Валидационная оценка методик титриметрического анализа раствора глюкозы для инъекций по показателю «прецизионность»

Прецизионность (воспроизводимость) – это характеристика случайного рассеяния результатов, полученных с помощью методики, относительно среднего результата. По существу – это мера суммы случайных ошибок. При установлении прецизионности следует иметь в виду, что данная характеристика бывает трех уровней:

1-повторяемость (сходимость);

2-внутрилабораторная воспроизводимость;

3-межлабораторная воспроизводимость.

Однако для фармацевтического анализа бывает достаточно только первого уровня.

Готовим модельный раствор глюкозы: 0,5 г глюкозы, раствор кислоты хлористоводородной 0,1 М до pH 3,0-4,0, воды очищенной до 10 мл (раствор А).

Затем готовим параллельно три раствора:

Раствор Б₁, Б₂, Б_3. В три колбы для титрования помещают по 0,5 мл раствора А и далее проводят титрование по методике, приведенной в разделе «Правильность».

Раствор Б₄, Б₅, Б_6. В три колбы для титрования помещают по 1,0 мл раствора А и далее проводят титрование по методике, приведенной в разделе «Правильность».

Раствор Б₇, Б₈, Б_9. В три колбы для титрования помещают по 1,5 мл раствора А и далее проводят титрование по методике, приведенной в разделе «Правильность».

1 мл 0,05 М раствора иода соответствует 0,0099 г водной глюкозы.

Параллельно проводят контрольный опыт.

Расчет содержания глюкозы провели по формуле:

X_найд= (V_к-V_оп)×K×T, где

V_k- объем титранта, пошедший на титрование в контрольном опыте,

V-объем титранта, пошедший на титрование в исследуемом образце,

К- поправочный коэффициент,

Т- титр титранта по определяемому веществу.

И рассчитали стандартное отклонение (SD) и относительное стандартное отклонение (RSD). Результаты испытаний по показателю «Прецизионность» представлены в таблице 4.

Таблица 4. Результаты испытаний

Уровень	Взято, г	,мл	Найдено, г	Х, %	(Хi-Хср)^2
н	0,02504	2,6	0,0252252	100,74	0,1936
н	0,02504	2,6	0,0252252	100,74	0,1936
н	0,02504	2,5	0,0244255	96,87	11,7649
с	0,05008	5,3	0,0514206	102,68	5,6644
с	0,05008	5,2	0,0504504	100,74	0,1936
с	0,05008	5,3	0,0514206	102,68	5,6644
в	0,07512	7,7	0,0747054	99,45	0,7225
в	0,07512	7,8	0,0756756	100,74	0,1936
в	0,07512	7,6	0,0737352	98,16	4,5796
				Хср=100,3

 

;

; SD=1,9095;

; RSD=1,9%

Заключение: полученные результаты показывают, что методика является валидной по показателю "Прецизионность" в условиях повторяемости; случайная ошибка незначительна (1,9%).

Валидационная оценка методик титриметрического анализа раствора глюкозы для инъекций по показателю «Правильность»

Правильность аналитической методики – это степень близости экспериментальных результатов к истинному значению во всей области измерений. Главный фактор, определяющий правильность – это значение систематической погрешности.

Приготовили три модельных раствора глюкозы А₁, А₂, А₃ (таблица 5).

Таблица 5. – Приготовление модельных растворов глюкозы.

Модельная смесь	1(А1)	2(А2)	3(А3)
Навеска глюкозы,г	0,4	0,5	0,6
Раствора кислоты хлористоводородной 0,1 М	до pH 3,0-4,0	до pH 3,0-4,0	до pH 3,0-4,0
Воды очищенной, мл	до 10 мл	до 10 мл	до 10 мл

Раствор А_1. Точную навеску глюкозы (0,4 г) помещают в мерную колбу вместимостью 10 мл, растворяют в 5 мл воды очищенной, добавляют 0,1 М раствор кислоты хлористоводородной до pH 3,0-4,0 и доводят водой до метки.

Раствор А_2. Точную навеску глюкозы (0,5 г) помещают в мерную колбу вместимостью 10 мл, растворяют в 5 мл воды очищенной, добавляют 0,1 М раствор кислоты хлористоводородной до pH 3,0-4,0 и доводят водой до метки.

Раствор А_3. Точную навеску глюкозы (0,6 г) помещают в мерную колбу вместимостью 10 мл, растворяют в 5 мл воды очищенной, добавляют 0,1 М раствор кислоты хлористоводородной до pH 3,0-4,0 и доводят водой до метки.

