Отгонка соляной кислоты из диализатов. Отгонка ведется по методике описанной в 1. 2. 4. 1.

Качественный анализ.

1.4.4.1. Реакция с нитратом серебра. Выполнение реакции. К 1—2 мл дистиллята прибавляют 1—2 капли 5 % раствора нитрата серебра и 1 мл разбавленной азотной кислоты. Появление белого осадка хлорида серебра, растворимого в аммиаке, указывает на наличие соляной кислоты в дистилляте.

Оценка результатов. Появление белого осадка хлорида серебра, растворимого в аммиаке, указывает на наличие соляной кислоты в дистилляте.

1.4.4.2. Реакция с хлоратом калия. Выполнение реакции. К 1 мл дистиллята прибавляют несколько кристалликов хлората калия (КСlО ₃) и нагревают. При наличии соляной кислоты в дистилляте выделяется свободный хлор, который можно обнаружить по посинению йод-крахмальной бумажки.

Приготовление йод-крахмальной бумажки (см. п. 1.3.3.1.).

Едкие щелочи и аммиак

Общие указания. Из щелочей токсикологическое значение имеют гидроксид калия, гидроксид натрия и аммиак. Отравления другими щелочами встречаются относительно редко.

Доказательством отравлений едкими щелочами является ярко выраженная щелочная реакция водных вытяжек из биологического материала и наличие в них катионов соответствующих металлов. Щелочность среды определяют при помощи фенолфталеина, который изменяет окраску при рН = 8 - 10. Изменение окраски фенолфталеина происходит не только под влиянием едких щелочей, но и под влиянием карбонатов щелочных металлов, при гидролизе которых образуются едкие щелочи. Поэтому при исследовании вытяжек на наличие едких щелочей в них проверяют рН и присутствие карбонатов щелочных металлов.

2.1. Выделение едких щелочей из биологического материала. Исследуемые объекты измельчают, заливают дистиллированной водой и настаивают 2—3 часа. Затем смесь воды и измельченного объекта фильтруют. К фильтрату прибавляют 2—3 капли спиртового раствора фенолфталеина.

Оценка результатов. Появление розовой или красной окраски указывает на наличие едких щелочей или карбонатов щелочных металлов в вытяжках.

После этого исследуют вытяжки на наличие карбонатов щелочных металлов (реакция с хлоридом бария) и на присутствие в них катионов калия, натрия и аммония.

Методика исследования на наличие карбонатов щелочных металлов (реакция с хлоридом бария) и на присутствие в них катионов калия, натрия и аммония.

2.2.1. Выполнение пробы. К части водной вытяжки из биологического материала прибавляют несколько капель 5 %-го раствора хлорида бария и 2— 3 капли спиртового раствора фенолфталеина. Оценка результата. При наличии карбонатов щелочных металлов в вытяжках выпадает белый осадок ВаСО₃ и исчезает розовое или красное окрашивание раствора (окраска фенолфталеина). Если в вытяжках содержатся едкие щелочи и отсутствуют карбонаты, то после прибавления раствора хлорида бария не появляется осадок, но сохраняется красная или розовая окраска вытяжек. При наличии в водных вытяжках смеси карбонатов щелочных металлов и едких щелочей после прибавления раствора хлорида бария образуется белый осадок ВаСО₃ и сохраняется розовая или красная окраска вытяжек.

ГИДРОКСИД КАЛИЯ

Общие указания. На наличие гидроксида калия в биологическом материале указывают: ярко выраженная щелочная реакция водных вытяжек из биологического материала или диализатов, отсутствие карбонатов и присутствие в вытяжках ионов калия.

2.2.1. Качественный анализ. Поскольку оба реактива с ионами калия дают осадки в нейтральной или слабокислой среде, диализаты, имеющие щелочную реакцию, нейтрализуют или доводят до слабокислой реакции (рН = 3 - 4) раствором уксусной кислоты. После этого приступают к обнаружению ионов калия в диализатах.

2.2.1.2.Реакция с гидротартратом натрия. Выполнение реакции. В маленькую пробирку вносят 3—5 капель исследуемого диализата, прибавляют 3—4 капли 1 н. раствора гидротартрата натрия или такой же объем смеси равных количеств 2 н. раствора винной кислоты и 2 н. раствора ацетата натрия. Для ускорения образования осадка стенки пробирки осторожно потирают стеклянной палочкой.

