Заглавная страница Избранные статьи Случайная статья Познавательные статьи Новые добавления Обратная связь КАТЕГОРИИ: АрхеологияБиология Генетика География Информатика История Логика Маркетинг Математика Менеджмент Механика Педагогика Религия Социология Технологии Физика Философия Финансы Химия Экология ТОП 10 на сайте Приготовление дезинфицирующих растворов различной концентрацииТехника нижней прямой подачи мяча. Франко-прусская война (причины и последствия) Организация работы процедурного кабинета Смысловое и механическое запоминание, их место и роль в усвоении знаний Коммуникативные барьеры и пути их преодоления Обработка изделий медицинского назначения многократного применения Образцы текста публицистического стиля Четыре типа изменения баланса Задачи с ответами для Всероссийской олимпиады по праву Мы поможем в написании ваших работ! ЗНАЕТЕ ЛИ ВЫ?
Влияние общества на человека
Приготовление дезинфицирующих растворов различной концентрации Практические работы по географии для 6 класса Организация работы процедурного кабинета Изменения в неживой природе осенью Уборка процедурного кабинета Сольфеджио. Все правила по сольфеджио Балочные системы. Определение реакций опор и моментов защемления |
Глава 1. Структурно-функциональные особенности первичного гемостазаСтр 1 из 6Следующая ⇒
Глава 1. Структурно-функциональные особенности первичного гемостаза
1.1. Гемостаз – физиологическая реакция организма. Гемостаз - физиологический процесс, включает ряд реакций, которые обеспечивают:
Свертывание крови – составная часть гемостаза, служит одной из основных защитных реакций организма при угрозе кровопотери. В реакциях гемостаза участвует три основные системы: · сосудистая, · свертывающая, · противосвертывающая система. Реактивность сосудистой системы определяется состоянием клеток и компонентов стенки сосуда. За функции свертывающей системы отвечают клетки крови, прежде всего тромбоциты (кровяные пластинки), и плазменные факторы свертывания. П ротивосвертывающая система объединяет регуляторы свертывания, к важнейшим из которых относят: ингибиторы активных факторов свертывания и их кофакторы; активаторы и ингибиторы фибринолиза (механизма лизиса сгустка фибрина); компоненты антикоагулянтной системы протеина С. Патология гемостаза проявляется в тромбозах, прижизненном свертывании крови в сосудах, и в геморрагиях, кровоточивости. При ряде патологий, например синдроме диссеминированного внутрисосудистого свертывания, наблюдают сочетание обеих видов нарушений гемостаза - микротромбоз и кровоточивость.
Итак, фон Виллебранда фактор, иммобилизованный на коллагене субэндотелия, связывается с a цепями ГП Ib и “привязывает” клетки, выполняя функции “мостика” между коллагеном и тромбоцитами (Рис 5).
1.3.4.2. ГП Ib–рецептор фон Виллебранда фактора и тромбина ГП Ib - интегрин, существует на поверхности интактных тромбоцитов в комплексе с ГП IX и ГПV (ГП Ib/IX/V) (Рис 6). ГП Ib состоит из двух субъединиц: a-(130 kDa) и b-(25 kDa), связанных дисульфидным мостиком, и стабилизирован на поверхности интактных тромбоцитов не ковалентной связью с двумя цепями ГП IX(22 kDa) и одной цепью ГПV(82 kDa) (в отношении 2:2:2:1). Все компоненты комплекса относятся к типу I гликопротеинов, связанных с мембраной, имеют в структуре повторы участков, богатых лейцином, и N- и С-концевые петлевидные фланкирующие последовательности.
ГП Ib a - основная субъединица комплекса ГП Ib/IX/V, связывающая лиганды.ГП Ib a содержит в N-концевой последовательности (1-282ао) перекрывающиеся, но разные участки связывания VWF, Р-селектина, лейкоцитарного интегрина Мас-1(aМ/ b2, CD11b/CD18), высокомолекулярного кининогена, а также протеиназ - тромбина и фактора XIa контактной фазы свертывания крови. Тромбин, связываясь с ГП Ib a двумя участками своего центра узнавания, может служить мостиком между ГП Ib a одного и того же тромбоцита или близлежащих клеток.
