Методы микробиологической диагностики менингококков.

Бактериологический – выделяют чистую культуру возбудителя и проверяют её чувствительность к сульфаниламидным препаратам и антибиотикам. Материалом служит ликвор, кровь, экссудат, слизь из зева и носоглотки. Серологические реакции – обнаружение специфические менингококковые антигены или антитела к ним (реакция коагглютинации, латекс-агглютинации, ИФМ и микрометод эритроиммуноадсорбции – для обнаружения антигенов. РПГА и ИФМ – для обнаружения антител).

32. Формы менингококковой инфекции
Соответственно клинической классификации менингококковую инфекцию делят на локализованную и генерализованную. К локализованным формам относят менингококконосительство, острый назофарингит и изолированную менингококковую пневмонию. Генерализованные формы: острая и хроническая менингококкемия, менингококковый менингоэнцефалит, менингококковый менингит. Существуют редкие формы: менингококковый артрит или полиартрит, менингококковый эндокардит и иридоциклит. Частое распространение получили смешанные формы менингококковой инфекции.

33. Патогенез инфекции.

Заражение происходит воздушно-капельным путём. Входными воротами инфекции являются носоглотка, откуда менингококки проникают в лимфатические сосуды и в кровь. Могут вызывать следующие клинические формы болезни: назофарингит, менингококцемия, эпидемический цереброспинальный менингит. В некоторых случаях развивается менингококковый эндокардит. Летальность 60-70%

 

34. Какие заболевания вызывают пневмококки. Пневмок.явл.основными возбудителями остр.и хронич.воспалит.заболеван.легких, которые занимают одно из ведущих мест в заболеваем., инвалидизации и смертности населения всего мира.

Пневмок.наряду с менинг.явл.главными возбудит.менингита. Кроме того, они вызывают ползучую язву роговицы, отиты, эндокардиты, перитониты, септицелии

35. Бактериологический метод.

При отборе и посеве исследуемого материала следует соблюдать следующие требования: исключить случайную контаминацию материала посторонней микрофлорой и не допустить гибели возбудителя с момента взятия материала для анализа и до начала работы с ним в лаборатории. Первое условие обеспечивают правильным забором материала, точным доступом к очагу инфекции, соблюдением асептики; второе - доставкой образцов или посевов в лабораторию незамедлительно в теплом виде или временное сохранение до доставки в условиях термостата при 37 °С в течение не более чем 12 часов.

Бактериоскопический метод.

Бактериоскопически исследуют соскобы с поверхности геморрагических элементов сыпи, спинномозговую жидкость, кровь, слизь из носоглотки, а в случае смерти внутренние органы. Выделенные кокки идентифицируют по морфологическим, культуральным и серологическим признакам.

Серологическая классификация.

Менингококки классифицируют по составу полисахарида на 12 серологических групп - A, B, C, X, Y, Z, W-135, 29E, K, L, H, I, из которых только первые три серогруппы (А, В, С) отвечают за более чем 90% случаев клинически выраженной генерализованной менингококковой инфекции.38.

Профилактика.

Менингококковая вакцина полисахаридная группы А сухая предназначена для профилактики менингококковой инфекции. Состав: капсульный специфический полисахарид менингококка серогруппы А. Способ применения: подкожно однократно в подлопаточную полость или в верхнюю треть плеча.

 

40. Отличия пневмококков от других стрептококков.

Идентификация пневмококков проводится на основании: морфологических особенностей роста; фенотипических характеристик; антигенной структуры (серологический метод).

41. Факторы патогенности менингококков.

Менингококки обладают адгезивными, токсическими, инвазивными и антифагоцитарными свойствами.

1. Факторы адгезии - пили и белки наружной мембраны клеточной стенки.

2. Инвазию менингококков обуславливают ферменты - гиалуронидаза, протеаза, фибринолизин, нейраминидаза. Протеаза разрушает sIgA, обеспечивающий местный иммунитет на слизистый носоглотки.

3. Основной токсический фактор - это эндотоксин, освобождающийся при гибели менингококков и обладающий пирогенным, некротическим и летальным действием.. Некоторые штаммы менингококков продуцируют гемолизин.

4. Антифагоцитарныей фактор - это полисахаридная капсула ме-нингококков, которая защищает N.meningitidis от гибели в вакуолях фагоцитов, где менингококки беспрепятственно размножаются, как в "инкубаторе", вызывая генерализацию процесса при последующем разрушении фагоцитов. Плазмокоагулаза, вырабатываемая менингококками, также обладает антифагоцитарной активностью.