Оценка результатов. В присутствии ионов калия выпадает белый кристаллический осадок. Реакции мешают ионы аммония, которые с гидротартратом натрия тоже дают осадок.

2.2.1.3.Реакция с кобальтинитритом натрия. Выполнение реакции. 3—5 капель исследуемого диализата вносят в маленькую пробирку и прибавляют 2—3 капли раствора кобальтинитрита натрия.

Оценка результатов. Выпадение желтого осадка указывает на наличие ионов калия в диализате. Реакции мешают ионы аммония, йодиды и некоторые восстановители.

Приготовление реактива. Кобальтинитрит натрия (раствор). В 50 мл воды растворяют 23г нитрита натрия. К этому раствору прибавляют 3г нитрата кобальта (III), 20 мл 5н. раствора уксусной кислоты, а затем воду до 100 мл. Полученный раствор оставляют на сутки, затем фильтруют. Реактив используют свежеприготовленным.

2.2.1.4. Реакция окрашивания пламени. Выполнение реакции. При внесении в бесцветное пламя горелки графитового стержня или платиновой проволоки, смоченной диализатом, наблюдают окрашивание пламени.

Оценка результатов. Окрашивание пламени в фиолетовый цветуказываетна наличие ионов калия в диализате.

ГИДРОКСИД НАТРИЯ

Общие указания. При отравлении гидроксидом натрия водные вытяжки из биологического материала или диализаты имеют ярко выраженную щелочную реакцию и в них содержатся ионы натрия.

2.3.1.Реакция с гидроксостибиатом калия. Выполнение реакции. К 3—5 каплям диализата, нейтрализованного уксусной кислотой, прибавляют 2—3 капли раствора гидроксостибиата калия. Ст Для ускорения образования осадка стенки пробирки осторожно потирают стеклянной палочкой.

Оценка результатов. Выпадение белого кристаллического осадка указывает на наличие ионов натрия в вытяжке.

При малой концентрации ионов натрия осадок может появиться только через некоторое время. Поэтому растворы, содержащие малые количества ионов натрия, предварительно концентрируют упариванием. Реакции мешают ионы аммония, магния, лития и др. В присутствии ионов аммония выпадает осадок НSbО ₃, а в присутствии ионов магния и лития — белые осадки антимонатов этих ионов.

Приготовление реактива. Гидроксостибиат калия (раствор). В 100 мл горячей воды растворяют 2,2 г гидроксостибиата калия. Полученный раствор кипятят в течение 2 мин. После охлаждения к раствору прибавляют 3,5 мл 6 н. раствора гидроксида калия. Жидкость оставляют на сутки, а затем фильтруют.

2.3.2. Реакция с цинк-уранилацетатом. Выполнение реакции. Реакцию на ионы натрия можно выполнять в пробирке и на предметном стекле. Для выполнения этой реакции применяют диализат, нейтрализованный уксусной кислотой.

2.3.2.1. 3—4 капли диализата вносят в пробирку, прибавляют 8— 10 капель раствора цинк-уранилацетата.

Оценка результатов. Появление зеленовато-желтого осадка указывает на наличие ионов натрия в диализате.

2.3.2.2. На предметное стекло наносят каплю диализата, который выпаривают досуха. После охлаждения стекла рядом с сухим остатком наносят 1—2 капли раствора цинк-уранилацетата. Концом заостренной стеклянной палочки реактив надвигают на сухой остаток.

Оценка результатов. При наличии ионов натрия образуются светло-желтые или зеленовато-желтые кристаллы, имеющие форму тетраэдров или октаэдров.

Ионы аммония и калия мешают этой реакции тогда, когда их концентрация в 20 раз больше концентрации ионов натрия. Этой реакции также мешают арсенаты и фосфаты, которые разлагают реактив и дают фосфат или арсенат цинка.

Приготовление реактива. Цинк-уранилацетат (раствор). К 55 мл воды прибавляют 10 г ацетата уранила, 30 г ацетата цинка и 9 мл 6 н. раствора уксусной кислоты. Эту смесь нагревают до растворения реактива, а затем прибавляют воду до 100 мл. Через 24 часа полученный раствор фильтруют и применяют его в качестве реактива.

