Работа 4. Обнаружение продуктов спиртового брожения.

 

Ход работы

а) Заполнение бродильного аппарата:

1 г свежих пекарских дрожжей или 0.5 г сухих дрожжей растирают в ступке, приливая небольшими порциями 5% раствор глюкозы в количестве 20 мл. Затем смесь переносят в бродильный аппарат (аппарат Эйхгорка) так, чтобы закрытое колено было заполнено полностью, а расширенная его часть Z только до половины. С заполненной трубкой прибор помешают в термостат при температуре 37°С на 30-50 мин. Когда произойдет накопление газа в верхней части закрытого колена прибора, можно проделать качественные реакции на СО₂ и спирт.

б) Обнаружение СО₂:

В бродильный аппарат наливают 10% раствор едкого натра до краев сосуда и, закрыв отверстие большим пальцем, перемешивают содержимое прибора. CO₂ поглошается щелочью, создавая вакуум, и кожа пальца присасывается к отверстию прибора.

в) Обнаружение этилового спирта с помощью йодоформенной пробы:

2-3 мл жидкости из бродильного аппарата отфильтровывают в пробирку, добавляют несколько капель 10% раствора йода до получения желтого окрашивания и слегка нагревают. Через некоторое время ощущается характерный запах йодоформа.

Эталоны ответов на тестовые задания

1.1. – Г

1.2. – Г

2.1. – 1-Б, 2-В, 3-А, 4-Д, 5-Г

2.2. – 1-Б, 2-А, 3-В, 4-Г, 5-Б

3.1. –1,2,3

3.2. –1,2,3

4.1. – С (+ - -)

4.2. – А (+ + +)

Эталоны ответов на ситуационные задачи

Задача 1.

Эффект Пастера объясняется гораздо меньшей эффективностью анаэробного распада глюкозы - гликолиза, который в анаэробных условиях является единственным источником АТФ. Энергетический выход гликолиза составляет всего 2 моля АТФ на моль глюкозы, тогда как аэробное окисление даст 36 молекул АТФ на 1 молекулу глюкозы. Таким образом, в анаэробных условиях больше глюкозы должно окисляться, чтобы обеспечить энергетические потребности клеток.

Задача 2.

Примерно 90% принятого алкоголя метаболизируется в печени НАД – зависимым ферментом алкогольдегидрогеназой:

 

 

Для окисления 125 г этилового спирта требуется столько же НАД⁺, сколько и для окисления 500 г глюкозы, поэтому, после приема алкоголя соотношение [НАД⁺]/ [НАДН+ Н⁺] резко снижается вследствие значительного увеличения концентрации восстановленной формы кофермента. Это ведет к смещению лактатдегидрогеназной реакции в сторону образования лактата:

пируват + НАДН+Н⁺ лактат +НАД ⁺

Пируват – один из главных субстратов глюконеогенеза, поэтому снижение его концентрации резко замедляет скорость синтеза глюкозы, что является причиной гипогликемии.

Занятие 25. Глюконеогенез. Пентозофосфатный путь

Превращения глюкозы. Путь Энтнера-Дудорова у бактерий.