Построение калибровочного графика раствора метронидазола

 

Метод основан на способности нитрогруппы метронидазола образовывать окрашенные растворы (красно-коричневого цвета) с фенолом в щелочной среде. В пробирки отбирали 1М раствор фенола и 1 М раствор гидроксида калия, ставили на водяную баню и доводили до кипения. После закипания добавляли раствор метронидазола известной концентрации. Параллельно готовили контрольный раствор, содержащий вместо антибиотика дистиллированную воду. В полученных растворах определяли оптическую плотность на приборе СФ UV mini - 1240. По полученным данным построили калибровочный график зависимости оптической плотности(Y) от концентрации раствора антибиотика (X) (рисунок 2.1).

 

 

Рисунок 2.1 – Калибровочный график раствора метронидазола

 

Адсорбция антибиотиков на поверхность бактериальной целлюлозы

 

Адсорбцию проводили путем погружения гель - пленки бактериальной целлюлозы в 100 мл водного раствора антибиотика известной концентрации. Раствор антибиотика с ГПБЦ оставляли на сутки при комнатной температуре. На следующий день пленку выгружали и высушивали, а в растворе определяли оптическую плотность аналогично пунктам 2.2.8. Остаточную концентрацию находили по калибровочному графику, опуская перпендикуляр к оси абсцисс в месте пересечения значения оптической плотности с калибровочной линией.

 

Десорбция антибиотика из бактериальной целлюлозы

 

Десорбцию проводили путем погружения гель-пленки бактериальной целлюлозы, выдержанной в водном растворе антибиотика, в 100 мл дистиллированной воды. Дистиллированную воду с ГПБЦ оставляли на сутки при комнатной температуре. На следующий день пленку выгружали и высушивали, а в полученном растворе определяли оптическую плотность и концентрацию аналогично пункту 2.2.8.

 

Определение антибиотической активности полученных нанокомпозитов

Метод основан на способности антибиотических веществ диффундировать в питательную среду и образовывать зоны, в которых не развиваются тест – микроорганизмы. Делали разведение суспензии испытуемой культуры микроорганизмов, затем засеивали 2 чашки Петри (опыт и контроль) сплошным газоном, для чего 1 мл суспензии наносили на поверхность агаризованной среды и растирали шпателем Дригальского. После чего на засеянную поверхность стерильным пинцетом наносили диски полученного нанокомпозита и, в качестве контроля, диски чистой бактериальной целлюлозы. Чашки Петри помещали в термостат при t= на 3 суток. Через прошедшее время измеряли диаметр зоны отсутствия роста испытуемой культуры в опытном и контрольном образцах и сравнивали результаты.

 

Статистическая обработка данных

 

Полученные данные обрабатывали методом вариационной статистики на персональном компьютере с использованием программы FSTAT.

 

Результаты и их обсуждение

Нанокомпозиты - это материалы обладающие исключительно высоким отношением площади поверхности к объему усиливающей фазы. Использование в качестве матрицы бактериальной целлюлозы позволяет получать нанокомпозиты наиболее простым путем – сорбцией. Этим путем возможно накопление самых различных частиц усиливающей фазы (антибиотиков, минералов и др.) [29].

Основное направление исследований в области получения и изучения свойств нанокомпозитов на основе бактериальной целлюлозы – медицина.

Своеобразной лекарственной формой являются раневые покрытия. В последнее время появилось много образцов раневых покрытий, отличающихся по химическому составу основы и по добавляемых в них лекарственным веществам. Но до сих пор не существует универсального препарата, пригодного для использования во все фазы раневого процесса.

В настоящее время в качестве матрицы для создания перевязочных и сшивающих материалов служат синтетические полимеры (в основном это синтетические гидрогели). Однако эти вещества обладают неполной биосовместимостью с тканями человека. В отличие от них бактериальная целлюлоза обладает хорошей биосовместимостью и не вызывает отторжения.

Одним из необходимых условий антимикробной защиты является применение антимикробного препарата в период оперативного вмешательства с целью создания концентраций препарата в тканях оперируемого органа, достаточных для подавления микрофлоры, которая может вызвать развитие в послеоперационном периоде гнойных осложнений.