1.3.4.3.Активация тромбоцитов фактором фон Виллебранда Фактор фон Виллебранда, взаимодействуя с рецептором — ГП Ib (комплекса ГП Ib/IX/V), активирует клетки, стимулирует следующие реакции: 1) экспонирование на мембране интегрина aIIb/ b3, 2) распластывание тромбоцита, 3) секрецию агонистов агрегации –АДФ и тромбоксана А2 (ТХА2) (Рис 6). Механизм передачи сигнала через ГП Ib внутрь клетки осуществляется двумя путями. 1 - через прямое взаимодействие цитоплазматического домена ГП Iba с белками цитоскелета (участвующими в передаче сигнала, такими как филамин и адапторный белок 14-3-3z). Эти белки связаны с кальмодулином, а также ассоциированы с Src киназами и PI3-киназами. Фосфорилирование этих белков цитоскелета происходит, в частности в результате связывания фон Виллебранда фактора с ГП Iba, что вызывает повышение концентрации внутриклеточного кальция ([Ca 2+]i ), изменение формы тромбоцита, его распластывание, активацию и экспонирование на поверхности клетки второго рецептора VWF -интегрина aIIb/b3 (ГП IIb/IIIа по устаревшей номенклатуре). 2 - через ассоциацию комплекса ГП Ib/IX/V с двумя ITAM (immunoreceptor tyrosine-based activatory motifs) - содержащими белками (FcgRIIa и FcRg). В результате это взаимодействие ведет к фосфорилированию ITAM тирозина семейством syk киназ, активации фосфолипазы Сg (PLC), протеинкиназы C (PKC) и повышению концентрации внутриклеточного кальция. Оба пути передачи сигнала через рецептор ГП Ib ведут к активации тромбоцита, освобождению агонистов агрегации тромбоцитов – АДФ, тромбоксана А2 (ТХА2), и экспонированию на поверхности клетки интегрина aIIb/ b3 - рецептора фибриногена и VWF. Связывание интегрина aIIb/ b3 с лигандами индуцирует активацию тромбоцита по механизму снаружи-внутрь (outside- in).
Итак, интегрин aIIb/ b3 служит рецептором как фактора фон Виллебранда, так и фибриногена (Рис 5, 6). Большая часть интегринов aIIb/b3 на активированных тромбоцитах оккупируется фибриногеном, поскольку в плазме человека концентрация фибриногена на несколько порядков выше (около 9mM), чем фактора фон Виллебранда (около 1nM). При недостаточности фибриногена или его отсутствии у пациентов с афибриногенемией фактор фон Виллебранда может поддерживать агрегацию тромбоцитов. Фактор фон Виллебранда отвечает за формирование достаточно стабильных агрегатов тромбоцитов в поврежденных сосудах с высоким напряжением сдвига и скоростью сдвига, как например в артериолах, тогда как один фибриноген не способен обеспечить в них агрегацию. О конкуренции фактора фон Виллебранда и фибриногена за связывание с экспонированным интегрином aIIb/b3 свидетельствует тот факт, что начальная скорость агрегации тромбоцитов выше в отсутствии фибриногена.
1.3.4.4. Интегрины– рецепторы адгезивных белков Интегрин aIIb/b3 (ГП IIb/IIIа) – катионзависимый гетеродимерный комплекс - состоит из двух мембранных гликопротеинов I типа– субединиц aIIb и b3. Семейство интегринов обеспечивает связывание клеток с адгезивными белками сосудистой стенки — фактором фон Виллебранда, коллагеном, фибронектином, ламинином, тромбоспондином и фибриногеном плазмы крови (Таблица 3). Из всех адгезивных белков только (!!!) фактор фон Виллебранда, связывая ГП Ib в комплексе ГП Ib/IX/V, обеспечивает начальное прикрепление тромбоцитов к поврежденному субэндотелию в сосудах с высокой скоростью сдвига. Интегрины работают как рецепторные белки и регулируют клеточные функции.