2.3.2.3. Реакция окрашивания пламени. Выполнение реакции. При внесении в бесцветное пламя горелки графитового стержня или платиновой проволоки, смоченной диализатом, наблюдают окрашивание пламени.

Оценка результатов. Окрашивание пламени в желтый цветуказываетна наличие ионов калия в диализате.

АММИАК

Общие указания. Основанием для заключения об отравлении аммиаком является ярко выраженная щелочная реакция (по фенолфталеину) водной вытяжки из органов трупа и наличие в этой вытяжке ионов аммония.

Однако обнаружение аммиака в биологическом материале не всегда позволяет сделать вывод об отравлении этим препаратом. Это объясняется тем, что при гниении органов трупа и других объектов биологического происхождения всегда образуются определенные количества аммиака. Кроме аммиака при гниении биологического материала образуется сероводород и ряд других веществ.

Поэтому, прежде чем приступить к исследованию водных вытяжек из биологического материала или диализатов на наличие аммиака, химик-эксперт должен проверить эти жидкости на присутствие сероводорода как одного из продуктов гниения белковых веществ. Обнаружение сероводорода в вытяжках из биологического материала указывает на протекание процессов гниения исследуемых объектов, в результате чего образуется как сероводород, так и аммиак. Поэтому при наличии сероводорода в биологическом материале эти объекты на присутствие аммиака не исследуют. На присутствие аммиака подвергают анализу только те органы трупа, которые не подверглись гнилостным изменениям и не содержат сероводорода.

2.4.1. Обнаружение сероводорода. 3—5 мл вытяжки из биологического материала или диализата вносят в колбу вместимостью 50 мл, в которую прибавляют 10% раствор соляной кислоты до кислой реакции на лакмус. Колбу сразу же закрывают пробкой, в прорезы на нижней поверхности которой вставлена полоска фильтровальной бумаги, смоченная раствором ацетата свинца.

Оценка результатов. При наличии сероводорода образуется сульфид свинца, в результате чего бумага чернеет.

Приготовление бумаги, смоченной ацетатом свинца. К 5%-му раствору ацетата свинца прибавляют 5%-й раствор гидроксида натрия до растворения образующегося осадка. В полученный раствор на 1—2 мин погружают полоски фильтровальной бумаги, которые затем высушивают на воздухе.

2.4.2. Реакция с сульфатом меди и лакмусом. В колбу вместимостью 50 мл вносят 10—15 мл водной вытяжки из биологического материала или диализата. Колбу закрывают пробкой, на нижней поверхности которой в прорезы вставляют две индикаторные бумажки (влажная красная лакмусовая бумажка и бумажка, смоченная раствором сульфата меди).

Оценка результатов. Посинение лакмусовой бумажки и бумажки, смоченной раствором сульфата меди (образуется [Cu(NH₃)₄ ]SO₄), указывает на наличие аммиака в вытяжке из биологического материала. Нагревание колбы на водяной бане ускоряет изменение окраски индикаторных бумажек.

2.4.3.Реакция с реактивом Несслера. Выполнение реакции. В пробирку вносят 1—2 капли исследуемой вытяжки или диализата, прибавляют 3—5 капель воды и 3—4 капли реактива Несслера.

Оценка результатов. В присутствии аммиака выпадает желто-бурый или оранжево-коричневый осадок. Реакции мешают ионы железа (III) и другие ионы, которые со щелочами дают осадки, а также ионы ртути (II), сурьмы (III), олова (II), которые реагируют с ионами йода и разрушают реактив Несслера.

Приготовление реактива Несслера В 50 мл воды растворяют 50г йодида калия. К этому раствору при постоянном перемешивании прибавляют насыщенный раствор хлорида ртути (II) (6 г хлорида ртути (II) в 100 мл воды) до появления устойчивого осадка йодида ртути. Затем прибавляют 200 мл 6 н. раствора гидроксида калия и воду до 500 мл. Реактив сохраняют в темном месте.

Соли щелочных металлов

Общие указания. В химико-токсикологические лаборатории на исследование могут поступать объекты биологического происхождения, содержащие соли щелочных металлов. Для выделения этих солей применяют метод, основанный на изолировании токсикологически важных веществ водой. К числу таких веществ относятся нитриты и ряд других веществ.

