Из-за слабого преломления света в составе гломерул хорошо видны мелкие дрожжевые клетки круглой формы.

7. С. utitts. Колонии с гладкой поверхностью, мягкой консистенции, окраска варьирует от сероватой до кремовой. Дрожжевые клетки от овоидной до цилиндрической формы, размеры их составляют 3,5—4,5x7—13 мкм. Образует примитивный псевдомицелий, состоящий из грубых коротких ветвлений, несущих редкие овоидные клетки.

8. С. catenulata (С. brumptii). Колонии мягкой консистенции со складчатой поверхностью, тускловатой окраски — от сероватой до кремовой. Дрожжевые клетки овоидные или удлиненные, часто грушевидные или изогнутые ("сосискообразной" формы). Размеры клеток - 1,5-5,5x2,9-8,8 мкм. Тип роста - Кандида. Псевдомицелий состоит из разветвленных нитей коротких псевдогиф или длинных ово-идных клеток. Псевдогифы часто искривленной или волнообразной формы, нередко с разбухшими поперечными участками.

Все виды Candida ассимилируют глюкозу в качестве источника углерода и сернокислый аммоний как источник азота.

По антигенной структуре Candida являются гетерогенной группой, внутри которой имеются как родственные, так и обособленные виды.

Штаммы С. albicans имеют 2 серотипа - А и В. Близкие по антигенной структуре к С. tropicalis относят к серотипу А. Близкие по антигенной структуре к С. atellatoidea относят к серотипу В.

Эпидемиология возбудителей

Носителями C.albicans являются более 20 видов животных, но заболевания кандидозом у животных чрезвычайно редки. Интересно, что во внешней среде (трава, вода, почва, подстилка для скота, воздух загона) C.albicans выявляли только во время вспышки кандидоза; попытки обнаружить эти грибы во внезпидемиче-ский период остались безуспешными.

Другие виды грибов рода Candida обнаруживаются во внешней среде довольно часто. В почве широко представлены С. catenulata (С. brumptii), С. parapsilosis, С. curvata, С. humicola и С. tropicalis; реже выделяются С. kefyr (С. macedoniensis), С. lipolytica и С. scotii. Из воздуха выделяли С. guilliermondii, С. рarapsihsis, С. kefyr (С. pseudotropkalis), С tropicalis и С. lipolytica Из 30 образцов прокисших винных ягод было выделено 26 штаммов С. krusei При исследовании 26 видов пищевых продуктов установлено, что наиболее обсеменены грибами рода Candida были творог, творожные изделия, мороженое и квашения. Простокваша, ацидофилин и кремовые изделия или не содержали Candida, или эти грибы присутствовали в минимальных количествах. По видовому составу преобладали С. krusei (55,4 %) и С. kefyr (С. pseudotropicalis) - 31,4 %, а также С. albicans и С. tropicalis (соответственно 7,1 % и 6,1 %).

Обобщенные данные о широте распространения грибов рода Candida во внешней среде и на пищевых продуктах были представлены J. Coudert (1955):

С. guilliermondii - цветы, табак, конфитюры;

С. lipofytica - маргарин, оливки;

С. macedoniensis - коммерческие дрожжи;

С. mycoderma (C.vini) - сухие вина, пиво;

С. pulcherrima - цветы, фрукты, мед;

С. tropicalis - гниющие растения, сухие листья чая;

С. zeylanoides - замороженная говядина.

У человека частота носительства грибов рода Candida выявляет тенденцию к увеличению: если в 20-е годы она составляла на слизистой оболочке ротовой полости 10 %, то в 60-70-е годы возросла до 46-52 %.

На слизистой влагалища небеременных женщин носительство достигает 11-12,7%, но резко увеличивается в последней трети беременности, составляя, по разным данным, от 30 % до 86 %. В фекалиях частота выявления Candida достигает 80 %, на неповрежденной коже - до 9,5 %. Частота кандидозного вульвовагинита у беременных в 10-20 раз выше, чем в контрольной группе. Предполагают, что беременность является предрасполагающим фактором для развития кандидоза из-за иммунодепрессивного действия высокого уровня прогестерона и присутствия в сыворотке иммуносупрессорного фактора, связанного с альфа-глобулином.

