Лабораторная диагностика холеры

Возбудитель Домен (царство): Procaryota, Отдел: Gracilicutes, Семейство: Vibrionaceae, род Vibrio, биовар choierae classic, серогруппа О1 (в зависимостиот сочетания А-, В- и С-субъединиц О-антигена различают серовары: Огава (АВ), Инаба (АС) и Гикошима (ABC) открыты Р. Кохом в 1883 г. Биовар ETor, серогруппа О139 Bengal (агглютинируются сывороткой О139) выделенны в 1906 г. в Египте Ф. и Е. Готшлихами на карантинной станции Эль-Тор. Всего различают более 200 О серогрупп, Н-антиген является общеродовым антигеном.

Бактериоскопический метод V.chоlerae Окраска по Граму Увеличение x1000

 

Исследуемый материал: испражнения, рвотные массы

Бактериологический метод. Питательные среды и характер роста: Оптимальная температура роста 37 С и рН 8,5—9,0 с 0,5% натрия хлорида. Среда накопления 1% щелочная пептонная вода, на которой бразуется пленка течение 6—8 ч. Элективные среды; щелочной агар (мелкие голубоватые в проходящем свете колонии) и TCSBS -среда (тиосульфат-цитратный сахарозо-желчесодержащий агар), на котором образует колонии желтого цвета.

Отличие холерного вибриона от холероподобных вибрионов проводится по следующим свойствам:

1) По гликозидазной активности (триада Хейберга):САхароза, МАнноза, АРАбиноза – СА+МА+АРА-; 2) Агглютинации О1 и О139 сыворотками; 3)Лизису холерным или эльтор фагами;4) выявлению наличие холерогена –энтеротоксина методом ПЦР.

Учет гликозидазной активности холерного и нехолерного вибрионов (триада Хейберга)

Группа	Ферментация
Сахароза	Манноза	Арабиноза
I (холерный вибрион) Vibrio cholerae	+	+	-
II (нехолерный вибрион) Vibrio metschikovi	-	-	+

 

Биовары – это варианы одного и того же вида бактерий, отличающиеся по своим биологическеим свойствам. Биологические варинты (биовары) холерного вибриона различают по следующими свойствами:

	Биовары
Vibrio cholerae var. Classic серогруппа О1	Vibrio cholerae var. eltor серогруппа О139
Лизабельность фагами:	холерный "С"	+	-
"Эль-Тор 2"	-	+
Агглютинация куриных эритроцитов	-	+
Гемолиз бараньих эритроцитов	-	+
Чувствительность к полимиксину	+	-

 

Серологическая диагностика холеры РА в серодиагностике холеры: исслед сыворотку крови (ищут антитела), используют диагностикум -3 часовая бульонная культура. Положительным считают титр 1/40, диагностическим не менее чем; двукратное кратное увеличение.

 

Разведение сыворотки	1/40	1/80	1/160	1/320	1/640	КД	КС
Результат	+ хлопья	+ хлопья	+ хлопья	+ хлопья	- муть	Муть или осадок	Прозрачная

Вывод: титр 1/320 Обследуемый болен или переболел холерой)

ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА БРУЦЕЛЛЕЗА Домен: Procaryota, Отдел: Gracilicutes, Сем-во: Brucelaceaceae

Возбудители B.melitensis – от овец, B.abortus – от коров, B.suis – от свиней

Морфология грамотрицательные коккобактерии

Клинические формы острые (ангины,фарингиты,пнемонии) и хронические (полиартриты, миозиты и т.д.

Исследуемый материал: кровь

 

Вакцинный штамм бруцелл Окраска по Граму Увеличение х 630

Бактериологический метод

Питательные среды для культивирования бруцелл: печеночный МПБ, печеночный МПА и другие специальные среды (2 посева). Инкубация одного из посевов в атмосфере с 10% СО₂ для выделения Br. abortus в течение 1-4 недель