НИТРИТЫ

Для выделения нитритов из биологического материала применяют метод настаивания исследуемых объектов с водой, который используется для выделения минеральных кислот и щелочей (см. п.1.2.2.)

Водные вытяжки, полученные при настаивании биологического материала с водой, фильтруют. Полученные фильтраты подвергают диализу. Диализаты доводят до нейтральной реакции, а затем определяют наличие нитритов.

Качественный анализ.

3.1.1.1. Реакция с сульфаниловой кислотой и β-нафтолом. Выполнение реакции. В углублении на капельной пластинке или в маленькую пробирку вносят 1—2 капли нейтрализованного диализата, прибавляют 2—3 капли 0,5 %-го раствора сульфаниловой кислоты в 2 %-й соляной кислоте. После перемешивания этих жидкостей через 3—5 мин прибавляют каплю щелочного раствора β-нафтола.

Оценка результатов. При наличии нитритов в исследуемом растворе появляется интенсивная оранжево-красная окраска. Интенсивность окраски зависит от содержания нитритов в пробе.

Приготовление щелочного раствора β-Нафтола (раствор). В 40 мл 10 %-го раствора гидроксида натрия растворяют 2 г β-нафтола и прибавляют воду до 100 мл. Этот раствор используют свежеприготовленным.

3.1.1.2.Реакция с реактивом Грисса. Выполнение реакции. В углубление на капельной пластинке или в маленькую пробирку вносят несколько капель нейтрализованного диализата, а затем прибавляют 3—4 капли реактива Грисса.

Оценка результатов. При наличии нитритов в водной вытяжке сразу или спустя некоторое время появляется интенсивная красная окраска. Интенсивность окраски зависит от количества нитритов в пробе.

Приготовление реактива Грисса Для получения этого реактива готовят 2 раствора: 1 % раствор сульфаниловой кислоты в 30 % растворе уксусной кислоты (раствор А) и 0,1 % раствор α-нафтиламина в 30 % растворе уксусной кислоты (раствор Б). Перед употреблением смешивают равные объемы растворов А и Б.

Примечание. Если при реакции с сульфаниловой кислотой и с реактивом Грисса появляется слабоинтенсивная окраска, то возникает вопрос о возможном появлении окрасок не за счет нитритов, вызвавших отравление, а за счет наличия их в окружающей среде. Б этих случаях проводят отгонку нитритов из диализатов в токе оксида углерода (IV).

Часть подлежащего исследованию диализата вносят в колбу вместимостью 50 мл и подкисляют уксусной кислотой, которая из нитритов вытесняет азотистую кислоту и не вытесняет азотную кислоту из нитратов. После подкисления диализата из аппарата Киппа через колбу пропускают ток оксида углерода (IV), который переносит азотистую кислоту или ее ангидрид в приемник, содержащий 1 % раствор гидроксида натрия.

После отгонки азотистой кислоты содержимое приемника нейтрализуют 10 %-м раствором соляной или уксусной кислоты (не допуская избытка этих кислот), а затем в нейтрализованном дистилляте определяют наличие нитритов при помощи описанных выше реакций с реактивом Грисса, с сульфаниловой кислотой и β-нафтолом, а также с помощью реакции окрашивания йод-крахмальной бумажки.

3.1.1.3. Обнаружение нитритов с помощью йод-крахмальной бумажки. На йод-крахмальную бумажку наносят каплю 1 %-го раствора соляной кислоты и 3—4 капли нейтрализованного дистиллята. При наличии нитритов в дистилляте йод-крахмальная бумажка синеет.

Приготовление йод-крахмальной бумажки (см. п. 1.3.3.1.).

Оценка результатов. При положительных реакциях дистиллята с сульфаниловой кислотой, реактивом Грисса и йод-крахмальной бумажкой делают вывод о наличии нитритов в биологическом материале.

Для решения вопроса о составе нитритов, обнаруженных при помощи указанных выше реакций, производят реакции на катионы натрия и калия. С этой целью берут диализат и поступают так, как указано выше (см. п.2.3.2. и 2.2.1.2.).