Растворы Б₁, Б₂, Б₃. В три колбы для титрования переносят по 1,0 мл раствора А₁, прибавляют 10 мл воды, 10 мл 0,05 М раствора иода, 3 мл 10% раствора натрия гидроксида. Закрывают склянку пробкой и оставляют на 5 минут в темном месте. Затем прибавляют 5 мл кислоты серной разведенной и титруют 0,1 М раствором натрия тиосульфата до обесцвечивания раствора (индикатор - крахмал).

Растворы Б₄, Б₅, Б₆. В три колбы для титрования переносят по 1,0 мл раствора А₂, прибавляют 10 мл воды, 10 мл 0,05 М раствора иода, 3 мл 10% раствора натрия гидроксида. Закрывают склянку пробкой и оставляют на 5 минут в темном месте. Затем прибавляют 5 мл кислоты серной разведенной и титруют 0,1 М раствором натрия тиосульфата до обесцвечивания раствора (индикатор - крахмал).

Растворы Б₇, Б₈, Б₉. В три колбы для титрования переносят по 1,0 мл раствора А₃, прибавляют 10 мл воды, 10 мл 0,05 М раствора иода, 3 мл 10% раствора натрия гидроксида. Закрывают склянку пробкой и оставляют на 5 минут в темном месте. Затем прибавляют 5 мл кислоты серной разведенной и титруют 0,1 М раствором натрия тиосульфата до обесцвечивания раствора (индикатор - крахмал).

1 мл 0,05 М раствора иода соответствует 0,0099 г водной глюкозы.

Параллельно проводят контрольный опыт.

Расчет содержания глюкозы провели по формуле:

X_{найдено}= ×K×T, где

V_k- объем титранта, пошедший на титрование в контрольном опыте,

V-объем титранта, пошедший на титрование в исследуемом образце,

К- поправочный коэффициент,

Т- титр титранта по определяемому веществу.

Результаты оценки методики количественного определения по показателю «Правильность» занесли в таблицу 6.

Таблица 6. – Результаты испытаний

Уровень	Взято, г	,мл	Найдено, г	Х, %	(100-Хi)^2
н	0,04008	6,9	0,03978	99,25	0,5625
н	0,04008	6,8	0,04075	101,67	2,7889
н	0,04008	6,9	0,03978	99,25	0,5625
с	0,05000	5,9	0,04948	99,56	0,1936
с	0,05000	6,0	0,04851	97,02	8,8804
с	0,05000	5,9	0,04948	99,56	0,1936
в	0,06004	4,9	0,05918	98,57	2,0449
в	0,06004	5,0	0,05821	96,95	9,3025
в	0,06004	4,8	0,06015	100,18	0,0324
				Хср=99,11

 

;

; SD=1,752;

; =1,52

< (2,31).

Заключение: сравнивая полученные результаты с табличными значениями можно сделать вывод о том, что методика является валидной по показателю «Правильность».

 

Общие выводы:

Глюкоза - это очень важный углевод, применяемый в самых различных областях. Важное место глюкоза занимает в медицине, как детоксикант и средство для парентерального питания.

В литературном обзоре были рассмотрены характеристика и свойства глюкозы, её получение, качественные реакции и методы количественного определения, а также практическое применение.

В экспериментальной части приведена валидационная оценка методик качественного и количественного анализа раствора глюкозы для инъекций по показателям: «специфичность», «линейность», «прецизионность», «правильность».

Полученные результаты позволяют сделать вывод, что представленные методики пригодны для практического использования и могут быть использованы для качественного и количественного анализа раствора глюкозы для инъекций.

 

 

Список литературы

1. Беликов, В.Г. Фармацевтическая химия. В 2 ч.: Ч.1. Общая фармацевтическая химия; Ч.2. Специальная фармацевтическая химия: Учеб. для вузов. – Пятигорск, 2003. – 720 с.

2. Машковский, М.Д. Лекарственные средства. – 16-е изд., перераб., испр., и доп. – М.: Новая волна: Издатель Умеренков, 2010. – 1216 с.

3. ОФС 42-0113-09 «Валидация аналитических методик»

4. Государственная фармакопея СССР. – Х изд.

5. Руководство к производственной практике по внутриаптечному контролю качества лекарственных средств: учебное пособие / Е.В. Компанцева, Т.Т. Лихота, Г.И. Лукъянчикова, Г.В. Сенъчукова / под редакцией Е.В. Компанцевой. – Пятигорск, 2006.-268 с.

6. Арзамасцев, А.П. Валидация аналитических методов / А.П. Арзамасцев, Н.П. Садчикова, Ю.Я. Харитонов // Фармация. -2006. –Т.55, №4. – С.8-12.