42. Какие заболевания вызывают гонококки.

Гонококк - возбудитель гонореи - венерического заболевания с воспалительными проявлениями в моче-половых путях (у женщин гонорея может стать причиной бесплодия. Мужчины — носители гонококка — страдают поражением яичек, что тоже — верный путь к бесплодию. Заражение новорождённых часто приходится на слизистые поверхности глаз, а это грозит нарушением зрения и даже полной слепотой).

43. Морфологические, тинкториальные, культуральные свойства гонококков.

Неподвижные аспорогенные грамотрицательные диплококки (средний размер клетки 1,25+1,0x0,7+0,8 мкм), напоминающие кофейные зерна или бобы, прилегающие друг к другу уплощенными сторонами, образующие капсулу. Полиморфны — встречаются более мелкие или более крупные клетки, а также палочковидные формы. Хорошо окра-шиваются анилиновыми красителями (метиленовым синим, бриллиантовым зеленым и др.), цитоплазма имеет включения. Под действием пенициллина образуют. L-формы; под влиянием химиопрепаратов быстро меняют свойства и становятся грамположительными.

Аэробы, хемоорганотрофы; для роста требуют свежеприготовленных влажных питательных сред с добавлением нативных белков крови, сыворотки или асцитической жидкости; широко используют безасцитные среды (например, среда КДС-1 с гидролизатом казеина, дрожжевым аутолизатом и нативной сывороткой); оптимум рН 7,2—7,4, температуры — 37 "С. Не вызывают гемолиза на средах, содержащих кровь; на средах с добавлением молока, желатина и картофеля не растут. Через 24 ч на плотных питательных средах гонококки, содержащие в клеточной стенке протеин II, образуют слегка мутные бесцветные колонии; бактерии, не содержащие протеин II, образуют круглые прозрачные колонии в виде капель росы (1—3 мм в диаметре) с ровными краями. На жидких питательных средах растут диффузно и образуют поверхностную пленку, через несколько дней оседающую на дно.

44. Бактериоскопическая диагностика гонореи.

Бактериоскопическое исследование является основным методом диагностики острой гонореи и бленнореи. Готовят два мазка, один из которых окрашивают по Граму, а второй — метиленовым синим, и микроскопируют. В мазке, окрашенном по Граму, в положительном случае можно обнаружить грамотрицательные диплококки бобовидной формы, а в мазке, окрашенном метиленовым синим, — картину незавершенного фагоцитоза. Окраска по Граму позволяет дифференцировать гонококки с другими бактериями. Для получения более четких очертаний гонококков мазки фиксируют диметилсульфоксидом. В связи с тем, что в исследуемом материале могут находиться и другие грамотрицательные бактерии, морфологически сходные с гонококками, применяют прямой и непрямой варианты РИФ. При прямом варианте мазки обрабатывают флюоресцирующими антителами против гонококков, при непрямом — используют гонококки, сыворотку больного и антиглобулиновую сыворотку.

45. Бактериологическая диагностика гонореи.

Бактериологическое исследование проводят в тех случаях, когда гонококки в мазках не обнаруживают или находят атипичные, измененные формы. Культуральный метод позволяет выявлять гонококки в 1,5—4,0 раза чаще, чем бактериоскопический метод. Особенно показаны посевы при хронической гонорее, гонорейном проктите и контроле на излечение. Из-за низкой устойчивости гонококка в окружающей среде посев производят непосредственно после забора материала на чашки с сывороточным или асцитическим агаром, КДС-1. Добавление к среде ристомицина и полимиксина М (10 ЕД/мл) значительно повышает высеваемость гонококков. Перед посевом питательную среду нагревают в термостате, чашки с посевами инкубируют в эксикаторе в атмосфере, обогащенной 10 % С02. Выделение и идентификацию возбудителя проводят по стандартной схеме.

46. Серологическая диагностика гонореи.

Серологический метод используют при хронической гонорее, при отсутствии у больного выделений. Проводят РСК по Борде—Жангу по стандартной схеме, которая бывает положительной с 3—4-й недели болезни; в острых случаях реакция положительна у 35 % больных, при хронических — у 65 % (слабоположительная у 100 %). В качестве АГ для РСК применяют гоновакцину или АГ из убитых гонококков. Более достоверна люминесцентная диагностика с использованием прямого и непрямого иммунофлюоресцентного анализа.