Таблица 3 Адгезивные белки, их рецепторы и лиганды в образовании Тромбоцитарных тромбов
Вслед за адгезией тромбоцитов к поврежденному сосуду с помощью мостика - фактора фон Виллебранда, происходит прямое взаимодействие тромбоцитов с коллагеном субэндотелия сначала через рецептор ГП VI, а затем через интегрин a2b1, что обеспечивает устойчивую адгезию, активацию и агрегацию клеток (Рис. 5). Коллаген взаимодействует с рецептором ГП VI тромбоцита, который фосфорилируется src семейством тирозинкиназ. Передача сигнала внутрь клетки ведет к активации фосфолипазы С (ФЛС)g, освобождению внутриклеточного посредника – внутриклеточного кальция ([ Са 2+ ]i), и агониста агрегации - АДФ. В результате активации рецептора ГП VI происходит конформационная перестройка второго рецептора коллагена - интегрина a2b1 (ГП Ia-IIa) в состояние высокого сродства к коллагену. Эта реакция обеспечивает стабилизацию адгезии, распластывание тромбоцитов, их активацию и последующее экспонирование на поверхность тромбоцита интегрина aIIbb3 (Рис 5). Интегрин aIIbb3 связывает фибриноген и через этот мостик рекрутирует еще не адгезированные, но активированные тромбоциты. Фибриноген служит агонистом интегрина aIIb/b3 и индуцирует активацию клеток по механизму снаружи-внутрь.
Таким образом, на начальной стадии адгезии тромбоцитов к субэндотелию имеет место связывание фон Виллебранда фактора с ГП Ib комплекса ГП Ib/IX/V на тромбоцитах, активация клеток. Коллаген субэндотелия предоставляет не только участок узнавания и прикрепления фон Виллебранда фактора к субэндотелию, но и активно взаимодействует со своими рецепторами на тромбоцитах - ГП VI и интегрином a 2 b 1, и активирует адгезию и агрегацию клеток. На стадии распластывания происходит взаимодействие домена фон Виллебранда фактора, содержащего пептид RGD, с интегрином a IIb b 3. В последнюю стадию включаются только активированные тромбоциты, так как только после активации клеток происходит экспонирование интегрина a IIb b 3 на мембрану клетки и его связывание с адгезивными белками. При адгезии тромбоцита через ГП Ib или aIIb/ b3 к VWF, иммобилизованному на коллагене субэндотелия генерируются разные кальциевые сигналы, кооперативно регулирующие поведение тромбоцита. Одиночные кальциевые спайки, возникающие при активации ГПIb, вызывают обратимую активацию тромбоцита, экспонирование на поверхность интегрина aIIb/ b3 и непрочное прикрепление клетки к субстрату. Последующие устойчивые кальциевые осцилляции, возникающие при активации aIIb/ b3 адгезивными белками, обесп ечивают прочную адгезию. Итак, за адгезией клеток следует стадия агрегации активированных тромбоцитов. Склеивание клеток осуществляет фибриноген, рецептором которого на тромбоцитах служит интегрин a IIb b 3. Он образует мостики между клетками. На поверхности каждого активированного тромбоцита может находится от 40000 до 80000 копий рецептора - интегрина a IIb b 3 и поэтому образуются очень большие агрегаты клеток в участке активации тромбоцитов. Но агрегаты не достаточно прочны. В стабилизацию агрегатов вовлекаются другие адгезивные белки: тромбоспондин и фибронектин (Рис 5).
Тромбоспондин-1 освобождается из гранул тромбоцитов. Подобно фактору фон Виллебранда тромбоспондин является модульным гликопротеидом. Молекула его состоит из трех мономеров. В структуре тромбоспондина идентифицированы домены, отвечающие за связывание фибриногена, коллагена, гепарина, фибронектина и клеток посредством реактивного пептида RGD. Основная функция тромбоспондина в гемостазе - стабилизировать связывание клеток с фибриногеном. Тромбоспондин превращает обратимые комплексы в необратимые. Его рецепторы на тромбоцитах- ГП IV(С D 36) и интегрин a IIb b 3 (ГП II b /IIIа).Тромбоспондин связывается с фибриногеном и с рецептором на тромбоцитах. Фибронектин – основной компонент соединительнотканного матрикса, имеет мультидоменную структуру. Его домены отвечают за связывание с коллагеном, фибрином, фактором XIII свертывания крови,гепарином, актином, тромбоспондином и другими лигандами (Таблица 3). Фибронектин относится к третьему типу белков, связывающих клетки, поскольку выполняет роль и структурного матрикса и белка, связывающего клетки с матриксом. Синтезируются два варианта фибронектина: в мегакариоцитах, предшественниках тромбоцитов, плазменный фибронектин, лишенный последовательности типа III и свободно циркулирующий в кровотоке; в фибробластах синтезируется фибронектин, содержащий блок типа III, связывающий клетки. Фибронектин легко полимеризуется и образует сеть нерастворимых фибрилл матрикса. Таким образом, в адгезии и агрегации тромбоцитов участвуют адгезивные белки, имеющие рецепторы-интегрины на клетках и множество лигандов, обеспечивающих связывание клеток с компонентами внеклеточного матрикса стенки сосуда и белками крови. Адгезия тромбоцитов к поврежденному участку сосуда обеспечивается лигандами, взаимодействующими с активированным и экспонированным интегрином aIIb/b3: самим фон Виллебранда фактором, фибриногеном, а также фибронектином, тромбоспондином и другими лигандами, необходимыми для обеспечения стабильных тромбоцитарных агрегатов.