Быстрая и интенсивная колнизация организма новорожденного ребенка приводит к тому, что к концу первого года жизни у 60 % детей формируется гиперчувствительность замедленного типа (ГЗТ) к антигенам C.albicans.

ПАТОГЕНЕЗ

В патогенезе кандидозов различают экзогенные и эндогенные благоприятствующие факторы.

К экзогенным факторам относят: травмы кожи и слизистых оболочек (например, дрожжевые поражения сосков кормящих матерей, повреждаемые детьми при сосании, дрожжевые стоматиты и заеды при неудачных зубных протезах, кандидозные онихии и паронихии при травмах во время маникюра и др.), повышенная влажность, что приводит к распространению кандидозов в географических широтах, отличающихся влажным и теплым климатом, действие на кожу кислот и щелочей, способствующих мацерации кожи, патогенность и вирулентность самого гриба. Экзогенные факторы оказывают влияние на возникновение кандидоза при определенном состоянии макроорганизма, при его восприимчивости к дрожжевым грибам.

Эндогенными факторами, способствующими ослаблению защитных сил организма и тем самым развитию кандидоза, являются: снижение активности сывороточной фунгистазы крови, которая угнетает жизнедеятельность дрожжевой флоры, гиповитами-нозы (особенно недостаточность рибофлавина - витамина Вг), болезни обмена (диабет, ожирение), признаки вегетоневроза (повышенная потливость, нарушение кровообращения конечностей), желудочно-кишечные расстройства, способствующие дисбакте-риозу, эндокринопатии, приводящие к ожирению, гипо- и гипер-тиреоидозу, синдрому Иценко-Кушинга.

Применение антибиотиков, в особенности широкого спектра действия^ способствует возникновению дисбактериоза кишечника, что может обусловить возникновение тяжелых системных кандидозов. К таким же результатам может привести использование противозачаточных средств (внутрь), кортикостероидных гормонов, ци-тостатических препаратов (иммуносупрессантов), вызывающих гормональные сдвиги и снижение сопротивляемости организма.)

Первичное инфицирование грибами рода Candida может происходить у новорожденных при прохождении родовых путей, чему способствует увеличение частоты носительства на слизистых оболочках влагалища матери во время беременности.

Адгезия гриба к эпителиальным клеткам является первым этапом его взаимодействия с макроорганизмом. Преобладание C.albicans на слизистых оболочках связывают с активным прилипанием дрожжевых клеток этого вида к эпителию ротоглотки и влагалища, которое наиболее выражено при 37°С и рН 7,3. Однако довольно высокая степень адгезии отмечена и при слабокислых значениях среды (рИ 6,0).

Умеренной адгезивностью обладают С. tropicalis, слабой - С parapsilosis; практически лишены адгезивности С. guilliermondii,

С. krusei и С. kefyr. Степень прилипания колеблется у отдельных лиц (в 3-4 раза), а также у одного и того же субъекта при взятии эпителия в разные дни.

Точные механизмы прилипания не выяснены; установлено, что дрожжевые клетки в стационарной фазе прилипают интенсивнее, чем в стадии логарифмического роста. Показано, что разные виды Candida способны прилипать к фибрин-тромбоцитарному матриксу; при этом, высокой адгезивностью обладали C.albicans; остальные виды в порядке убывания адгезивной активности располагались следующим образом: С. tropicaiis, С. parapsilosis, С. pseudotropicalis, С. guillier-mondii, С. krusei.

С. albicans и С. tropicaiis способны к адгезии и пенетрации эндотелия сосудов, в меньшей степени эти свойства присущи С. krusei и в минимальной - С. parapsilosis и С. pseudotropicalis. Эти активности в определенной степени могут объяснить ведущую роль С. albicans и С. tropicaiis при гематогенной диссеминации.