47. Иммунитет при гонорее.

Иммунитет по своему механизму — нестерильный, после перенесенного заболевания невосприимчивость к вторичным заражениям не вырабатывается, поэтому часто регистрируются повторные заболевания, возможны супер- и реинфекции. Животные резистентны к гонококкам, лишь внутрибрюшинное введение микробов вызывает гибель мелких лабораторных животных.

48. Для каких целей используют гоновакцину.

Лечение: при хронической осложненной гонорее, а также свежей торпидной лечение сводится к специфической или неспецифической иммунотерапии и к местному воздействию на пораженный орган. Чем больше давность гонорейного процесса, чем значительнее выражены соединительнотканные изменения, тем интенсивнее должны быть иммунотерапия и местное лечение. Иммунотерапия, которая может быть специфической (гоновакцина) или неспецифической (пирогенал и т. п.), способствует более быстрому и полному рассасыванию воспалительных инфильтратов. Чаще всего применяют гоновакцину, которую вводят внутримышечно через 1—2 дня; курс лечения состоит из 6—8 инъекций.

49. Факторы патогенности гонококков.

К ним относятся: капсула, пили, эндотоксин, поверхностные белки наружной мембраны, протеазы.

Обычна не просят о них рассказывать, но это на всякий случай!

Все свежевыделенные культуры имеют капсулу, которая обладает антифагоцитарным действием (препятствует прямому контакту микробицидных субстанций с клеточной стенкой, маскирует ее антигенные детерминанты). АТ-опсонины к АГ капсулы стимулируют фагоцитоз гонококков. Полисахариды в капсулах не обнаружены, присущие им функции выполняют высокомолекулярные поверхностные полифосфаты.

Пили обеспечивают адгезию к эпителию. Генетически опосредованная вариабельность строения пилей обеспечивает прикрепление и выживаемость гонококков на клетках эпителия при смене хозяина и воздействии AT. У авирулентных штаммов они отсутствуют.

Клеточная стенка содержит эндотоксин. Это липополисахарид, который состоит из липида А и центрального ядра (антигенной детерминанты) — олигосахарида, не имеющего боковых цепей. Липополисахариды N. gonorrhoeae проявляют сильные иммуногенные свойства. АТ к ним обладают бактерицидной активностью.

Белки клеточной оболочки. Проявляют сильные иммуногенные свойства. На основании их состава выделяют 16 сероваров. АТ к белкам клеточной стенки обусловливают комплементзависимый цитолиз. Поверхностный белок 1 класса обуславливает устойчивость к бактерицидным факторам слизистых оболочек, а также инвазивные свойства бактерий и их способность вызывать системные инфекции. Поверхностный белок П класса образует отдельную белковую фракцию, называемую протеинами мутности или Ора-протеинами (от англ. opacity — мутность). Их считают первичными факторами вирулентности гонококков, и они обуславливают прикрепление к эпителию, а также ингибируют фагоцитарные реакции.

Синтезируют IgA - npomeaзy, действующую внеклеточно и разрушающую пролинтреониновые связи в тяжелых цепях Ig, а также расщепляющую молекулу IgA в шарнирной области. Эти эффекты инактивируют AT, препятствующие адгезии, что облегчает прикрепление к рецепторам эпителиальных клеток, а также защищает бактерии от фагоцитоза, опосредованного AT. Резистентность слизистых оболочек во многом обусловлена местной секрецией IgA.

50. Эпидемиология гонококковых инфекций.

Гонорею относят к наиболее распространенным инфекционным заболеваниям, передаваемым половым путем. Источник инфекции — больной человек, особенно хронической бессимптомно протекающей формой гонореи. Экологической нишей являются слизистые оболочки мочеполовых путей человека. Механизм передачи— контактный, путь — половой, крайне редко — бытовой (например, больная гонореей мать может заразить маленькую дочь при пользовании общей мочалкой, сиденьем унитаза и т. п.). Восприимчивость к гонококкам очень высокая. Устойчивость в окружающей среде. Гонококки очень неустойчивы во внешней среде, что следует помнить при заборе и транспортировке исследуемого клинического материала. Чувствительны к действию обычно применяемых антисептиков и дезинфектантов, особенно к солям тяжелых металлов. Высокочувствительны к пенициллинам, тетрациклинам, стрептомицину