Тема: иммунологические методы диагностики инфекционных болезней. Организация массовых диагностических исследований

Серологические реакции и их диагностическое значение. Сероло­гические исследования используют для диагностики инфекцион­ных болезней, а также эпизоотологического надзора.

Суть серологической реакции заключается во взаимодействии антигена и антитела в среде электролита, например растворе хло­рида натрия. С помощью известного антигена обнаруживают спе­цифические антитела в организме больного животного, а с помо­щью известной сыворотки — антиген.

Посредством серологических реакций выявляют бактерионоси­тельство, устанавливают бессимптомный инфекционный процесс, определяют родовую, видовую и типовую принадлежность возбу­дителя, эффективность вакцинации и т. д.

Серологические реакции характеризуются высокой специфич­ностью и чувствительностью: например, наличие белка в крови можно определить с помощью химических реакций (биуретановой пробы) в разведении 1:1000, тогда как с помощью РП — в раз­ведении 1:100 000.

В ветеринарии серологические реакции различных модифика­ций широко используют при диагностике бруцеллеза, лейкоза, сапа, лептоспироза, паратуберкулеза, микоплазмоза и многих дру­гих болезней. В необходимых случаях серологические методы ис­следования сочетают с аллергическими (сап, бруцеллез и др.).

Чтобы получить более достоверные результаты при вирусных инфекциях, рекомендуют исследовать парные сыворотки крови, что дает представление о росте титра антител (последний может свидетельствовать, например, о переболевании животного).

Серологические реакции, особенно их современные модифи­кации (в частности, микрометодики), снижают трудоемкость ди­агностических исследований, сокращают расходы дефицитных ' препаратов и реагентов, исключают опасность заражения персо­нала лаборатории возбудителями инфекционных заболеваний.

Техника взятия крови у животных разных видов. Животных фик­сируют, подготавливают место прокола: выстригают шерсть (у птиц выщипывают перья, у свиней кончик хвоста обмывают теп­лой водой с мылом и высушивают чистым полотенцем), дезинфи­цируют 70%-м этиловым спиртом, спиртовым раствором йода или 3%-м раствором фенола.

Иглы (рис. 1) перед началом работы тщательно чистят мандре-

Рис. 1. Иглы:

инъекционные: / — типа Рекорд; 2 — для аллергического исследования; пункционные: 3 — для

спинномозговой пункции; 4— Кассирского для взятия костного мозга; для взятия крови: 5 —

И-51; 6— И-52; 7— Каспера; 8 — Дгофо; 9— Боброва; 10— Сайковича; 11 — Ананьева

 

 

ном, промывают водой из спринцовок и стерилизуют кипячением в течение 30 мин. Для каждого животного используют отдельную стерильную иглу.

Для серологических исследований у животных берут 8...10 мл крови, у птиц —2...Змл (для исследования на лейкоз — З...4мл, при этом заранее вносят в пробирки 16 ЕД гепарина в 0,2 мл фи­зиологического раствора).

Кровь берут из яремной вены, желательно утром до кормления животных. Большим пальцем или с помощью жгута пережимают яремную вену. При хорошем наполнении вены прокалывают иг­лой кожу и стенку вены под углом 45...50° по направлению к голо­ве. К свободному концу иглы подставляют пробирку или надевают резиновую трубку, конец которой заранее опускают в пробирку. Кровь должна стекать струей по стенке пробирки. Взятая по кап­лям и вспененная кровь скорее гемолизируется и часто бывает не­пригодной для исследования.

Если после прокола кожи кровь не течет, значит, игла еще не попала в вену или прошла вену насквозь. Необходимо уточнить место нахождения конца иглы и спокойно исправить ошибку. Если кровь вытекает каплями, нужно дополнительно сдавить вену пальцем или сильнее затянуть жгут.

Овец прогоняют через раскол, рядом с которым выкапывают траншею глубиной около 1 м. Ветеринарный специалист находит­ся в этой траншее, и к нему по очереди подводят овец. Иногда вместо траншеи делают специальный длинный стол высотой 60...90 см. Овец через раскол и трапы загоняют на стол и фиксиру­ют, ветеринарный врач стоит рядом и берет кровь (яремную вену у овец легко пережать пальцем).

Свиней предварительно фиксируют за верхнюю челюсть с по­мощью веревочной петли и пробы крови берут из уха или хвоста путем прокола или надреза сосудов. На практике чаще всего отре­зают скальпелем кончик хвоста. Применяют и такой способ: у за­фиксированного животного хвост поворачивают левой рукой так, чтобы вентральная его поверхность была обращена направо и кверху. На границе средней и нижней трети хвоста строго посере­дине остроконечным скальпелем прокалывают все мягкие ткани до позвоночника. При этом рассекают кожу, подкожную клетчат­ку, мышцы и вентральную артерию поперек. После прокола тка­ней хвосту придают естественное положение и приподнимают нижнюю его треть, для того чтобы операционная рана была от­крыта. Кровь выделяется равномерной струей. Взяв нужное коли­чество крови, место прокола смазывают 5%-м спиртовым раство­ром йода и хвост отпускают. В результате сокращения мышц хвос­та просвет прокола закрывается и кровотечение в течение 3...5 мин полностью прекращается.

Каждую пробирку с кровью закрывают пробкой. На этикетке указывают порядковый номер пробы, кличку или индивидуальный номер животного, фамилию владельца. Пробирки ставят в штатив или связывают по 10 шт. и помещают в ящик.

Оформление документов для отправки проб крови в лабораторию.

Пробы крови направляют в ветеринарную лабораторию вместе с сопроводительным документом {форма 1) и ведомостью в двух эк­земплярах {форма 2).