Морфология тромбоцитов Тромбоциты, син.кровяные пластинки, – форменные элементы крови, небольшие (0,5-3,0мкм), дисковидные, безъядерные клетки (РИС 7), образуются из цитоплазмы крупных (2—50мкм) костномозговых клеток– мегакариоцитов. Время жизни тромбоцитов 7-10 дней. Тромбоциты содержат множество гранул: α- гранулы, плотные гранулы, лизосомы, а так же органеллы: митохондрии, аппарат Гольджи. Цитоскелет тромбоцита отвечает за изменение формы клетки, секрецию и ретракцию сгустка. Он формируется субмембранными филаментами актина, пучками микротрубочек, а также плотной тубулярной системой, которая образуется из эндоплазматического ретикулума мегакариоцита, и системой открытых каналов, так называемой открытой канальцевой или каналикулярной системой. Клетки секретируют содержимое гранул через систему открытых каналов, которые сообщаются друг с другом и внешней средой и создают широкую поверхность для экзоцитоза и для взаимодействия мембранных рецепторов с агонистами. При связывании агониста, называемого индуктором, с рецептором на мембране клетки происходит активация тромбоцитов.
Активация тромбоцитов АДФ АДФ, освобождающийся из активированных клеток (плотных гранул тромбоцитов), взаимодействует со специфическими пуриновыми рецепторами на тромбоцитах и может вызывать обратимую и необратимую агрегацию в зависимости от концентрации агониста (Рис 11). РИС 11
АДФ связывает два основных пуриновых рецептора на тромбоцитах - P2Y1 и P2Y 12. Итак, при действии небольших концентраций АДФ происходит обратимая агрегация, которая ведет к изменению формы клеток и экспонированию на поверхность интегринов aIIb/b3, связывающих фибриноген. Необратимая агрегация, вызываемая более высокими концентрациями АДФ, приводит к реакции высвобождения. Эта реакция обеспечивается взаимодействием АДФ с другим членом семейства пуриновых рецепторов- P2Y 12 (называемым также P2Y adр.), связанным с белком Gi. Активация рецептора P2Y 12 отвечает за ингибирование аденилатциклазы, снижение цАМФ и, как следствие, продолжительную агрегацию и секрецию (Рис11). Активация P2Y1 стимулирует первые этапы образования тромба, а активация P2Y12 способствует устойчивой активации тромбоцитов необходимой для образования стабильных тромбов. Рецептор Р2Y12 служит мишенью антитромботических лекарств, тинопиридинов (тиклопидина и клопидогреля) — сильных и специфических ингибиторов АДФ-вызванной агрегации тромбоцитов.
Исходя из выше изложенного становится понятным, почему именно комбинационная терапия аспирином - блокатором циклооксигеназы тромбоцитов, препятствующим образованию ТХА2 (освобождаемого тромбином и другими сильными индукторами агрегации), и тиклопидином - блокирующим АДФ-вызванную агрегацию, является более результативной, чем монотерапия, для предотвращения тромбообразования при повреждении эндотелия (например, при атеротромбозе). Эти данные подтверждают критическую роль тромбоцитов в провокации тромбообразования. ВАЖНО · Гемостатический баланс поддерживается синтезом в эндотелии протромботических и антитромботических компонентов системы свертывания крови. Гемостаз начинается с повреждения эндотелия, его активации, обнажения субэндотелия, экспонирования на поверхность целого ряда рецепторов, адгезивных молекул, активаторов и ингибиторов гемостаза и сопряженных процессов. · Первичный гемостаз - тромбоцитарно-сосудистый, многостадийный процесс, включает фазы: инициирования (прикрепление тромбоцитов к субэндотелию и их адгезию), распространения (активация и агрегация тромбоцитов под действием специфических агонистов), стабилизации и ингибирования. · На начальной стадии адгезии тромбоцитов фон Виллебранда фактор (vWF), иммобилизованный на коллагене субэндотелия сосудов с высокой скоростью сдвига, связывает ГП Iba комплекса ГП Ib/IX/V на мембране тромбоцита и запускает внутриклеточную сигнализацию, активацию тромбоцитов, освобождение АДФ и экспонирование интегрина aIIbb3 - рецептора vWF и фибриногена. • Коллаген субэндотелия взаимодействует с рецепторами на тромбоцитах - ГП VI и интегрином a2b1, и активирует адгезию и агрегацию клеток. • Фибриноген крови, взаимодействуя с интегрином aIIbb3, выполняет функции мостика между активированными тромбоцитами. В стабилизации агрегатов тромбоцитов участвуют адгезивные белки: тромбоспондин и фибронектин, а также P- селектин и CD40 лиганд • Тромбин активирует тромбоциты, расщепляя рецепторы, активируемые протеазами (РАR, преимущественно РАR-1), сопряженные с G-белками, и вызывая конформационные изменения, аутоактивацию рецептора и запуск внутриклеточной сигнализации, в том числе активацию фосфоинозитидного пути и образование вторичных посредников (ИФ3, ДАГ, [Ca+2]i и др). • Активация фосфолипазы А2 (ФЛА2) при повышении концентрации внутриклеточного кальция ([Ca+2]i) ведет к освобождению из мембранных фосфолипидов арахидоновой кислоты и синтезу семейства простагландинов: в тромбоцитах – активатора агрегации тромбоцитов - тромбоксана А2 (TxА2 ), а в эндотелии - ингибитора агрегации –простациклина(PGI2). • АДФ взаимодействует со специфическими пуриновыми рецепторами на тромбоцитах и вызывает обратимую (через активацию P2Y1) и необратимую агрегацию (через P2Y 12) тромбоцитов в зависимости от концентрации АДФ. • Основные ингибиторы агрегации тромбоцитов – простациклин, оксид азота и АДФ- аза, расщепляющая агонист агрегации – АДФ.
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
VWF- фон Виллебранда фактор ICAM-1, ICAM-2- внутриклеточные адгезивные молекулы VCAM - сосудистых клеток адгезивная молекула; CD40 - тип I трансмембранных рецепторов ТФ -Тканевой фактор PAI-1 - ингибитор активаторов плазминогена PAF фактор активации тромбоцитов P -тромбоцитарный селектин Е - эндотелиальный селектин PAR- рецептор, активируемый протеиназой PGI2 - простациклин NO - оксид азота AДФ- аденозиндифосфат ГАГ гликозаминогликаны гепарансульфат APC - активированный протеин С EPCR - эндотелиальный рецептор протеина С TFPI – ингибитор пути тканевого фактора HS -гепаран сульфат PS - протеин S ТМ - тромбомодулин ГП -гликопротеин P2Y1, P2Y12 - пуриновые рецепторы АДФ TP- рецептор тромбоксана PSGL-1 – лиганд Р- селектина ADAMTS-13 – дезинтегрин и металлопротеиназа с тромбоспондиновым мотивом
Глава 1. Структурно-функциональные особенности первичного гемостаза
1.1. Гемостаз – физиологическая реакция организма. Гемостаз - физиологический процесс, включает ряд реакций, которые обеспечивают:
Свертывание крови – составная часть гемостаза, служит одной из основных защитных реакций организма при угрозе кровопотери. В реакциях гемостаза участвует три основные системы: · сосудистая, · свертывающая, · противосвертывающая система. Реактивность сосудистой системы определяется состоянием клеток и компонентов стенки сосуда. За функции свертывающей системы отвечают клетки крови, прежде всего тромбоциты (кровяные пластинки), и плазменные факторы свертывания. П ротивосвертывающая система объединяет регуляторы свертывания, к важнейшим из которых относят: ингибиторы активных факторов свертывания и их кофакторы; активаторы и ингибиторы фибринолиза (механизма лизиса сгустка фибрина); компоненты антикоагулянтной системы протеина С. Патология гемостаза проявляется в тромбозах, прижизненном свертывании крови в сосудах, и в геморрагиях, кровоточивости. При ряде патологий, например синдроме диссеминированного внутрисосудистого свертывания, наблюдают сочетание обеих видов нарушений гемостаза - микротромбоз и кровоточивость.
|
||||||||||||||||||||||||
Последнее изменение этой страницы: 2020-10-24; просмотров: 81; Нарушение авторского права страницы; Мы поможем в написании вашей работы! infopedia.su Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав. Обратная связь - 3.144.243.184 (0.054 с.) |